TEMA 4.

Fecundación

serpadres.es

1
 TEMA 4. Fecundación

Fecundación
1. Conceptos y tipos de fecundación
2. Modificaciones fisiológicas de los espermatozoides
3. Ac6vación de los gametos
3.1. Activación del espermatozoide
Ø Capacitación
Ø Aproximación y reconocimiento (Reacción acrosómica)
Ø Fusión de las membranas celulares
Ø Penetración del espermatozoide
3.2. Activación del ovocito
Ø Activación temprana
Ø Ondas de calcio
Ø Bloqueo de la polispermia (bloqueo rápido y lento)
Ø Procesos tempranos y tardíos

4. Sincronización, anfimixis y activación del cigoto

5. Primeras etapas del desarrollo

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 TEMA 4. Fecundación

1. Conceptos y tipos de fecundación

Fecundación: proceso desde la entrada de los espermatozoides a

la vagina hasta que se unen al óvulo.

A tener en cuenta:

Ø Ocurre solo entre gametos de la misma especie

Ø Sólo un espermatozoide fecunda a cada ovocito (bloqueo polispermia) http://bibliotecadigital.ilce.edu.mx

Fusión de membranas de las dos células sexuales:

- Núcleo del espermatozoide entra en el ovocito (pronúcleo masculino)
- Desencadena el final de la meiosis de OVOCITO II (pronúcleo femenino)
Nos encontramos con 2 tipos:

Fecundación externa

Los espermatozoides son liberados al medio y tienen capacidad de fecundación desde el primer
momento

Fecundación interna

1. Los espermatozoides son liberados en la porción inicial del tracto genital femenino (eyaculación)
2. Los espermatozoides sufren el proceso de CAPACITACIÓN en las vías genitales femeninas 3
 TEMA 4. Fecundación

1. Conceptos y tipos de fecundación

Fecundación: Millones de espermatozoides son depositados en la vagina, atraviesan el
genital femenino hasta la ampolla oviductal y encuentran al ovocito

1. Penetración
1.1. Penetración de la corona radiata
Ø Reacción acrosómica
Ø Denudación del ovocito

1.2. Penetración de la zona pelúcida

Ø Reacción acrosómica

1.3. Fusión de las membranas plasmáticas

Ø Penetración

1.4. Activación del ovocito

2. Anfimixis

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 TEMA 4. Fecundación

1. Conceptos y tipos de fecundación sale

zona pelucida

A-B_Penetración corona radiata

C-D_Anclaje a la zona pelúcida y reacción acrosómica
E-F_Unión a la membrana plasmáYca y entrada en el óvulo

Espacio perivitelino. Espacio que queda entre el ovocito y la zona pelúcida que lo envuelve, de un grosor aproximado de entre 0,2 y 0,4
micras. 5
 TEMA 4. Fecundación

1. Conceptos y tipos de fecundación

Reaccion cortical

Fecundación externa (erizo de mar)

Membrana vitelina: rodea la membrana plasmática del En mamíferos = Zona pelúcida

óvulo y es necesaria para la unión del espermatozoide
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 TEMA 4. Fecundación

2. Modificaciones fisiológicas de los espermatozoides

Los espermatozoides recién espermiados están diferenciados desde el punto de vista estructural
Ø No poseen movilidad
Ø No tienen capacidad fecundante

Ø Se almacenan en la cabeza del epidídimo

Ø Maduran a su paso por la cola del epidídimo

MADURACIÓN EPIDIDÍMARIA

Modificaciones de la superficie del espermatozoide

Incorporación de proteínas con diversas funciones:

- Capacidad fecundante
- Factores discapacitantes (glicoproteínas)
- Adquisición de motilidad
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 TEMA 4. Fecundación

2. Modificaciones fisiológicas de los espermatozoides MADURACIÓN EPIDIDIMARIA

Los espermatozoides en la cabeza del epidídimo carecen de proteínas superficiales

En la cola del epidídimo se agregan proteínas C) Motilidad

superficiales - Proteínas del flagelo (proteína motor
dineína que contribuye a estabilizar la
A) Capacidad fecundante. Proteínas que dan la estructura de los microtúbulos que
capacidad de interaccionar con la corona radiata, servirán a la motilidad espermática)
ZP y membrana del ovocito
- Mitocondrias sufren cambios que
B) Factores discapacitantes (inhiben a las proteínas modifican su capacidad de generar
que dan la capacidad fecundante) ATP
8
Peroxisomas a portan ATP
 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

¿Antes de la penetración que ocurre?

