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Taller Nº1

Este documento presenta los resultados de un ensayo de sorción de colorante de Bradford para determinar la cantidad de proteínas presentes. Se calculó la ecuación de la recta de calibrado usando mínimos cuadrados y se obtuvo y=0,0218x + 0,0046. El gráfico de los datos experimentales y la recta calculada muestra una buena correlación. Se calculan también los valores de d i , d 2i , S 2b , S 2m del ensayo.

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Taller Nº1

Este documento presenta los resultados de un ensayo de sorción de colorante de Bradford para determinar la cantidad de proteínas presentes. Se calculó la ecuación de la recta de calibrado usando mínimos cuadrados y se obtuvo y=0,0218x + 0,0046. El gráfico de los datos experimentales y la recta calculada muestra una buena correlación. Se calculan también los valores de d i , d 2i , S 2b , S 2m del ensayo.

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UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA

La Universidad Católica de Loja

ÁREA BIOLÓGICA Y BIOMÉDICA


TÍTULO DE INGENIERO QUÍMICO

TALLER Nº1

AUTORES: Cuenca Buele, Jhordan Fabricio; Godoy Paucar, Sonia Priscila;


Ochoa Roa, José Andrés

DOCENTE: Solano Cueva, Natalí Elizabeth Mg.

ASIGNATURA: Química Analítica “A”

LOJA - ECUADOR

2020
Taller Nº1

1. Curva de calibrado. Un procedimiento normal para determinación de proteínas es el

ensayo de sorción de colorante de Bradford. Según este método, la proteína se trata

con un colorante que, al unirse a ella, cambia su color de pardo a azul. La intensidad

del color azul (medido por la absorbancia de la luz a una longitud de onda de 595

nm) es proporcional a la cantidad de proteína presente.

Proteína (ug):

0,00 9,36 18,72 28,08 37,444

Absorbancia a 595 nm:

0,466 0,676 0,883 1,086 1,280

a) Determinar por mínimos cuadrados la ecuación de la recta, y=[m(± sm )] x+[b(± sb )],

determinada por estos puntos, con un número razonable de cifras significativas.

b) Trazar un gráfico en el que aparezcan los datos experimentales y la recta calculada.

c) Encuentra d i , d 2i , S 2b , S 2m.

Desarrollo

Note que se tuvo que calcular la Absorbancia corregida:

|.|corregida=|.| observada−|.|blanco

|.|corregida=|.| observada−0,0466

Proteína (ug) Absorbancia Absorbancia


observada a 595 nm corregida a 595 nm
0 0,466 0
9,36 0,676 0,21
18,72 0,883 0,417
28,08 1,086 0,62
37,44 1,280 0,814
Elaborado por: Cuenca, Godoy y Ochoa (2020)

a) Ecuación de la recta:

y=mx+b
y=0 ,0218 x +0 , 0046

y= [ m ( ± s m ) ] x + [ b ( ± s b ) ]

y=0 ,0218 (±0 ,000192)x +0 , 0046( ±0 , 00439)

b)

Ensayo de sorción de colorante de Bradford


0.9

0.8 f(x) = 0.02 x + 0


R² = 1
0.7
Absorbancia a 595 nm

0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
Proteína (ug)

Elaborado por: Cuenca, Godoy y Ochoa (2020)

c)

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