Fabricante: - Evite tocar con los dedos la nitrocelulosa.

O.K.N.V.I. RESIST-5 Coris BioConcept - Use guantes al manipular las muestras.

Science Park CREALYS - No utilice nunca los reactivos de otro kit.
Rue Jean Sonet 4A - Las líneas verdes indican los lugares de adsorción de los inmunorreactivos. El color
B – 5032 GEMBLOUX verde desaparece durante la prueba.
BÉLGICA - La calidad de los reactivos no se puede garantizar pasada la fecha de caducidad o si
Tel.: +32(0)81.719.917 los reactivos no se conservan en las condiciones requeridas, como se indica en el
Fax: +32(0)81.719.919 prospecto.
[email protected] V. ELIMINACIÓN DE RESIDUOS
www.corisbio.com - Deseche los guantes, hisopos, tubos de ensayo y dispositivos utilizados de acuerdo con
IFU-58R11/ES/01 Producido en BÉLGICA las BPL.
- Cada usuario es responsable de la gestión de los residuos producidos y debe
Prueba rápida de diagnóstico in vitro para la detección de asegurarse de que se eliminan de acuerdo con la legislación vigente.
carbapenemasas OXA-48, KPC, NDM, VIM e IMP en cultivos bacterianos VI. CONSERVACIÓN
- Una bolsa sin abrir se puede mantener entre 4 y 30 °C y usar hasta la fecha de
PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO ES caducidad indicada en el envase. Una vez abierta la bolsa, realice la prueba
SOLO PARA USO PROFESIONAL inmediatamente.
Referencias: K-15R11, 2 x 20 cartuchos, tampón, 20 tubos y cuentagotas - Evite congelar los cartuchos y el tampón.
VII. MANIPULACIÓN Y RECOGIDA DE MUESTRAS
I. INTRODUCCIÓN Las muestras que se van a analizar deben obtenerse y manipularse siguiendo
Los microorganismos productores de carbapenemasas (MPC) y, más específicamente, procedimientos microbiológicos habituales.
las enterobacterias resistentes a carbapenémicos (ERC) representan un importante Asegúrese de que las muestras no se tratan con soluciones que contengan formaldehído
riesgo sanitario en todo el mundo, debido al amplio espectro de resistencia a antibióticos o sus derivados.
que incluye, además de los carbapenémicos, a la mayoría de tipos de agentes Los medios de cultivo analizados y validados con los kits Coris BioConcept RESIT se
antimicrobianos, lo que deja muy pocas opciones para el tratamiento de los pacientes indican en el sitio web: https://www.corisbio.com/Products/Human-Field/OKNVI-RESIST-
infectados. Además de las ERC, los MPC también incluyen bacilos gramnegativos no 5.php
fermentadores (BGNNF) como Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumannii que
muestran resistencia no solo a los betalactámicos y otros grupos de antibióticos, sino
VIII. PROCEDIMIENTO
también a los carbapenémicos. La rápida expansión de los MPC y de los genes que PREPARACIÓN DE LA PRUEBA:
codifican estas resistencias ha provocado brotes nosocomiales y situaciones endémicas Sin abrir la bolsa, deje que los componentes del kit y las muestras (si la placa que
en varios países de Europa y otros lugares del mundo. contiene la colonia que va a analizar se hubiera mantenido a 4 ºC) alcancen la
Los expertos internacionales y las autoridades sanitarias consideran que el desarrollo de temperatura ambiente (15-30 °C) antes de realizar la prueba.
nuevas pruebas rápidas de diagnóstico para realizar el seguimiento de patrones de Abra la bolsa y extraiga el dispositivo. Una vez abierto, realice la prueba inmediatamente.
resistencia antimicrobiana es una de las prioridades de actuación fundamentales. La Anote el nombre y los apellidos del paciente o el número de la muestra en el dispositivo
NDM y la KPC son dos de las carbapenemasas de mayor y más creciente prevalencia (un dispositivo por muestra).
en muchos países. Por otro lado, las carbapenemasas del tipo D OXA-48 son los PROCEDIMIENTO DE PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS:
mecanismos de resistencia con mayor dificultad de detección en los laboratorios clínicos. No se han establecido resultados de rendimiento respecto a otros tipos de muestras que
Las carbapenemasas VIM no solo están presentes en las enterobacterias, sino que no sean colonias bacterianas. Para un rendimiento óptimo de la prueba recomendamos
también son muy prevalentes en las bacterias no fermentadoras. el uso de colonias de bacterias frescas.