1. Capacitación Activación de los espermatozoides

2. Aproximación y reconocimiento
Pasar la corona radiata
Unión a la zona pelúcida

3. Reacción acrosómica

4. Penetración
Unión al ovocito

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

Conjunto de cambios fisiológicos que sufre un espermatozoide de forma
1. Capacitación
natural para adquirir la capacidad de fecundar al óvulo.

eliminación de las glicoproteínas que integran la membrana plasmática del espermatozoide.

1) Eliminación de colesterol y k+ (membranas plasmática y acrosómica externa)

Por la acción de las proteínas de los fluidos del aparato reproductor femenino (albúmina)
flujos vaginales

Aumenta la fluidez y se facilita la fusión de membranas (formación de poros)

SAle
2) Activación canales iónicos (entran Ca2+ y bicarbonatos) Intercambio con el medio

Ca2+ y bicarbonatos
liberación

Ø Facilitan la formación de poros y por tanto la exocitosis del contenido acrosómico

Ø Activan a la adenilato ciclasa (AMPc)
no todos las activan al mismo tiempo

Reacción acrosómica
Nota: Proceso continuo que se inicia con la capacitación y se acelera tras el contacto con la zona pelúcida 10
 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

1. Capacitación

baja viscosidad el espermatozoide no va en línea recta

liberación de los enzimas

Hiperactivación
porque el espermatozoide tiene que ser
hiperactivado conforme va subiendo por el tracto la
viscosidad va aumentando, estado hiperctivado

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Ac6vación del espermatozoide sale

1. Capacitación

3) Adenilato ciclasa activa la proteína cinasa A (PKA)

Ø Activa la proteína tirosina-cinasa (PTK)

Ø Inactiva las fosfatasas (PTP)

4) PTK fosforilan las glicoproteínas que forman

el “factor discapacitante”

Ø Se pierden las glicoproteínas de la superficie del

espermatozoide

Su presencia impide el reconocimiento por las

proteínas de la zona pelúcida
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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Ac6vación del espermatozoide Proteínas que dan la capacidad de interaccionar con
la corona radiata, ZP y membrana del ovocito
1. Capacitación se van a liberar
Glicoproteínas se liberan las proteinas de reconocimiento está perdiendo
capacidad de fecundación
importantes para la
fusión de las
memebranas del
espermatozoide con
las del ovulo

A) Las moléculas de la superficie del espermatozoide recién eyaculado que intervienen en

la fecundación se encuentran enmascaradas por factores discapacitantes (impidiendo la
fecundación)

capa externa de glicoproteínas

B) Después del contacto con los fluidos tubáricos se desprenden los factores
discapacitantes y quedan expuestos los que intervienen en la fecundación

C) Una vez iniciada la capacitación se inicia el envejecimiento de los espermatozoides por

perdida de las moléculas (pierden capacidad fecundante) 13
 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide Penetración de la corona radiata

Reacción acrosómica
2. Aproximación y reconocimiento
Denudación del ovocito

1) La capacitación facilita la formación de poros por fusión entre las membranas (exocitosis
mediada por el calcio)

Nota: el calcio se acumula en el acrosoma durante el proceso de capacitación

2) Por los poros se liberan las enzimas hidrolíYcas del acrosoma Reacción acrosómica

Ø La membrana externa del acrosoma y la membrana del espermatozoide se fusionan formando

vesículas y poros

Ø La membrana periacrosómica (plasmática) es eliminada

acrosoma

núcleo

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide Penetración de la corona radiata

Reacción acrosómica
2. Aproximación y reconocimiento
Denudación del ovocito

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide Penetración de la corona radiata

Reacción acrosómica
2. Aproximación y reconocimiento
Denudación del ovocito

3) La hialuronidasa es una enzima hidrolítica que se encuentra en el acrosoma

Ø Desagregar las células de la corona radiata

Ø Formar canales para que penetren los espermatozoides (permitiendo el contacto con la ZP)

