CFGS Laboratorio Clínico y Biomédico – Técnicas de Inmunodiagnóstico Cristina Durán Bretón
TAREA PARA TID02
Actividad 1.
Explica la diferencia entre enfermedad autoinmune sistémica y órgano específica
(1 punto).
La enfermedad sistémica se produce cuando los complejos autoantígeno-
autoanticuerpo circulan pro la sangre y se depositan en diversos órganos, produciendo
principalmente lesiones del tejido conectivo que se observan en la piel, los glomérulos
del riñón, articulaciones, membranas serosas y vasos sanguíneos.
En cambio, la enfermedad órgano específica afecta sólo a un órgano o un tipo celular
concreto de un órgano determinado y se asocian a autoanticuerpos dirigidos
selectivamente contra dicho órgano o tipo celular.
Actividad 2.
Para detectar anticuerpos antinucleares por inmunofluorescencia indirecta:
a) ¿Qué tipos de sustratos se pueden utilizar? (0,5 puntos)
Para detectar anticuerpos antinucleares se utiliza, como sustrato estandarizado, los
cortes histológicos congelados de hígado o riñón de rata o monocapas de cálulas
Hep-2 mantenidas en cultivo celular. Tiene relevancia el título en qué son positivos,
a mayor dilución de la muestra, más significativo es su hallazgo.
b) ¿Qué reactivo o reactivos se precisan? (0,5 puntos)
Para detectar anticuerpos por inmunoflorescencia indirecta, se utiliza un
portaobjetos que contiene un sustrato antigénico específico para el anticuerpo que
se quiere detectar y se incuba el suero problema. Tras un lavado, se añaden anti-Ig
marcadas con fluorocromos (FITC, el más utilizado) y se visualiza la reacción con
un microscopio de fluorescencia.
Actividad 3.
En la tabla siguiente, relaciona cada patrón de inmunofluorescencia con las
características de tinción que le corresponden (1 punto):
Patrones de inmunofluorescencia
Patrones Tinción
A. Homogéneo. 1. Sólida del núcleo.
B. Periférico. 2. Granular del núcleo.
C. Moteado. 3. Tinción de nucléolos (más que el resto del núcleo).
D. Nucleolar. 4. Alrededor del núcleo.
Relación: A-1 B-4 C-2 D-3
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Actividad 4.
a) ¿Contra qué tipo de DNA se dirigen los anticuerpos anti-dsDNA? (0,5
puntos)
Se dirigen contra el DNA bicatenario.
b) ¿En relación a qué enfermedad autoinmune se suele determinar? (0,5
puntos)
Los anticuerpos son marcadores diagnósticos, es decir, sólo se encuentran en
esa alteración y se usan para el diagnóstico de Lupus Eritematoso Sistémico
(LES), con alta especificidad y baja sensibilidad.
Actividad 5.
a) Explica qué es el factor reumatoide (0,5 puntos).
Es el conjunto de anticuerpos dirigidos contra el fragmento Fc de la IgG.
Inicialmente se describió como una IgM, pero en la actualidad se reconcoe la
existencia de factores reumatoides de tipo IgG, IgA e IgE.
Su presencia en elevadas concentraciones es indicativa de artritis reumatoide y
se emplean habitualmente en el diagnóstico de esta enfermedad. Pero, tiene
poca especificidad, ya que los factores están también presentes en otras
patologías autoinmunitarias, neoplásicas, inflamatorias y algunas infecciones.
b) ¿Qué reactivo se utiliza en la técnica de Waaler-Rose? (0,5 puntos)
El reactivo que se utiliza son eritrocitos de oveja sensibilizados con IgG de conejo
anti-eritrocito de oveja.
Son aglutinados por factores reumatoides de tipo IgM presentes en la muestra
del paciente. Es una prueba de hemaglutinación para la detección de factor
reumatoide.
