Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas

Carrera de Química y Farmacia
INFORME DE LABORATORIO
PRÁCTICA CURVA ESTANDAR DE CALIBRADO PARA EL ION (CrO4)= A PARTIR DEL
#6 CROMATO DE POTASIO ALCALINO
Análisis Instrumental I DOCENTE: DRA. ZORAIDA BURBANO GÓMEZ, MSc
Integrantes:
1. Miranda Hernández Grisney
2. Moreira Vergara Miguel
3. Solórzano Lucas Dayanne
4. Suárez Gómez Johanna
SEMESTRE: SEXTO SEMESTRE PARALELO: G1-A
Objetivos de la práctica de laboratorio.
 Identificar la desviación de la ley de Lambert-beer realizando la curva de calibrado
 Calcular la concentración del Ión Cromato a partir de la solución estándar.
Fundamento
Limitaciones de la ley de Lambert – Beer.
Esta ley permite establecer una relación lineal entre absorbancia y concentraciones de una especie absorbente a una
temperatura dada. La representación de absorbancia frente a concentración es una recta que pasa por el origen. Sin
embargo, se encuentran frecuentes desviaciones con relación a la proporcionalidad directa entre absorbancias y
concentraciones que limitan la aplicación de la ley. (Cordoba, 2017)
Las principales causas son:
 La concentración. Sólo es aplicable a disoluciones diluidas (menor 10-2 M); en disoluciones concentradas la
distancia entre partículas absorbentes es tan pequeña que se produce una modificación en la distribución de
cargas de las mismas, lo que se traduce en una alteración en la capacidad de absorción a una longitud de onda
determinada. Este efecto se puede eliminar mediante dilución.
 La interacción entre el soluto y la radiación debida a mecanismos diferentes a la absorción pero que producen
alteraciones en la intensidad de la luz, tales como la dispersión, reflexión, la fluorescencia, etc.
 Utilización de radiación no monocromática, puesto que la ley está definida para radiaciones con una sola
longitud de onda. Sin embargo, si la calidad del equipo no es buena, se obtienen bandas de radiaciones con
un estrecho intervalo de longitudes de onda.
 Falta de uniformidad de la muestra o especie absorbente, o presencia de impurezas.
 Desviaciones químicas, debidas a reacciones del absorbente con el disolvente.

Limitaciones a la Aplicabilidad de la Ley de Lambert – Beer: Se encuentran pocas excepciones a la generalización

que la absorbancia está relacionada linealmente a la longitud del camino óptico. En cambio, las desviaciones de la
proporcionalidad directa entre la absorbancia medida y la concentración, para b constante, son más frecuentes. Estas
desviaciones son fundamentales y representan limitaciones reales de la ley. Algunas ocurren como una consecuencia
de la manera en que las mediciones de absorbancia se hacen, o como un resultado de cambios químicos asociados
con cambios en la concentración. Otras ocurren a veces como desviaciones instrumentales. (Palacios, 2015)

Limitaciones Propias de la Ley de Lambert – Beer: Esta ley es exitosa en describir el comportamiento de absorción
de soluciones diluidas solamente; a concentraciones altas (generalmente mayores que 0,01 M), la distancia promedio
entre las especies responsables de la absorción está disminuida hasta el punto de que cada una afecta la distribución
de cargas de sus vecinas. Esta interacción, a su vez, puede alterar la habilidad de las 8 especies para absorber en una
longitud de onda de radiación. Debido a que la extensión de la interacción depende de la concentración, la ocurrencia
de este fenómeno provoca desviaciones de la relación lineal entre absorbancia y concentración. Un efecto similar se
encuentra a veces en soluciones que contienen altas concentraciones de otras especies, particularmente electrolitos.
La proximidad de iones a la especie absorbente altera la absortividad molar de la última por atracciones
electrostáticas, este efecto se disminuye por dilución. Se encuentran algunas excepciones entre ciertos iones o
moléculas orgánicas grandes, que presentan interacciones significativas a concentraciones debajo de 0,01 M.
Desviaciones de la ley de Beer también surgen porque ε es dependiente del índice de refracción de la solución;
entonces, si cambios de concentración provocan alteraciones en el índice de refracción de la solución, se observan
desviaciones de la ley. (Cordoba, 2017)

Desviaciones de la Ley de Lambert – Beer:

Desviaciones Químicas Aparentes.
Surgen cuando un analito se disocia, se asocia, o reacciona con el solvente para producir un producto teniendo un
espectro de absorción diferente del analito. Por ejemplo, CrO4 2- en función del pH va a absorber diferente.
(Martínez, 2010)

Fuentes de desviación casual.

La linealidad de la relación pT = A = εl[i] se pierde por variaciones aleatorias asociadas a la instrumentación y la
lectura de absorbancia en los fotocolorímetros y espectrofotómetros usados. A continuación, se mencionan las
posibles causas de desviación a la ley de Lambert-Beer en cada elemento instrumental. (Baeza, 2006)
a) A nivel de fuente de luz:
 Lámparas fundidas o gastadas.
 Lámparas inadecuadas.
 Paso óptico bloqueado.
 Variaciones altas de voltaje

b) A nivel del sistema dispersivo:

Para demostrar que la falta de monocromaticidad, se consideran dos haces de luz de diferente longitud de onda λ1 y
λ2 y de intensidades incidentes I01 y I02 a una celda de longitud de paso óptico l y de concentración molar efectiva de
absorbente [i]. A la fotocelda llegan sendos haces de luz no absorbidos I1 y I2:

c) A nivel de las celdas:

 Material óptico inadecuado.
 Celdas mal colocadas.
 Celdas sucias.
 Absorción por reflexión de la luz incidente:
La presencia de una interfase óptica (separación de dos medios de índice de refracción diferente), genera que una
fracción de luz incidente se refleje. Para demostrar la absorción aparente por reflexión se considera un haz de luz
monocromático que cruza una celda vacía. La fracción de luz reflejada depende de los índices refracció n de los
medios que forman la interfase óptica y viene dada por el cociente. (Brunati & Martin, 2016)

d) A nivel del fotodetector:

La principal causa de desviación a la linealidad de la Ley de Lambert-Beer a nivel del fotodetector es la luz externa
que se filtra, Is, y se suma al haz de luz no absorbida. (Brunati & Martin, 2016)
Reactivos de laboratorio.
 Cromato de Potasio 𝐾2 𝐶𝑟𝑂4
 Agua destilada
 Hidróxido de Potasio KOH
Materiales de laboratorio.
 Pipetas volumétricas
 Matraces Volumétricos
Equipos de laboratorio.
 Balanza analítica
 Espectrofotómetro GENESYS 20
Actividades por desarrollar.
1. Preparar 1000ml de una solución de 0.05N de hidróxido de potasio

Pm de KOH= 56.1056g/mol

56.1056 g KOH 1N
X 0.05
X= 2.8052 KOH

2. Calculos para la preparar 500ml de una solución estándar de Cromato de potasio que contenga 70 ug
de ION CROMATO/ml. Utilice como disolvente la solución 0.05N Hidróxido de potasio.

K2CrO4 = 194.1896g/mol
CrO4== 115.993g/mol

194,1896 g K2CrO2 115.993g ml CrO4 0.000011719g K2CrO2 1 ml

x 0.000007ug CrO4 x 500ml
X= 0.00011719 ug K2CrO4 R// X= 0.05859 g K2CrO2

3. ¿Cuál es la concentración en µg del ion cromato/ml de la dilución de trabajo?

𝐶1.𝑉1 0.5𝑚𝑙 .70𝑢𝑔

C1. V1 = C2. V2 𝐶2 = 𝐶2 = = 3.5ug 𝐾2𝐶𝑟𝑂4
𝑉2 10𝑚𝑙

𝐶1.𝑉1 1.0𝑚𝑙 .70𝑢𝑔

C1. V1 = C2. V2 𝐶2 = 𝐶2 = = 7ug 𝐾2𝐶𝑟𝑂4
𝑉2 10𝑚𝑙

𝐶1.𝑉1 1.5𝑚𝑙 .70𝑢𝑔

C1. V1 = C2. V2 𝐶2 = 𝐶2 = = 10.5ug 𝐾2𝐶𝑟𝑂4
𝑉2 10𝑚𝑙

𝐶1.𝑉1 2.0𝑚𝑙 .70𝑢𝑔

C1. V1 = C2. V2 𝐶2 = 𝐶2 = = 14ug 𝐾2 𝐶𝑟𝑂4
𝑉2 10𝑚𝑙

𝐶1.𝑉1 2.5𝑚𝑙 .70𝑢𝑔

C1. V1 = C2. V2 𝐶2 = 𝐶2 = = 17.5ug 𝐾2𝐶𝑟𝑂4
𝑉2 10𝑚𝑙
 1. A partir de esta solución prepare 5 estándares de trabajo:

ALICUOTA VOL. DILUCION CONCENTRACION µg

(MnO4)-/ml
0.5 ml 10 ml 3.5 ug/ml
1.0 ml 10 ml 7 ug/ml
1.5 ml 10 ml 10.5 ug/ml
2.0 ml 10 ml 14 ug/ml
2.5 ml 10 ml 17.5 ug/ml

2. Cuadro de lecturas

Concentración Absorbancia Longitud

de onda

100μM 0,17
150μM 0,26 380 nm

200μM 0,35
250μM 0,43
300μM 0,52

3. Gráfica

Absorbancia vs Concentración
0.6

0.5

0.4
ABSORBANCIA

0.3 y = 0,087x + 0,085

R² = 0,9996

0.2

0.1

0
0 1 2 3 4 5 6
CONCENTRACIÓN

Conclusiones.
Por lo tanto, se logró identificar la desviación de la ley de Lambert-beer realizando una curva de calibrado con una
pendiente de y = 0,087x + 0,085 y un R² = 0,9996, así mismo se calculó la concentración del Ión cromato a partir de la
solución estándar presentando su máxima absorbancia en 250 μM con una absorción de energía de 0,43.

Recomendaciones.
 Se deben medir correctamente cada una de las alícuotas para que la lectura de las absorbancias sea lo más
precisa posible y se pueda graficar de forma correcta la curva estándar de calibración.
Bibliografía:
Baeza, A. (2006). Fuentes de desviación causal a la ley de Lambert-Beer. México: UNAM.
Brunati, C., & Martin, A. (2016). Introducción a la Espectroscopía de Absorción Molecular Ultravioleta, Visible e
Infrarrojo Cercano. Bogotá: Reverté.
Cordoba, A. (12 de Marzo de 2017). Limitaciones de La Ley de Lambert. Obtenido de Scrib:
[Link]
Martínez, J. (2010). EL ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO. ABSORCIÓN VISIBLE-ULTRAVIOLETA . Lima.
Palacios, F. (23 de Octubre de 2015). Limitaciones de la Ley de Beer. Obtenido de Aula Virtual :
[Link]
10/espectroscopia_clase_teorica.pdf