4) En los espermatozoides que contactan con

la zona pelúcida (que no han sufrido la
reacción acrosómica) esta se desencadena
por la interacción de la ZP3 (glicoproteína)
de la ZP con proteínas receptoras del
espermatozoide

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide Penetración de la zona pelúcida

2. Aproximación y reconocimiento Reacción acrosómica
Reacción corYcal
Reacción Zonal

Reconocimiento entre la membrana plasmática (periacrosómica) del espermatozoide y la zona

pelúcida del ovocito

Mediado por proteínas de la membrana periacrosómica (galactosiltransferasa I)

Se unen específicamente a restos glúcidos de la glicoproteína ZP3 de la zona pelúcida

Dicha interacción provoca la apertura de canales iónicos (entrada

masiva de Ca2+)

Desencadena la Reacción Acrosómica

Ø Liberación de enzimas líticas del acrosoma (hialuronidasa,

neuraminidasa y acrosina)
Ø Permiten atravesar la zona pelúcida (hidrolizan las glicoproteínas de la
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ZP y forman un túnel)
 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide Penetración de la zona pelúcida

Reacción acrosómica
2. Aproximación y reconocimiento Reacción cortical
Reacción Zonal
Reacción Cortical Exocitosis de los gránulos corticales del óvulo (onda Ca2+)

Modificación de la ZP que inhibe la polispermia

(entrada de más de un espermatozoide al óvulo).

Las enzimas hidrolíticas liberadas, en el espacio perivitelino,

por los gránulos corticales del ovocito digieren las proteínas
ZP2 y ZP3 (receptores de espermatozoides), provocando
cambios conformacionales que inmovilizan y expulsan a los
otros espermatozoides.

Reacción Zonal impide la penetración

Ø Se unen específicamente a la ZP2 (verde) y a la ZP3 (rojo)

Ø Se fusionan las membranas y se inicia la acYvación del ovocito 18

 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide Penetración de la zona pelúcida

Reacción acrosómica
2. Aproximación y reconocimiento Reacción cortical
Reacción Zonal

Importante: La ZP está formada por un número variable, según la especie, de

glicoproteínas denominadas de forma genérica ZP1, ZP2 y ZP3. Recientemente, se ha
descrito la ZP4 en humanos, ratas y hámsteres. 19
 TEMA 4. Fecundación

3.1. Ac6vación del espermatozoide

Penetración de la zona pelúcida
2. Aproximación y reconocimiento Reacción acrosómica
Reacción cortical
Reacción Zonal

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

2. Aproximación y reconocimiento Reacción zonal

Los gránulos corticales contienen enzimas líticos que causan un cambio estructural
(reacción zonal) en la zona pelúcida. LIBERACIÓN:

1) N-acetilglucosaminidasa 2) Proteasa

Fragmenta las cadenas de Fragmenta la ZP2 (pierde

hidratos de carbono ZP3 la capacidad de unirse a
espermatozoides)

Separando a la N-
acetilglucosamina Así solo penetra un
espermatozoide
(uno de los glúcidos a los (monospermia)
que se une el
espermatozoide)

galactosiltransferasa I 21
 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

2. Aproximación y reconocimiento Reacción zonal

Las dos acciones impiden la unión de otros espermatozoides a la ZP

“Bloqueo de la
polispermia”

Resumen: funciones de la ZP

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

2. Aproximación y reconocimiento Reacción zonal

Las dos acciones impiden la unión de otros espermatozoides a la ZP

“Bloqueo de la
polispermia”

Resumen: funciones de la ZP

Ø El reconocimiento y la unión del espermatozoide

Ø Desencadena la Reacción Acrosómica
Ø Sufre un cambio estructural y provoca el bloqueo de
la polispermia
Ø Bloqueo de la fecundación heteroespecífica
Ø Protección del embrión hasta la implantación

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

3. Fusión de las membranas celulares Mamíferos

La fusión queda restringida a una región específica de cada gameto:

Espermatozoide

Existe una zona de membrana plasmática

denominada “dominio ecuatorial” (costado)

Dominio ecuatorial: tienen proteínas que

reconocen a las moléculas de la membrana del
ovocito (fertilina y firitestina).

