TECO DIAGNOSTICS FACTOR REUMATOIDE
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REACTIVO PARA FACTOR REUMATOIDE (RF) MATERIALES PROPORCIONADOS.
Para la determinación cualitativa y semicuantitativa de Factor reumatoide en 1.- Reactivo RF látex.
suero. 2.- Control positivo RF.
3.- Control negativo RF.
INTRODUCCION. 4.- Buffer Glicina salino.
Los factores reumatoides (RF) son anticuerpos dirigidos contra sitios en el 5.- Placa de reacción.
fragmento Fc de la IgG animal y humana. Su frecuente ocurrencia en la artritis 6.- Agitadores/Pipetas.
reumatoide los hace útiles para el diagnostico y monitoreo de la enfermedad1,2.
Un método que se usa para la detección del factor reumatoide se basa en la MATERIALES REQUERIDOS NO PROPORCIONADOS.
habilidad del suero con artritis reumatoide para aglutinar células rojas de oveja 1.- Reloj.
sensibilizadas, como lo mostró Waaler3 y Rose4. Luego se descubrió un reactivo 2.- Tubos de ensayo.
más sensible que consiste en látex inerte cubierto con gammaglobulina humana 3.- Pipetas serológicas.
y que fue descrito por Singer y Plotz5. La mayor ventaja del método es el rápido
desempeño (tiempo de reacción 3 minutos) y no interfieren anticuerpos PROCEDIMIENTO.
heterófilos. Prueba Cualitativa.
1.- Los reactivos y especímenes deben estar a temperatura ambiente antes de
PRINCIPIO. usarse.
El reactivo de Factor reumatoide es una suspensión de partículas de látex de 2.- Ponga una gota (50 µL) del Control Positivo de RF en el campo No. 1 de la
poliestireno sensibilizadas con IgG humana preparada especialmente. El reactivo laminilla de reacción. Ponga una gota (50 µL) del Control Negativo de RF en el
se basa en la reacción inmunológica entre la IgG humana unida a las partículas campo No. 2. Los campos restantes se usan para las muestras. Usando las pipetas
de látex biológicamente inertes y el factor reumatoide en el espécimen. Cuando proporcionadas ponga una gota de especímenes en los campos sucesivos.
el suero que contiene el factor reumatoide se mezcla con el reactivo de látex, Retenga las pipetas para mezclar.
ocurre la aglutinación visible. El reactivo de factor Reumatoide de látex 3.- Suavemente re suspenda el Reactivo RF látex y agregue una gota a cada
sensibilizado ha sido ajustado para detectar un mínimo de 8 IU/mL de factor campo de reacción. Use el palillo pipeta para extender la mezcla en la placa.
reumatoide de acuerdo con los estándares internacionales de la OMS sin previa 4.- Rote la placa por 2 minutos y lea inmediatamente bajo luz directa.
dilución de la muestra. NOTA: La aglutinación de la partícula de látex es un resultado positivo (vea la
figura 1). La aglutinación indica una concentración positiva de RF igual o mayor
REACTIVOS. de 8 IU/mL. Los sueros con aglutinación positiva se deben evaluar una vez más
1.- Reactivo látex RF: con la prueba cuantitativa.
Una suspensión uniforme de partículas de poliestireno cubiertas con IgG humana
en buffer de glicina a pH 8.2; la sensibilidad del reactivo esta estandarizada con Prueba Cuantitativa.
el estándar de RF de la OMS. MEZCLE BIEN ANTES DE USAR. 1.- El reactivo y el Buffer deben estar a temperatura ambiente antes de usarse.
2.- RF control positivo: 2.- Con el Buffer Salino de Glicina, diluya el espécimen1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32
Suero humano estabilizado pre diluido con al menos 8 IU/mL de FR. o según sea necesario.
3.- RF Control Negativo: 3.- Ponga una gota (50 µL) de negativo y otra de positivo en una laminilla.
Suero humano no reaccionante con el reactivo de prueba Ponga una gota de cada dilución en los campos sucesivos de la placa de
4.- Buffer Glicina- Salina (20x), pH 8.2 Glicina 0.1 M; NaCl 0.15 M. reacción.
4.- Re suspenda suavemente el Reactivo RF en látex y agregue una gota a cada
Nota: Diluya el buffer según instrucciones en la etiqueta antes de campo de prueba. Use el palillo pipeta para extender la reacción sobre todo el
usarse (por ejemplo: 20 mL de agua destilada con 1 ml de Buffer). campo.
Todos los reactivos contienen 0.1% de azida de sodio como 5.- Rote la laminilla durante 2 minutos y lea inmediatamente debajo de la luz
preservativo. Almacene los reactivos a 2-8 °C. NO CONGELE. directa.