La IMP de clase B es una carbapenemasa mediada por plásmidos que debe considerarse 1. Prepare un tubo semirrígido y añada 12 gotas de tampón LY-A en el tubo.
un problema potencialmente grave, ya que no solo degrada las C3G, sino también 2. Obtenga las bacterias recogiendo una colonia con un asa bacteriológica
antibióticos carbapenémicos como imipenen. Existen pruebas fenotípicas basadas en desechable y sumérjala hasta el fondo del tubo de ensayo semirrígido que
inhibidores para confirmar la presencia de carbapenemasas de clase A (KPC) y de clase contiene el tampón.
B (VIM, IMP, NDM). Actualmente, la confirmación definitiva de mecanismos de 3. Remueva bien antes de retirar el asa.
resistencia en las ERC se basa en ensayos moleculares. Estas pruebas son caras y solo 4. Inserte firmemente el cuentagotas en el tubo semirrígido.
pueden realizarlas técnicos cualificados en un entorno especializado, lo cual dificulta un 5. Agite el preparado para homogeneizarlo. Toda la colonia bacteriana debe quedar
uso más generalizado. suspendida en el tampón.
La prueba O.K.N.V.I. RESIST-5 forma parte de la gama Coris BioConcept RESIST de 6. Invierta el tubo de ensayo y añada lentamente 3 gotas de la muestra diluida en el
pruebas diagnósticas de resistencia antimicrobiana. pocillo para muestras de cada uno de los dos cartuchos,marcados como (1) NDM,
KPC y OXA-48 y (2) IMP y VIM. Otra posibilidad es añadir con una micropipeta
II. PRINCIPIO DE LAS PRUEBAS 100 µl de la muestra diluida a cada pocillo para muestras del cartucho.
Estas pruebas están listas para usar y se basan en una tecnología de membranas con 7. Deje que reaccione durante un máximo de 15 min y lea el resultado.
nanopartículas de oro coloidal. Nuestro kit se ha desarrollado para la detección de
carbapenemasas a partir del aislado de una sola colonia bacteriana de
Enterobacteriaceae o BGNNF cultivadas en placa de agar. Cada bolsa contiene: 2 Tampón
Agite el preparado para
cartuchos de flujo lateral para la identificación de (1) OXA-48, KPC, NDM y (2) VIM e homogeneizarlo
IMP. 12 gotas Muestra
Identificación de OXA-48, KPC y NDM. Se sensibiliza una membrana de nitrocelulosa
con:
(1) un anticuerpo monoclonal dirigido contra las carbapenemasas OXA-48 y variantes
(excepto las carbapenemasas de tipo OXA-163) (línea “O”) 15 minutos
(2) un anticuerpo monoclonal dirigido contra las carbapenemasas KPC (línea “K”)
(3) un anticuerpo monoclonal dirigido contra las carbapenemasas NDM (línea “N”)
(4) un reactivo de captura de control (línea superior “C”).
Se secan en una membrana cuatro conjugados distintos de nanopartículas de oro
coloidal: un conjugado dirigido contra un segundo epítopo de la carbapenemasa OXA-
48, un conjugado dirigido contra un segundo epítopo de la carbapenemasa KPC, un
conjugado específico para la carbapenemasa NDM y un conjugado de control para
validar las condiciones de la prueba.