Proteínas receptoras del ovocito (CD9 y a6)

No existe fusión con la membrana acrosomica

durante la Reacción acrosómica

En el dominio ecuatorial se produce el contacto

con el ovocito y se inicia el progreso de fusión
entre ambos gametos
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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

3. Fusión de las membranas celulares Mamíferos

Ovocito

La fusión se produce a nivel de las microvellosidades (presentes en el oolema)

Las microvellosidades aumentan la superficie

y actúan como una plataforma donde se
concentran las proteínas que participan en la
adhesión y fusión

Una vez fusionadas las membranas del

espermatozoide y del óvulo se producirá una
polimerización de actina que ensanchará el
puente citoplasmático entre los dos gametos
para facilitar el paso del contenido del
espermatozoide

La actina movilizada procede del óvulo

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 TEMA 4. Fecundación

3.1. Activación del espermatozoide

4. Penetración (Entrada del espermatozoide)

La fusión de membranas no garantiza la entrada del espermatozoide

La incorporación al citoplasma del ovocito:

- Fenómenos contráctiles que implican una reorganización del citoesqueleto cortical o corteza
celular
- Se forma una abertura en la superficie del ovocito y se emiten seudópodos que rodean al
espermatozoide y lo arrastran al interior

En el ovocito entra la cabeza y la cola del espermatozoide

se desprende

El centriolo del espermatozoide se convierte en el centro

organizador de microtúbulos (aster)

El núcleo del espermatozoide se posiciona en el polo

animal del ovocito donde se forma el pronúcleo
MASCULINO

El resto de consYtuyentes se mezcla en el citoplasma

ovular 26
 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

Liberación factores solubles
Comienza en el momento del contacto espermatozoide-ovocito espermatozoides

Mediante la activación de receptores que siguen con la vía de señalización del inositol trifosfato (IP3)
que causan reacciones a dos niveles:

Citoplasmático

Ø Bloqueo de la polispermia (onda de calcio)

Ø Reacción cortical y reacción zonal
Ø Activación del metabolismo

Nuclear

Ø Termina la meiosis del ovocito eresmama.com

Ø Descondensación de la cromatina espermática
Ø Formación de los pronúcleos

El genoma aportado por el espermatozoide aún no parYcipa

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 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

1. Vía de señalización del IP3 en la activación temprana del ovocito

1. El espermatozoide activa a la TK (tirosina-cinasa)

2. TK activa (fosforila) a fosfolipasa C (PLC) que generan los segundos mensajeros IP3 y Dag

3. El IP3 se une a los canales de Ca2+ (poseen receptores para IP3) de las membranas del REL y se
libera Ca2+

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 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

2. Ondas de calcio

La liberación de Ca2+ se propaga desde el lugar de contacto “espermatozoide-ovocito” a través de

la corteza del ovocito ya que el REL de la corteza posee canales sensibles al Ca2+.

“Como una onda”

Nota: pasa a través del ovocito a una velocidad de 5-10 µm/segundo

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 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

Papel del calcio como señalizador tras la fecundación
2. Ondas de calcio

La frecuencia de estas
ondas varía entre
especies, pero en la
mayoría se producen con
una cadencia de 1 onda
cada 10-20 minutos.

las-hormonas.blogspot.com 30
 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

2. Ondas de calcio

1. Reacción cortical (exocitosis de gránulos

corticales)

Reacción zonal
Bloqueo de la polispermia (tardío o
definitivo)
Bloqueo rápido (temprano)

2. Reactivación del metabolismo celular

por Ca2+

3. División celular

Activación del cigoto

Síntesis de proteínas y ADN

las-hormonas.blogspot.com 31
 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

3. Bloqueo rápido de la polispermia Previo a la reacción cortical

Bloqueo por despolarización de la membrana de la superficie ovular (ovolema)

Mediante un cambio en el potencial eléctrico de la membrana plasmática que actúa como

una barrera selectiva

Este cambio de polaridad causa repulsa en los espermatozoides posteriores al

fecundante (regresa lentamente a su nivel)

En mamíferos la unión desencadena la despolarización rápida del ovolema por una entrada
masiva de iones Na+

Ø Se impiden nuevas fusiones de membrana

Ø Bloqueo temprano, inmediato y transitorio (5 minutos). Inicio bloqueo lento y permanente.

