Espectrofotometría visible ( Obtención de un espectro de
absorción en la región visible)
Practica No. 2: Espectrofotometría visible
No. Equipo 7
Materia: Quimica Analitica II
Licenciatura en Quimico Farmaceutico Biologo
Alatorre Vazquez Domenico Francisco 215464844
Aguilar Delgado Moises 218552329
Avalos Castañeda David Emmanuel 214791418
Bella Tapia Valeria Desire 219092496
Romero Lopez Uziel Adolfo 220283432
OBJETIVO:
Examinar la curva espectral de absorción del KMnO4
Obtener La longitud de onda de máxima absorción.
Aprender el manejo del espectrofotómetro.
TEORÍA:
Cuando las moléculas interactúan con la energía radiante en la región visible y
ultravioleta, La energía de uno o varios electrones de valencia aumentan y se
desplaza a niveles mayores: este proceso se denomina
absorción.
Se ha observado que el espectro de absorción es una función de la estructura
completa de una sustancia, por ello es una propiedad altamente específica de la
estructura molecular del material absorbente.
Desafortunadamente ciertos factores influyen en los espectros obtenidos (por ejempl
empleado, pH, etc) factores que deben controlarse para un estudio cuidadoso en
particular.
MATERIALES Y EQUIPO:
● Material de uso común de Laboratorio
● Espectrofotómetro (rango de 400-600 nm)
REACTIVOS:
● Solución de KMnO4 de concentración (5x10-4 M) acidificada con H2SO4 2 N
● Solución de H2SO4 2 N
PROCEDIMIENTO ANALÍTICO:
● Seleccione la longitud de onda deseada en el rango de 400-600 nm
● Coloque en una celda solución de KMnO4.
● Coloque en otra celda solución de H2SO4.
● Calibre el instrumento a 0 %T con el compartimento de La celda vacío
(cuerpo negro).
● Calibre el instrumento a 100 %T con la solución de H2SO4.
● Realice la lectura de absorbancia para la solución de KMnO4, (solución
estándar).
● Realice las lecturas de absorbancia en el rango de 400-600 nm, cuyo
intervalo de medición sea 10 nm.
● NOTA: AL cambiar la longitud de onda calibre nuevamente el instrumento de
acuerdo al inciso d) y e).
● Seleccione la longitud de onda de máxima absorción y calibre del instrumento
de acuerdo al inciso d) y e).
● Tome la lectura de una muestra problema proporcionado.
INVESTIGACIÓN:
Aplicaciones del coeficiente de extinción y los factores que lo afectan:
Esta medición se utiliza para determinar la cantidad de analito en una disolución o
un líquido. Es común para el control de la calidad de los alimentos, a través del
contenido en los mismos de hidroxiprolina, almidón o nitritos en carne y productos
cárnicos; lactosa en alimentos y bebidas alcohólicas; o furosina en leche. Para la
detección de detergentes aniónicos, cianuros, amonio, nitritos, cromo o cloro
residual en aguas de consumo y aguas envasadas entre otros usos. Los factores
que lo pueden afectar es la longitud de onda en la cual se esté tomando el dato.
DATOS PREVIOS:
Se analizará con ayuda del espectrofotómetro de región visible una solución de
KMnO4 previamente obtenida en el laboratorio para poder construir una curva
espectral (de 400 nm a 600 nm) y así poder determinar la longitud de onda mayor y
con ello poder determinar la concentración de la muestra dada.
PARÁMETROS INSTRUMENTALES:
Se utilizó un espectrofotómetro de región visible y soluciones de KMnO4 y H2SO4
como blanco para poder calibrar la curva a las distintas longitudes de onda.
DATOS OBTENIDOS:
λ (nm) %T A λ (nm) %T A λ (nm) %T A
400 82 0.086 500 21.7 0.663 600 56.25 0.249
410 85.5 0.068 510 15.8 0.801
420 86 0.065 520 11.9 0.924
430 82 0.086 530 9 .946
440 77 0.113 540 10 1
450 71 0.148 550 13.9 0.856
460 61.5 0.211 560 12.8 0.892
470 49 0.309 570 25.6 0.591
480 37.7 0.423 580 36.44 0.438
490 37.7 0.423 590 48.32 0.315
Longitud máxima de absorción: 540 nm
Absorbancia de la muestra problema: 0.3528
%Transmitancia de la muestra problema: 41.38
(Muestra problema 6)
E=A/bc = 1/(1cm)(5x10-4)= 2000 cm-1 M-1
c= A/aE = 0.3528/(1cm)(2000cm-1 M-1) = 1.764x10-4
a= A/bc = 0.3528/(1cm)(27.8712)= 0.0126cm-1 mg-1/L
1.764x10-4 mol 158g 1000mg = 27.8712 mg/L
L 1 mol KMnO4 1g
Coeficiente de extencion molar: 2000 cm-1 M-1
Absortividad: 0.0126 cm-1 mg-1/L
Concentración molar de la muestra problema: 1.764x10-4
REFERENCIAS:
● Eyco, L. (2023). ¿Para qué se utiliza la espectrofotometría UV-VIS y
cómo funcionan los equipos de medición? Laboratorios EYCO.
[Link]
etria-uv-vis-y-como-funcionan-los-equipos-de-medicion/
● MERCK. (s. f.). Fotometría y reflectometría. Recuperado 12 de
septiembre de 2023, de
[Link]
photometry-and-reflectometry
ANEXOS:
CONCLUSIÓN :
Esta práctica se trató de cuantificar la absorbancia a partir del porcentaje de
transmitancia, esto permitiéndonos poner en práctica la teoría demostrandonos
como puede aplicarse, además de enseñarnos a usar un nuevo instrumento vital
para los análisis que podríamos llegar a hacer no solo a lo largo de nuestra carrera,
sino también, como profesionales.
LUGAR Y FECHA:
Guadalajara Jalisco, Mexico. Realizado el 12 de septiembre del 2023