Generalidades de los medios de cultivo
Define los medios de cultivo:
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes
que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos. La diversidad
metabólica de estos es tan grande que la variedad de medios de cultivo es enorme, no existiendo
un medio de cultivo universal adecuado para todos ellos, ni siquiera refiriéndonos a las bacterias
con exclusividad.
El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el
crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Para que las bacterias crezcan
adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son:
temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de
acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante (Koch,2012)
Tipos de medios de cultivo:
TIPOS
- Medios de cultivo especifico
Estos productos han sido desarrollados con el propósito de estimular el desarrollo de
organismos específicos, como bacterias, hongos o células de tejido. Incluyen ingredientes y
suplementos específicos que cumplen con los requisitos nutricionales particulares de dichos
organismos.
- Medios de cultivos generales
Son medios de cultivo convencionales que contienen una combinación de nutrientes esenciales,
como fuentes de carbono, nitrógeno, minerales y vitaminas. Diversos microorganismos y células
tienen la capacidad de crecer utilizando estos medios. (Mondino, 2009).
- Medios de transporte
Los medios de cultivo básicos son una mezcla de nutrientes que proporcionan las condiciones
necesarias para el crecimiento de microorganismos y células. Estos medios contienen
componentes esenciales como fuentes de carbono, nitrógeno, minerales y vitaminas, que son
utilizados por los organismos para su desarrollo. Diversos tipos de microorganismos y células
pueden prosperar y multiplicarse utilizando estos medios de cultivo básicos.
- Medios diferenciales
Los medios de cultivo diferenciales son capaces de discernir entre distintos tipos de
microorganismos basándose en cambios visibles o reacciones químicas. Estos medios contienen
indicadores que revelan características metabólicas específicas de los organismos, como
cambios de color o formación de precipitados. Esto simplifica el proceso de identificación y
diferenciación de especies microbianas.
- Medios enriquecidos
Estos medios incluyen componentes nutritivos adicionales, como sueros, extractos de tejidos y
sangre, que proporcionan un mayor nivel de enriquecimiento para favorecer el crecimiento de
organismos más exigentes. Son especialmente beneficiosos para el cultivo de células o bacterias
que requieren condiciones nutricionales más complejas.
- Medios selectivos
El propósito de estos medios es promover el crecimiento selectivo de microorganismos
específicos al mismo tiempo que restringen o inhiben el crecimiento de otros. Contienen
compuestos como colorantes, sales biliares y antibióticos que obstaculizan el desarrollo de
organismos indeseables y permiten un crecimiento selectivo de los organismos de interés.
COMPONENTES
Los diversos componentes que componen los medios de cultivo brindan los nutrientes y las
condiciones necesarias para el crecimiento de los organismos (Támara & Meza, 2019). Las
siguientes son algunas de las partes más comunes de los medios de cultivo:
- Agar
Se trata de una sustancia gelificante que proporciona consistencia sólida a los medios de cultivo.
En este material utilizado en laboratorios de Querétaro, hay un componente dominante: un
polisacárido extraído de algas marinas que no se utiliza como nutriente, excepto para ciertos
microorganismos marinos, lo cual presenta una ventaja. Un gel de este componente, en una
concentración de entre uno y dos por ciento, se vuelve líquido alrededor de los 100 °C y,
dependiendo de su pureza, se solidifica aproximadamente a los 40 °C.
- Extractos
Como parte del proceso de preparación, se obtienen tejidos u órganos de origen animal o vegetal
(como semillas, cerebro, hígado, entre otros) mediante el uso de calor y agua, y luego se
concentran hasta obtener una forma de polvo o pasta. Estos preparados deshidratados son
ampliamente utilizados en los medios de cultivo. Entre los más comunes se encuentran el
extracto de malta, la levadura y la carne.
- Peptonas
Estos son compuestos de sales minerales y sustancias orgánicas y nitrogenadas, obtenidos a
través de procesos de digestión enzimática o química de ciertos vegetales y animales. Se
caracterizan por tener una alta concentración de aminoácidos y péptidos, aunque es posible que
les falten algunas sales minerales y vitaminas.
- Fluidos corporales
Generalmente, es necesario agregar ciertos patógenos y sustancias a los medios de cultivo,
como suero sanguíneo, plasma, sangre completa o desfibrilada, especialmente para obtener el
primer aislamiento a partir del organismo hospedador. La sangre no se puede esterilizar, por lo
tanto, debe extraerse en condiciones asépticas directamente de organismos sanos y agregarse al
medio después de esterilizarlo mediante autoclave.
Los fluidos corporales proporcionan factores de crecimiento y sustancias que eliminan agentes
que inhiben el crecimiento de bacterias específicas. Por ejemplo, las células sanguíneas
contienen catalasa, que elimina el peróxido de hidrógeno que falta en ciertos microorganismos
que carecen de esta enzima y que acumulan dicho peróxido como un subproducto del
metabolismo del oxígeno.
- Sistemas de amortiguación
Para garantizar un pH propicio para el crecimiento bacteriano, se utilizan determinados
componentes. Entre ellos se incluyen sales de fosfato dipotásico y disódico, así como peptonas
y otras sustancias. Estos ingredientes ayudan a evitar desviaciones en el pH, dado que la
mayoría de las bacterias son neutrófilos, es decir, tienen una preferencia por un entorno con pH
neutro.
- Indicadores de pH
En Querétaro, es necesario contar con equipos de laboratorio capaces de detectar las
fluctuaciones de pH que ocurren durante diversos procesos, como la fermentación.
- Agentes reductores y selectivos
Se utilizan agentes reductores en los medios de cultivo para crear condiciones propicias que
favorezcan el crecimiento de microorganismos anaerobios y microaerófilos. Algunos de los
agentes reductores más comúnmente utilizados son el tioglicolato y la cisteína. Por otro lado,
los agentes selectivos se emplean para hacer que el cultivo sea selectivo. Por ejemplo, al agregar
cristal violeta, sales biliares, antibióticos u otras sustancias, se convierten en agentes selectivos
que afectan a ciertos microorganismos de manera específica.
Discusiones:
- La preparación de los medios de cultivo es un aspecto vital en el laboratorio de
Microbiología, ya que su calidad constituye una garantía para la obtención de resultados
confiables.
- Ya una vez explicado los postulados podremos obtener al microorganismo y
posteriormente elaborar un medio de cultivo que es un material nutritivo para el
crecimiento de microorganismos, la mayoría de ellos pueden crecer en cualquier tipo de
cultivo, sin embargo, hay otras que requieren medios especiales, en otras no crecen en
ninguno de los medios existentes.
- Cuando se hace el cultivo en medio solido se le agrega un agente solidificante conocido
como agar que es un polisacárido complejo proveniente de un alga marina utilizada
como espesante de alimentos como jaleas y helados y sirve esencialmente ya que pocos
microorganismos pueden degradar el agar permaneciendo en estado sólido, en los
laboratorios el agar se mantiene en baños de agua a 50°C ya que no altera a la mayor
parte de las bacterias cuando son vertidas.
Bibliografía
Tortora. (2007). Introducción a la Microbiología. Buenos Aires: Panamericana.
Documento de aplicación: “Cultivos celulares”. Madrid: Cultek. 2007.
Pumarola A. “Microbiología y Parasitología médica” 2ª edición. Masson, 1992.
