UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PRACTICA Nº 1
PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS
OBJETIVOS
➢ Observar algunas propiedades físicas de los aminoácidos.
➢ Reconocer la presencia de aminoácidos por la reacción de estos con la
Ninhidrina
➢ Identificar algunos grupos funcionales presentes en aminoácidos específicos
mediante la formación de productos coloreados.
TEORÍA RELACIONADA
Las células vivas producen macromoléculas que son biopolímeros constituidos por
unidades monoméricas o bases estructurales. Para las proteínas, estas unidades son los
L – α – aminoácidos. Las propiedades biológicas de estas macromoléculas están
determinadas en gran parte por las clases de aminoácidos presentes, el orden en el que
están dispuestos en una cadena de polipéptidos y por lo tanto la relación espacial de un
aminoácido con otro. Los aminoácidos contienen grupos funcionales amino y carboxilo. En
un α – aminoácido, ambos están unidos al mismo átomo (α) de carbono. De los
aminoácidos presentes en la naturaleza, sólo 20 de ellos aparecen en las proteínas de
todas las formas de vida, vegetal, animal o microbiana. Los aminoácidos intervienen en la
transmisión de impulsos en el sistema nervioso (Glicina y acido glutámico). Los
aminoácidos esenciales deben ser suministrados en la alimentación, ya que nuestros
cuerpos no pueden sintetizarlos en cantidades adecuadas para respaldar el crecimiento
(niños) o para conservar la salud (adultos).
Reacción de la Ninhidrina: Es un agente oxidante poderoso, reacciona con todos los α
aminoácidos a un pH entre 4 y 8 para dar un compuesto de color púrpura. Esta reacción se
efectúa también con los aminoácidos prolina e hidroxiprolina, pero en este caso se obtiene
un color amarillo en vez de púrpura.
Reacción Xantoproteica: Los aminoácidos que contienen un núcleo aromático forman
nitroderivados de color amarillo cuando se calientan con ácido nítrico concentrado. Las
sales de estos derivados son de color rojo naranja.
Reacción de Millon: Los compuestos que contienen el radical hidroxibenceno reaccionan
con reactivo de millón formando compuestos rojos. Los únicos aminoácidos fenólicos son
la Tirosina y sus derivados y solamente ellos dan una reacción positiva. El reactivo original
de Millon es una solución de nitrato mercúrico en ácido nítrico 50% v/v.
Reacción del Ácido Glioxílico para Triptófano: Grupo indólico del triptófano reacciona con
ácido glioxílico en presencia del ácido sulfúrico concentrado dando un color púrpura.
Reacción de Sakaguchi: El único aminoácido que contiene grupos guanidinos es la
Arginina; esta reacciona con α naftol y un agente oxidante tal como agua de bromo o
hipoclorito en un medio alcalino, dando un color rojo.
MATERIALES Y REACTIVOS
10 Tubos de ensayo 1 Gotero.
1 Gradilla 1 Estufa
1 Pinza para tubos de ensayo. 1 Beaker de 500mls
3 Pipetas de 1, 5 y 10 mL Papel indicador
Soluciones al 0.5% de aminoácidos: Glicina, Tirosina, Triptófano, Fenilalanina, Arginina.
Ninhidrina: Disolución al 0.2% en alcohol o acetona.
HNO3 al 10%
NaOH al 20% o amoniaco.
Fenol, disolución al 0.1%
Reactivo de Millón.
Agua de bromo
α- Naftol: 0.2%
Nitrito de sodio.
Ácido glioxílico
Acido sulfúrico.
PROCEDIMIENTO
1. Examen Físico: Anote el estado físico de la sustancia (Aminoácidos): Sólido, líquido,
polvo, solución, cristal. Si es homogénea.
Color: Ver si es uniforme o si cambia durante el proceso.
Olor: Percibir si se trata de olor característico o relacionado con un grupo químico.
2. Reacción de la Ninhidrina: Coloque 1 ml de solución de aminoácido (glicina, tirosina
y triptófano) en un tubo de ensayo y ajuste el pH cerca de la neutralidad (ya esta ajustado);
agregue 5 gotas de solución de ninhidrina, deje hervir por 3 minutos y anote sus resultados.
3. Reacción Xantoproteica: Adicione 1 ml de solución de ácido nítrico a
aproximadamente 1 ml de solución de aminoácido (glicina, tirosina, Triptófano, y
fenilalanina), calentar por 3min, deje enfriar y observe el cambio de color. Agregue
suficiente NaOH al 20% hasta que la solución sea fuertemente alcalina. El cambio de
coloración de amarillo en solución ácida a naranja brillante en solución álcali constituye un
resultado positivo.
4. Reacción de Millon: A 0.5 ml de la muestra (Glicina, tirosina, y fenilalanina) adicione
3 gotas del reactivo de millon y caliente en un baño de agua hirviendo por 10 minutos. Deje
enfriar a temperatura ambiente agregue 5 gotas de solución de nitrito de sodio, la aparición
de un color rojo ladrillo indica un resultado positivo.
5. Reacción del Ácido Glioxílico para el Triptófano: A 1 ml de la muestra (glicina,
tirosina y Triptófano agregue 1 ml de ácido glioxìlico,. Observe bien el color inicial en cada
caso.
Agregue 1 ml de acido sulfúrico por las paredes del tubo, la formación de un anillo color
púrpura indica que la reacción es positiva.
6. Reacción de Sakaguchi: Mezcle 0.5 ml de álcali fuerte con 1.5 ml de solución de
aminoácido (glicina y arginina) y agregue dos gotas de α naftol. Mezcle fuertemente y
agregue cuatro a cinco gotas de agua de bromo. Note el color formado.
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1- Escriba la reacción para cada prueba realizada.
2- De acuerdo con las pruebas realizadas en esta práctica proponga una clasificación
para los aminoácidos.
3- Identifique los grupos químicos que caracterizan a los aminoácidos.
4- Explique como se encuentran estructuralmente los aminoácidos en el plasma
sanguíneo o líquido intracelular cuyo pH es de 7.4 y 7.1 respectivamente.
5- Cuales son las explicaciones prácticas de las pruebas realizadas.
BIBLIOGRAFÍA
PLUMER, D.T. Introducción a la bioquímica práctica. México. MaGraw- Hill
Latinoamericana, S.A.
CONN, E y Stumpf, P.K. Bioquímica F.
LOPEZ, E y ANZOLA, C. Guías de laboratorio de Bioquímica. Facultad de ciencias.
Universidad Nacional de Colombia sede Bogota.
