GUA DE PRCTICAS DE LABORATORIO
INSTITUCIN:
UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FACULTAD:
CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA:
MEDICINA
PERODO ACADMICO:
DOCENTE: Dra. Cristina Tinajero
ASIGNATURA:
SEMESTRE:TERCER SEMESTRE
FECHA DE LA PRCTICA
NMERO DE LA PRCTICA:
HORA:
DURACIN: 4:00HORAS
NOMBRE DE LOS
ESTUDIANTES
PARTICPANTES
TITULO DE LA UNIDAD:
RESPUESTA INMUNE FRENTE A MICROORGANISMOS
TEMA DE LA PRCTICA:
PRUEBA DE VDRL
OBJETIVO GENERAL:
OBJETIVOS
ESPECFICOS :
Realizar una prueba serolgica con sensibilidad y
especificidad para determinar y complementar un
diagnstico de sfilis
Medir los anticuerpos que aumentan cuando se tienen
infecciones ocasionadas por treponemas, es decir, la
sfilis.
Descartar enfermedades tales como: sfilis, tuberculosis,
neumona, varicela, sarampin, paludismo, lepra, entre
otras.
Medir sustancias, llamadas anticuerpos, que se pueden
producir en repuesta al Treponema pallidum, la bacteria
que causa la sfilis.
Identificar los valores normales referenciales para
identificar sfilis.
FUNDAMENTO TERICO
La tcnica de V.D.R.L. (Venereal Disease Research Laboratory) est basada en la capacidad de los
anticuerpos reagnicos (autoanticuerpos generados por la infeccin) de reaccionar con un fosfolpido llamado cardiolipina. El procedimiento se basa en colocar el suero del paciente en contacto
con el sustrato antignico. Si los anticuerpos estn presentes en el suero, stos se unen al sustrato
antignico produciendo la floculacin del mismo. Si el suero evaluado no contiene anticuerpos no
se producir la floculacin.
El antgeno V.D.R.L. SEPSSI () es un antgeno no treponmico. Consiste en una modificacin de
la emulsin de antgeno de V.D.R.L y contiene entre sus componentes cloruro de colina que
aumenta la reactividad de las reaginas en los sueros que no han sido inactivados por tratamiento
trmico. Esta caracterstica constituye una ventaja del producto porque la muestra de suero a
utilizar no tiene que ser inactivada.
MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
MUESTRA: Suero,
cefalorraqudeo (LCR)
plasma
lquido
MATERIALES:
1 gotero
Agitador rotativo ajustable a 180 rpm.
Placa de vidrio transparente con sectores de 14 mm de dimetro cada uno.
Micropipetas para medir los volmenes indicados.
Microscopio
Cronometro
REACTIVOS:
Reactivo A: suspensin acuosa de antgeno de cardiolipina y lecitina purificados, en buffer
fosfatos con cloruro de colina y EDTA de acuerdo a las indicaciones de la O.M.S.
Solucin fisiolgica (para la prueba semicuantitativa).
Solucin de cloruro de sodio 10 g/dl (para la tcnica en lquido cefalorraqudeo).
El antgeno V.D.R.L. SEPSSI
EQUIPOS: MICROSCOPIO
PROCEDIMIENTO:
Metodologa:
Muestra: suero sin inactivar.
No trabajar con sueros hemolizados, lipmicos o contaminados. Los sueros
congelados deben tomar temperatura ambiente antes de realizar el ensayo.
REACCIN CUALITATIVA EN PLACA
En dos celdas de una policubeta de Kline o similar colocar 50 l de suero SIN
INACTIVAR en la primera celda y 50 l de suero diluido 1/10 (diluido con
solucin fisiolgica) en la segunda celda.
Agregar una gota (1/45 ml) de suspensin de antgeno V.D.R.L. SEPSSI a
cada celda.
Rotar la placa durante 4 minutos con movimiento circular, sobre una
superficie plana, a velocidad aproximada 120 r.p.m. en forma manual o 180
r.p.m. en el agitador mecnico.
Leer de inmediato al microscopio empleando 100 aumentos
Interpreta los resultados obtenidos.
GRFICOS Y RESULTADOS: De qu forma y color se visualizan las bacterias?
CUESTIONARIO
1. Cul es el agente causal de la sfilis y describa sus manifestaciones clnicas?
2. Qu tipos de ensayos se utilizan para el diagnstico de la sfilis
3. Cul es el riesgo de una sfilis temprana?
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
BIBLIOGRAFA:
Portnoy, J. y Garzn, W., New and improved antigen suspension for rapid reagin tests for syphilis.
Public Health Rep. 75:985-988 (1960)
Portnoy, J. Bossak, H.N., Falcone, V.H. y Harris, A.: Rapid reagin test with unheated and new
improved antigen suspension. Public Health Rep. 76:933-935 (1961)
Manual de reacciones serolgicas para el diagnstico de la sfilis. Organizacin mundial de la
salud. (1959).
Manual de reacciones serolgicas para el diagnstico de la sfilis. Organizacin mundial de la
salud. (1975).
FIRMA DEL DOCENTE
DIRECTOR DE CARRERA