Identificación de VIM y IMP Se sensibiliza una membrana de nitrocelulosa con:
(1) un anticuerpo monoclonal dirigido contra las carbapenemasas VIM (línea “V”) Los resultados positivos se pueden comunicar en el momento en que resulten visibles
(2) un anticuerpo monoclonal dirigido contra las carbapenemasas IMP (línea “I”) las líneas de prueba y de control.
(3) un reactivo de captura de control (línea superior “C”). No tenga en cuenta la aparición de nuevas líneas una vez sobrepasado el tiempo
Se secan en una membrana tres conjugados distintos de nanopartículas de oro coloidal: de reacción.
un conjugado dirigido contra las carbapenemasas VIM, un conjugado dirigido contra las El resultado se debe leer en la tira todavía húmeda.
carbapenemasas IMP y un conjugado de control.
Cuando el tampón suministrado que contiene las bacterias resuspendidas entra en IX. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
contacto con la tira, los conjugados solubilizados migran con la muestra por difusión Los resultados se deben interpretar del modo siguiente en cada uno de los dos cartuchos:
pasiva, mientras los conjugados y el material de la muestra entran en contacto con los Resultado negativo de la prueba: aparece una línea rojo-púrpura en la ventana central
respectivos anticuerpos inmovilizados adsorbidos en la tira de nitrocelulosa. Si la muestra de lectura, en la posición de la línea de control (C). No aparece ninguna otra línea.
contiene alguna de las carbapenemasas (OXA-48, KPC, NDM, VIM o IMP), los Resultado positivo de la prueba: además de la línea rojo-púrpura en la posición de la
respectivos complejos formados por los conjugados y las carbapenemasas (OXA-48 o línea de control (C), se hace visible una línea rojo-púrpura en la posición de alguna de
KPC o NDM o VIM o IMP) quedarán unidos a las líneas correspondientes (OXA-48: línea las líneas de prueba (“N”, “K” u “O”) del cartucho marcado como (1) NDM, KPC y OXA-
“O”, KPC: línea “K”, NDM: línea “N”, VIM: línea “V”, IMP: línea "I"). La migración continúa 48, o en la posición de alguna de las líneas de prueba (“I” o “V”) del cartucho marcado
por difusión pasiva y tanto los conjugados como el material de la muestra entran en como (2) IMP y VIM. La intensidad de la línea de prueba puede variar en función de la
contacto con el reactivo de control de la línea (superior) que se une al conjugado de cantidad de antígenos y del tipo de variante presente en la muestra. Cualquier línea de
control (línea “C”), con lo que se produce una línea roja. prueba de color rojo-púrpura (OXA-48, KPC, NDM, VIM y IMP), aunque sea débil, se
El resultado es visible a los 15 minutos, en forma de líneas rojas en la tira. considerará resultado positivo.
III. REACTIVOS Y MATERIALES Si aparece una línea de prueba positiva al lado de la marca “O”, la muestra contiene
1. O.K.N.V.I. RESIST-5 (2 x 20 cartuchos) variantes OXA-48 o de tipo OXA-48. Si aparece al lado de la marca “K”, la muestra
20 bolsas selladas que contienen dos cartuchos de flujo lateral y un desecante. contiene variantes KPC; si aparece al lado de la marca “N”, contiene NDM; si aparece al
Cada cartucho contiene una tira sensible. lado de la marca “V”, contiene VIM y si aparece al lado de la marca “I”, contiene IMP.
2. Tampón LY-A (15 ml) Pueden producirse combinaciones de líneas de prueba positivas.
Solución salina tamponada a pH 7,5 que contiene TRIS, NaN3 (<0,1 %) y un detergente. En tal caso, la muestra contiene una combinación de varias carbapenemasas.
