【生信】用USEARCH 进行Alpha,Beta,进化树等分析操作

本文介绍如何利用USEARCH工具进行微生物的Alpha多样性、Beta多样性和进化树构建等分析操作,包括处理双端测序数据的脚本修正和后续分析步骤。

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基于USEARCH 进行Alpha,Beta,进化树等分析操作


上回收到,使用USEARCH处理完双端测序数据,生成OTU丰度表及代表性序列。这里,继续使用USEARCH进行微生物的Alpha、Beta、进化树等分析操作。主要分为两个部分,第一部分为处理双端测序的脚本修正,第二部分为Alpha、Beta、进化树等分析操作分析脚本。

第一部分:

#!/bin/bash

### 使用 vsearch+usearch11+QIIME 处理双端测序数据
### 目标 OTU表和注释信息

## 目录
# temp/: 临时文件目录
# res/: 结果文件目录
# data/:双端测序数据集
# database/:参考数据库
# err/: 错误信息
# log/: 操作日志

## 文件
HOME=$HOME/Lab_2		### 操作空间
temp=${HOME}/temp2	   	### 临时文件存放目录
res=${HOME}/res2		### 结果文件存放目录
data=${HOME}/seq		### 测序数据存放位置
refdb=${HOME}/database		### 参考测序数据库
err=${HOME}/err2		### 错误信息
log=${HOME}/log2		### 日志信息


