COPROCULTIVO
IDENTIFICACION DE BACILOS GRAM
NEGATIVOS. ENTEROBACTERIAS
LAQB ROSA ISELA CHAVEZ GOMEZ
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Las salmonellas son bacilos Gram. negativos que no fermentan la lactosa, pero
producen H2S característica que se usa para su identificación.
Las Salmonellas son causantes de enterocolitis, fiebre entérica (fiebre tifoidea) y
septicemia.
De acuerdo a la clasificación de Kaufman y White el genero se divide en tres
especies:
• Salmonella typhi (un serótipo)
• Salmonella choleresuis (un serótipo)
• Salmonella enteritidis (1500 serótipos)
• Salmonella spp.
• Grupos serológicos (A, B, C1, C2, D, E, Vi)
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• Medios de enriquecimiento
-Caldo selenito
-Caldo tetrationato
selenito
Tetrationato
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Medios
• Medios para aislamiento
-Agar eosina y azul de metileno (EMB)
EMB
-Agar de Salmonella y Shigella (S.S)
-Agar Mac Conkey
-Agar verde brillante (VBA)
Agar Bismuto Sulfito
Verde
Brillante
S.S. McConkey Agar Bismuto Sulfito
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Medios para identificación (pruebas
bioquímicas)
-Kligler o TSI
-Caldo urea
-Descarboxilación de la lisina (LIA) LIA
-Citrato de Simmons
- MIO
Kligler
Caldo Citrato de
urea Simmons
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• Identificación serológica
• Antisueros para identificar Escheriachia
coli (polivalente I, II, III)
• Antisueros para identificar Salmonella del
subgrupo I
• Antisuero para identificar Shigellas (A, B,
C y D)
• Antisuero para identificar Vibrio cholerae
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CALDO TETRATIONATO
• El tetrationato formado por la adición de yodo-
yodurado junto con el tiosulfato excedente inhiben a
coliformes. Las bacterias reductoras de tetrationato
como Salmonella y Proteus pueden multiplicarse con
más facilidad. Las sales biliares inhiben el desarrollo de
microorganismos Gram positivos.
CONTROL DE ACTIVIDAD RESULTADO
MICROORGANISMO CRECIMIENTO EN
SUBCULTIVOS
A las 24 horas
A las 6 horas
Escherichia coli Algunas colonias inhibido
Salmonella typhimurium moderado Bueno
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AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO
• El agar Eosina y azul de metileno es un medio utilizado para
aislamiento y diferenciación de bacilos entéricos Gram negativos.
• Diferencia colonias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa
• Permite diferenciar al grupo Salmonella y otros organismos lactosa
negativos de organismos coliformes
CONTROL DE ACTIVIDAD RESULTADO
MICROORGANISMO
Escherichia coli Colonias azul a moradas,
con brillo metálico azul
verdoso
Enterococcus faecalis Inhibición parcial
Salmonella typhimurium Colonias incoloras,
transparentes
Shigella flexneri Colonias incoloras,
transparentes
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Siembra en Agar Mac Conkey
Siembra en agar EMB Lactosa +
Lactosa -
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AGAR SALMONELLA Y SHIGELLA
• Las bacterias Gram positivas, algunas especies de
Proteus y bacilos coliformes son inhibidos por las sales
biliares, citrato de sodio y verde brillante. La
diferenciación de los microorganismos se logra por la
lactosa.
CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO RESULTADO
Escherichia coli Colonias rosa intenso con halo
de precipitación
Salmonella typhimurium Colonias medianas, incoloras
transparentes con centro
negro
Shigella flexneri Colonias pequeñas, incoloras
transparentes
Salmonella typhi Colonias pequeñas, incoloras
transparentes con o sin centro
negro
Staphylococcus aureus Crecimiento inhibido
Enterococcus faecalis Crecimiento inhibido o
colonias puntiformes, rosa
opacas
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Siembra en Agar Salmonella-Shigella
Lactosa –
H2S - Lactosa –
H2S +
Lactosa –
Lactosa -
H2S +
H2S -
Siembra en Agar Bismuto Sulfito
Bismuto + Lactosa +
H2S -
Bismuto -
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AGAR VERDE BRILLANTE
• La selectividad de este medio, se basa en la
concentración del verde brillante, que inhibe bacterias
Gram positivas y la mayoría de los bacilos Gram
negativos, permitiendo el empleo de inóculos
moderadamente abundantes
• La lactosa y la sacarosa permiten diferenciar la flora
acompañante lactosa positiva y lactosa negativa-
sacarosa positiva
CONTROL DE ACTIVIDAD RESULTADO
MICROORGANISMO
Escherichia coli Crecimiento colonias verdes
Salmonella typhimurium Buen crecimiento, colonias
rosa pálido con halo rojo
brillante
Salmonella enteritidis Buen crecimiento, colonias
rosa pálido con halo brillante
Proteus vulgaris Crecimiento inhibido
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Identificación de Enterobacterias
Lactosa –
H2S +
Lactosa –
Lactosa + H2S -
H2S -
Lactosa –
H2S -
Placa con crecimiento de Enterobacterias Lactosa –
H2S +
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