3. Instrucciones de uso (1) Resultado no válido de la prueba: La ausencia de la línea de control indica un fallo en
4. Tubos desechables semirrígidos con gotero para recogida de muestras (20) el procedimiento de la prueba. Repita las pruebas no válidas con un nuevo dispositivo de
IV. PRECAUCIONES ESPECIALES prueba.
Nota: durante el proceso de secado, puede aparecer una sombra muy tenue en las
- Todas las operaciones relacionadas con el uso de la prueba deben realizarse de
posiciones de las líneas de prueba. No debe considerarse un resultado positivo.
acuerdo con las buenas prácticas de laboratorio (BPL).
- Todos los reactivos son solo para uso diagnóstico in vitro.
- La bolsa debe abrirse con cuidado.
 Cartucho 1: OXA-48, KPC y NDM
Sensibilidad: 90 % (75,4 a 96,7 %)
Especificidad: 100 % (96,3 a 100 %)
Valor predictivo positivo: 100 % (88,0 a 100 %)
Valor predictivo negativo: 96,9 % (91,7 a 99,0 %)
Concordancia: 97,6 % (160/164)
Método molecular
Positiva Negativa Total
Prueba de IMP
Positiva 16 0 16
Negativa 3 145 148
Total 19 145 164
Intervalo de confianza 95 %1
Sensibilidad: 84,2 % (59,5 a 95,8 %)
Especificidad: 100 % (96,8 a 100 %)
Valor predictivo positivo: 100 % (75,9 a 100 %)
Valor predictivo negativo: 98,0 % (93,7 a 99,5 %)
Concordancia: 98 % (161/164)

Positiva C. Repetibilidad y reproducibilidad

Negativa No válida
Para verificar la precisión dentro de un mismo lote (repetibilidad), se procesaron 15 veces
Cartucho 2: VIM e IMP las mismas muestras positivas y una solución de tampón de kits del mismo lote y en las
mismas condiciones experimentales. Todos los resultados observados se confirmaron
según lo previsto.
Para verificar la precisión entre los lotes (reproducibilidad), se procesaron algunas
muestras (positivas y solución de tampón) en kits de tres lotes de producción diferentes.
Todos los resultados se confirmaron según lo previsto.
XI. LÍMITES DEL KIT
Esta es una prueba cualitativa y no puede predecir la cantidad de antígenos presentes
en la muestra. Debe tenerse en cuenta la presentación clínica y los resultados de otras
pruebas para establecer un diagnóstico. Un resultado positivo de la prueba no descarta
la posibilidad de que puedan estar presentes otros mecanismos de resistencia a los
antibióticos.
XII. PROBLEMAS TÉCNICOS/RECLAMACIONES
Si surge un problema técnico o si el rendimiento no corresponde con el indicado en el
prospecto de este envase:
1. Registre el número de lote del kit correspondiente.
2. Si es posible, conserve la muestra en las adecuadas condiciones de conservación
Positiva Negativa No válida mientras dure la gestión de la reclamación.
X. RENDIMIENTO 3. Póngase en contacto con Coris BioConcept ([email protected]) o con su
distribuidor local.