32
 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

4. Bloqueo lento de la polispermia Reacción cortical

Ca2+ Fusión de las membranas de los gránulos corticales y membrana celular

(exocitosis del contenido al espacio perivitelino) = RC (enzimas líticos)

Degradación proteínas ZP que reconocen proteínas del espermatozoide

Entrada del espermatozoide

estimula:

2ª división meiótica (3 corpúsculos

polares + 1 óvulo)

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 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

5. Procesos tempranos y tardíos
El ovocito II está programado para el inicio del desarrollo pero se encuentra BLOQUEADO

Contacto con el espermatozoide desbloquea el programa

Procesos tempranos

Engloba: hasta el momento en que se produce el aumento de Ca2+ y pH del ovocito II

Son cambios iónicos (no fenómenos biosintéticos)

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 TEMA 4. Fecundación

3.2. Activación del ovocito

5. Procesos tempranos y tardíos Procesos tardíos

1) Restauración del ciclo celular mitóYco

2) Bloqueo lento de la polispermia
3) EsYmulación síntesis de proteínas y replicación del DNA

Fenómenos biosintéticos
Síntesis de proteínas y de ADN (inicia la embriogénesis temprana) 35
 TEMA 4. Fecundación

4. Sincronización, anfimixis y activación del cigoto

Sincronización (formación de los pronúcleos)

Los núcleos del espermatozoide y del ovocito II se encuentran en diferente estado

Después de la fecundación:

1) El núcleo del espermatozoide

Ø Envoltura nuclear se desensambla (fosforilación)
Ø Material nuclear entra en contacto con el
citoplasma del ovocito

ADN se descondensa y las protaminas son reemplazadas

por las histonas almacenadas en el ovocito

La envoltura nuclear se reconsYtuye rápidamente

(PRONUCLEO MASCULINO)

PRONUCLEO FEMENINO: núcleo del ovocito acaba la

meiosis

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 TEMA 4. Fecundación

4. Sincronización, anfimixis y activación del cigoto

Sincronización (formación de los pronúcleos)
Después de la fecundación:

2) Desmetilación del ADN en:

PRONUCLEO PATERNAL (intensa y brusca desmetilación durante la descondensación)

PRONUCLEO MATERNAL (desmetilado lentamente durante el proceso de duplicación)

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 TEMA 4. Fecundación

4. Sincronización, anfimixis y activación del cigoto

Sincronización (formación de los pronúcleos)
Después de la fecundación:

3) Ovocito es ahora una célula binucleada (Estado

pronuclear o precigótico)

Número normal de cromosomas de la especie (2n, 1c)

4) Ciclo de división celular normal

Horas después de la unión de los gametos, se inicia la
síntesis de ADN en ambos pronúcleos

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 TEMA 4. Fecundación

4. Sincronización, anfimixis y activación del cigoto

Anfimixis y acYvación del cigoto
Después de la fecundación:
4) Ciclo de división celular normal
A) Replicación del ADN (duplicación de las cromátidas 2c)
B) Los dos pronúcleos se acercan, fusionan las membranas
(SINGAMIA)
C) Desaparecen las envolturas nucleares
D) Las cromátidas se individualizan
E) El centriolo espermático se divide en dos (formación huso
mitótico)
F) Los cromosomas homólogos de los pronúcleos se
recombinan (ANFIMIXIS)
G) Los cromosomas se organizan en el centro del huso mitótico
(METAFASE)
TELOFASE:
Cada cromosoma se divide en sus dos cromátidas
Cada cromátida se va a dirigir a uno de los polos (se forman dos
conjuntos diploides, 46 cromosomas)
Originan la segmentación (dos primeras células hijas,
BLASTÓMEROS)
Activación del cigoto: restauración de la mitosis tras la anfimixis 39
 TEMA 4. Fecundación

5. Primeras etapas del desarrollo

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