Actividad 6.
a) ¿Qué tipo de inmunoglobulinas (IgA, IgG, IgM…) se determinan cuando se
estudian anticuerpos específicos en la enfermedad celíaca? (0,25 puntos)
Se determinan anticuerpos anti-endomisio, anticuerpos anti-transglutaminasa
tisular y anticuerpos anti-gliadina.
b) ¿En general, por qué no se determinan inmunoglobulinas de otro tipo?
(0,25 puntos)
Los anticuerpos a detectar son preferentemente de tipo IgA, ya que los
anticuerpos IgG son menos específicos para el diagnóstico.
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c) En la enfermedad celíaca, ¿cuándo se determinan anticuerpos específicos
del tipo IgG? (0,5 puntos)
Se realiza cuando se detecta que el paciente tiene un déficit aislado de IgA, los
anticuerpos específicos de clase IgA siempre son negativos y la detección
serológica de la enfermedad se realiza analizando los mismos anticuerpos, pero
de clase IgG.
Actividad 7.
En la tabla siguiente, relaciona cada enfermedad autoinmune con el anticuerpo
detectado (1 punto):
Enfermedades autoinmunes
Enfermedad autoinmune Anticuerpo
A. Síndrome antifosfolipídico. 1. Anti-peroxidasa tiroidea.
B. Diabetes autoinmune. 2. Anti-cardiolipina.
C. Titoiditis de Hashimoto. 3. Anti-TSHR.
D. Enfermedad de Graves. 4. Anti-gliadina.
E. Enfermedad celíaca. 5. Anti-islote pancreático.
Relación: A-2 B-5 C-1 D-3 E-4
Actividad 8.
a) ¿Con qué tipo de hipersensibilidad se relaciona la dermatitis atópica? (0,5
puntos)
Hipersensibilidad tipo I o mediada por IgE, inmediata o anafiláctica.
b) ¿Con qué tipo de hipersensibilidad se relaciona la dermatitis de contacto?
(0,5 puntos)
Hipersensibilidad tipo IV o retardada (linfocitos T activados, gran secreción
citocinas y producción de reacción inflamatoria).
Actividad 9.
a) ¿Qué tipo o tipos de prueba cutánea se realizan para el estudio de alergias
alimentarias? (0,5 puntos)
Se utiliza el Prick prick test: se deposita un trozo fino del alimento sospechoso,
fresco y sin ninguna manipulación previa, sobre la piel; y se atraviesa ambos con
una lanceta. También se puede realizar el prick by prick (variación del anterior),
donde se pincha con una lanceta el alimento fresco y luego la piel del paciente.
b) ¿Qué tipo de prueba cutánea se realiza para el estudio de dermatitis de
contacto? (0,5 puntos)
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Se puede realizar el test del parche (Patch test), que es una prueba epicutánea,
depositando sobre la piel sana el alérgeno que se va a probar bajo un material
adhesivo durante 8 horas. Se valorará a las 48, 72 o 96 horas.
También se puede realizar la intradermorreacción que es una técnica
intracutánea, la más utilizada es la prueba de la tuberculina. En este caso, se
inyecta el alérgeno en la dermis con una jeringa hipodérmica y la lectura se
realiza entre las 24 y 48 horas siguientes. La interpretación del resultado
depende del tamaño de la induración producida.
Actividad 10.
a) ¿Qué fluorocromos se utilizan para el test de activación de basófilos por
citometría? (0,5 puntos)
La sangre total del paciente o bien los leucocitos aislados por centrifugación en
gradiente de densidad, se incuban con el alérgeno sospechoso y posteriormente
se añaden dos anticuerpos marcados con fluorocromos diferentes: anti-CD63-
PE y anti-IgE-FITC.
b) ¿De qué color es la fluorescencia exhibida por cada fluorocromo? (0,5
puntos)
La unión de anti-IgE-FITC a su superficie proporciona fluorescencia verde
gracias al FITC, cuantificando el total de basófilos.
La unión de anti-CD63-PE a su superficie proporciona fluorescencia roja gracias
a la ficoeritrina, cuantificando los basófilos activados.