CONTROL DE CALIDAD.
PRECAUCIONES. 1.- Se deben usar Controles Positivos y negativos de RF en cada grupo de
1.-Los reactivos con azida de sodio se pueden combinar con cobre y plomo para pruebas.
formar azidas metálicas altamente explosivas. Deseche los reactivos con grandes 2.- El desempeño aceptable se indica cuando se forma una suspensión uniforme
cantidades de agua para prevenir la formación de azidas. y lechosa sin muestras de aglutinación con el Control RF Negativo y la
2.- Para diagnostico in Vitro. aglutinación con grandes agregados se observa con el control positivo.
3.- Los controles positivo y negativo preparados con suero humano son
negativos para Hepatitis B, pero se deben manejar con cuidado como si fueran INTERPRETACION
potencialmente infecciosos. Prueba Cualitativa:
Resultado negativo: Una reacción negativa se indica por la suspensión uniforme
ALMACEN Y ESTABILIDAD DEL REACTIVO. sin muestras de aglutinación en la mezcla de reacción. La reacción del
1.- Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad de la botella cuando se espécimen se debe comparar con los controles positivo y negativo para RF.
almacena en refrigeración (2-8°C) Resultado positivo: Una reacción positiva es indicada por cualquier aglutinación
2.- NO SE CONGELE. observada en la mezcla de reacción.
3.- El reactivo de látex RF una vez agitado debe ser uniforme sin grumos Prueba Semicuantitativa:
visibles. Cuando se almacena en refrigeración, puede ocurrir una ligera La concentración del suero es el reciproco de la dilución mas alta en que
sedimentación y se debe considerar normal. muestra reacción positiva.
4.- No use el reactivo látex o control si se contaminan. Un estimado de la concentración de RF en un espécimen se puede expresar en
IU/mL usando la siguiente ecuación:
COLECTA Y ALMACENAJE DE LA MUESTRA.
1.- Use el suero separado del coagulo por centrifugación.
2.- Si no se puede realizar la prueba el mismo día, el suero se debe almacenar en
refrigeración (2-8°C) por no mas de 72 horas después de la colecta.
3.- Para periodos prolongados se debe congelar.
4.- Como en las pruebas serológicas, el suero hemolítico o contaminado no se
debe usar.
5.- NO USE PLASMA.
TECO DIAGNOSTICS FACTOR REUMATOIDE
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Fabricado por:
IU/ml de espécimen=IU/mL control X titulo del espécimen
Positivo Negativo
Figura 1.
LIMITACIONES.
1.- Los resultados se deben leer en 2 minutos después de mezclar o extender el
reactivo sobre la laminilla.
2.- No se ha encontrado la existencia de prozona a titulaciones elevadas.
3.- Los incrementos de RF pueden estar alrededor de enfermedades diferentes a
artritis reumatoide como infección por mononucleosis, sarcodosis, lupus
eritematoso, síndrome de Sjorgen`s6,7.
4.- Algunos pacientes con artritis reumatoide pueden no tener RF en suero. 6
VALORES ESPERADOS.
1.- El diagnostico de artritis reumatoide está basado en exámenes clínicos, pero
los exámenes de laboratorio son útiles para apoyar el diagnostico clínico y para
avaluar la severidad y curso de la enfermedad. Uno de los marcadores clínicos
para artritis reumatoide es el factor Reumatoide en suero. Factor Reumatoide es
un término usado para describir una variedad de anticuerpos o complejos
inmunes o ambos, que suceden con artritis reumatoide así como en una variedad
de enfermedades8.
2.- Los diferentes estudios han mostrado que las reacciones serológicas son
positivas para factor reumatoide en el 90% de los pacientes con artritis
reumatoide comparado con menos de 5% en grupos de control.1
DESEMPEÑO
1.- Sensibilidad: 8 IU/mL o más.
2.- Comparación:
A. Resultado cualitativo:
Se evaluó en un total de 75 muestras de pacientes de hospitales. La prueba
cualitativa se evaluó por comparación con una prueba de aglutinación
comercialmente disponible. Este estudio mostró un 96% de correlación entre
ambas pruebas. La discrepancia se obtuvo en muestras con dilución muy cercana
al límite de sensibilidad de los reactivos.
B. Resultados semicuantitativos.
Se cuantificó un panel de 10 sueros positivos para RF. Los resultados del estudio
indicaron una precisión del 100%.
REFERENCIAS:
Distribuido por:
Grupo Tecnología y Laboratorios S.A de C.V.
T. (81) 8370 7992
[Link]