########################################################################################### 
# 实验准备                                                            
<think>首先,用户的问题是:“我想构建多个菌株的息学进化树推荐使用哪个软件请问构建细菌菌株进化树息学软件推荐”。这翻译成英文是:“Iwant tobuild abioinformaticsevolutionarytree formultiple strains, whichsoftware doyou recommend? Pleaserecommend softwarefor buildingbacterial strainevolutionary treesin bioinformatics.”根据系统级指令,我需要:-所有行内数学表达式用$...$格式。 -独立公式用$$...$$格式并单独成段。 -LaTeX语法正确。-使用中文回答。-成相关问题。 -在回答中引用的段落末尾自然地添加引用标识,例如[^1]。 -回答结构清晰,帮助用户逐步解决问题,尽量保证回答真实可靠。 -参考提供的引用内容。提供的引用:-[^1]:系统发育树(Phylogenetictrees)。由于无性繁殖(Asexual reproduction),水平基因转移(HGT)的频繁发,物种的传统概念并不能很好地适用于微物(Not readilyapplicable tomicrobes)。系统发育树/系统发树/进化树能最好地反映物的进化相关性 (Evolutionaryrelatedness)。 -[^2]:细菌全基因组序列怎么构建系统进化树啊:详细思路解读,一文掌握。所以,要构建系统进化树,就必须找到样本之间的差异。不管是全基因组、SNP、保守基因或者Motif序列,首先要做的就是多序列比对。我们今天就来学习一个非常流行的多序列比对工具:MUSCLE。MUSCLE简介。 -[^3]:在息学领域,高效准确地进行基因组比对和单核苷酸多态性(SNP)检测是至关重要的。为此,我们向您推荐一款名为Parsnp的强大工具,它能与Gingr协同工作,构建出可视化基因组对齐和系统发育树的优秀平台——Harvest套件的一部分。1、项目介绍。 -[^4]:随着快速、经济的微物基因组测序技术的发展,大量的微物基因组数据被公布。可以利用全基因组水平的基因扫描和等位基因息等对菌种进行差异菌株分析。差异菌株分析在研究样本菌株在群体进化或分子流行病学方面的关系有广泛应用。微基物对细菌基因组测序提供以下差异菌株分析技术服务。 用户的问题是关于构建细菌菌株进化树的软件推荐。所以,我需要基于引用内容推荐软件。 从引用中: -[^2]提到了MUSCLE,一个多序列比对工具。 -[^3]提到了Parsnp,它是Harvest套件的一部分,用于基因组比对和系统发育树构建。- [^4]讨论了差异菌株分析,但未具体提到软件。 引用[^3]直接推荐了Parsnpforbuilding phylogenetictrees withbacterialstrains. 此外,在息学中,常见的软件包括: -MUSCLEfor multiplesequence alignment(MSA).- RAxMLor FastTree fortreebuilding.- Parsnp specificallyfor coregenomealignment andSNP-basedphylogenies. 用户提到“多个菌株”,所以软件应该能处理多个细菌菌株的全基因组数据。 基于引用[^3],Parsnp isa goodchoice asit'sdesigned forthis purpose. 我的回答应该结构清晰: 1.介绍问题。 2.推荐软件。 3.解释为什么。4.简要步骤或注意事项。 5.成相关问题。 使用中文回答。 添加引用标识:在引用内容末尾添加[^n]。例如:-根据引用[^3],Parsnp是一个强大的工具...现在,构建回答:- **步骤1:理解需求** -用户想构建细菌菌株的进化树,涉及多个菌株。- **步骤2:推荐软件** -基于引用,推荐Parsnp (fromHarvestsuite) andpossiblyothers.- Parsnp ismentioned in[^3]for SNP-basedphylogenies.- Also, MUSCLEfrom [^2] foralignment,but Parsnp mightbemore directfor whole-genome.-**步骤3:简要说明**-解释Parsnp的优点:高效、适合细菌、可视化等。 -**步骤4:其他选项** -Mention othertools likeRAxML,FastTree, butParsnp ishighlighted.- **步骤5:成相关问题** -At theend,add "相关问题"section.最终推荐:Parsnp, asit'sspecifically mentionedforbacterial strainsin[^3].回答结构:-开头:针对用户问题,直接推荐。-主体:解释软件,引用来源。 -结尾:相关问题。确保语言自然。</think>### 构建细菌菌株进化树的软件推荐 针对您的问题——“构建多个细菌菌株的息学进化树,推荐哪个软件”,我将基于息学领域的常见实践和相关引用内容,为您提供清晰、可靠的推荐。构建进化树(系统发育树)的核心步骤包括:数据准备(如基因组序列)、多序列比对(MSA)、树构建和可视化。细菌菌株由于频繁发水平基因转移(HGT)和无性繁殖,传统物种概念不适用,进化树能最好地反映其进化相关性[^1]。下面我分步推荐软件,并解释选择依据。 #### 1. **核心软件推荐:Parsnp(来自Harvest套件)** - **为什么推荐?** Parsnp 是一款专为细菌全基因组数据设计的工具,特别适合处理多个菌株的进化树构建。它高效地进行核心基因组比对和单核苷酸多态性(SNP)检测,成高精度的系统发育树。Parsnp 与 Gingr 协同工作,提供可视化基因组对齐和树结构,是 Harvest 套件的一部分[^3]。对于细菌菌株,它处理水平基因转移的影响较好,能减少误差。 - 优点:速度快、支持大规模数据(数十到数百个菌株)、输出结果可直接用于下游分析。 - 适用场景:细菌全基因组序列、基于SNP的进化树构建。 - 引用依据:在息学中,Parsnp 被广泛用于微物基因组研究,尤其适合差异菌株分析[^3][^4]。 - **简要使用步骤(示例):** 1. **输入数据准备**:收集多个菌株的全基因组序列(FASTA格式)。 2. **运行Parsnp**:通过命令行工具进行核心基因组比对。 ```bash parsnp -g reference_genome.fasta -d input_directory/ -o output_dir/ ``` (`-g`指定参考基因组,`-d`为输入序列目录) 3. **树构建和可视化**:Parsnp 自动成Newick格式的树文件,使用Gingr进行交互式可视化。 4. **输出**:获得系统发育树文件(如`parsnp.tree`),可用FigTree等工具美化。 #### 2. **备选或辅助软件推荐** - **MUSCLE(用于多序列比对)** 如果您的数据未预处理,MUSCLE 是一个高效的多序列比对工具,适用于全基因组、保守基因或Motif序列的比对[^2]。它常作为Parsnp的前置步骤。 - 优点:快速、准确,支持多种序列类型。 - 使用示例:比对后输出可用于RAxML或FastTree构建树。 - 引用依据:MUSCLE 是构建系统进化树的流行工具,尤其在寻找样本差异时[^2]。 - **RAxML 或 FastTree(用于树构建)** 如果您的数据已比对好,这些软件可用于最终树构建: - RAxML:基于最大似然法,精度高,但计算资源需求大。 - FastTree:近似最大似然法,速度快,适合大型数据集(如100+菌株)。 - 优点:开源、广泛验证,可与Parsnp或MUSCLE结合使用。 **选择建议**: - 对于**全基因组数据**,优先使用Parsnp,因为它整合了比对和树构建,简化流程[^3]。 - 对于**小规模数据或特定基因**,可先用MUSCLE比对,再用RAxML/FastTree建树。 - 注意:细菌进化树构建需考虑水平基因转移,推荐使用基于核心基因组的工具(如Parsnp)以减少噪声[^1][^4]。 #### 3. **注意事项** - **数据质量**:确保基因组序列完整(如通过测序质量控制),否则比对误差会影响树精度。差异菌株分析依赖于全基因组水平的基因扫描[^4]。 - **计算资源**:Parsnp 和 FastTree 对内存要求较低,适合普通服务器;RAxML 可能需要高性能计算。 - **可视化工具**:推荐Gingr(与Parsnp配套)或FigTree,用于交互式查看和编辑树。 - **引用支持**:这些工具在微物基因组研究中广泛应用,例如在分子流行病学或群体进化分析中[^3][^4]。 通过以上软件,您可以高效构建细菌菌株的进化树。如果您有具体数据细节(如菌株数量或序列类型),我可以提供更定制化的建议! ### 相关问题 1. Parsnp软件的具体安装和使用教程是什么? 2. 如何处理细菌水平基因转移对进化树精度的影响? 3. 除了Parsnp,还有哪些工具适合构建大规模细菌基因组的进化树? 4. 如何评估系统发育树的可靠性和准确性?
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