A. Límite de detección
El límite de detección determinado mediante proteínas recombinantes purificadas de XIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
A. J. Wesley MacDonald and V. Chibabhai Evaluation of the RESIST-4 O.K.N.V
OXA-48, KPC, NDM, VIM e IMP es de 0,125 ng/ml, 0,625 ng/ml, 0,25 ng/ml, 0,23 ng/ml immunochromatographic lateral flow assay for the rapid detection of OXA-48, KPC, NDM and VIM
y 1,56 ng/ml, respectivamente. carbapenemases from cultured isolates Access Microbiology 2019;1
B. Estudio retrospectivo B. T. Pilate, S. Desmet Detection of carbapenemase production in pseudomonas aeruginosa in a tertiary care
Los cartuchos de la prueba se validaron por comparación con el método molecular de centre Annual Meeting of the Royal Belgian Society of Laboratory Medicine November 15th, 2019 Belgium
C. Oueslati S, Iorga BI, Tlili L, Exilie C, Zavala A, Dortet L, Jousset AB, Bernabeu S, Bonnin RA, Naas
referencia (PCR múltiple incluida secuenciación, validada internamente) en el Laboratorio T. Unravelling ceftazidime/avibactam resistance of KPC-28, a KPC-2 variant lacking carbapenemase
Nacional de Referencia para Bacilos Gramnegativos Multirresistentes (Bélgica), activity. J Antimicrob Chemother. 2019 Aug 1;74(8):2239-2246
mediante un estudio retrospectivo realizado en 164 aislados clínicos de posibles D. Brolund A, Lagerqvist N, Byfors S, Struelens MJ, Monnet DL, Albiger B, Kohlenberg A. Worsening
epidemiological situation of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae in Europe, assessment by
enterobacterias productoras de carbapenémicos, no duplicados y consecutivos, national experts from 37 countries, July 2018. Euro Surveill. 2019 Feb; 24 (9) 1560-7917
obtenidos entre 2013 y 2018 en 78 hospitales belgas. E. Oliveira J, Reygaert WC. Gram Negative Bacteria. StatPearls Publishing; 2019 Jan-2019
F. Baeza LL, Pfennigwerth N, Greissl C, Göttig S, Saleh A, Stelzer Y, Gatermann SG, Hamprecht A.
Método molecular Comparison of five methods for detection of carbapenemases in Enterobacterales with proposal of a new
Positiva Negativa Total algorithm. Clin Microbiol Infect. 2019 Mar 18. pii: S1198-743X(19)30104-1
Prueba de OXA-48 G. Rösner S, Kamalanabhaiah S, Küsters U, Kolbert M, Pfennigwerth N, Mack D. Evaluation of a novel
immunochromatographic lateral flow assay for rapid detection of OXA-48, NDM, KPC and VIM
Positiva 40 0 40 carbapenemases in multidrug-resistant Enterobacteriaceae. J Med Microbiol. 2019 Mar;68(3):379-381.
Negativa 0 124 124 H. Glupczynski Y, Evrard S, Huang TD, Bogaerts P. Evaluation of the RESIST-4 K-SeT assay, a multiplex
Total 40 124 164 immunochromatographic assay for the rapid detection of OXA-48-like, KPC, VIM and NDM
carbapenemases. J Antimicrob Chemother. 2019 Feb 6. doi: 10.1093
Intervalo de confianza 95 %1 I. Cointe A, Bonacorsi S, Truong J, Hobson C, Doit C, Monjault A, Bidet P, Birgy A Detection of
Sensibilidad: 100 % (89,1 a 100 %) Carbapenemase-Producing Enterobacteriaceae in Positive Blood Culture Using an
Especificidad: 100 % (96,3 a 100 %) Immunochromatographic RESIST-4 O.K.N.V. Assay. Antimicrob Agents Chemother. 2018 Nov
26;62(12). pii: e01828-18
Valor predictivo positivo: 100 % (89,1 a 100 %) J. Köck R, Daniels-Haardt I, Becker K, Mellmann A, Friedrich AW, Mevius D, Schwarz S, Jurke A.
Valor predictivo negativo: 100 % (96,3 a 100 %) Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae in wildlife, food-producing, and companion animals: a systematic
Concordancia: 100 % (164/164) review. Clin Microbiol Infect. 2018 Dec;24(12):1241-1250
K. Greissl C, Saleh A and Hamprecht A. Rapid detection of OXA-48-like, KPC, NDM, and VIM
carbapenemases in Enterobacterales by a new multiplex immunochromatographic test. Eur J Clin
Método molecular Microbiol Infect Dis. 2018 Nov 17. doi: 10.1007/s10096-018-3432-2
Positiva Negativa Total L. Kolenda C, Benoit R, Carricajo A, Bonnet R, Dauwalder O, Laurent F. Evaluation of the New Multiplex
Prueba de KPC Immunochromatographic O.K.N.V. K-SeT Assay for Rapid Detection of OXA-48-like, KPC, NDM, and VIM
Positiva 25 0 25 Carbapenemases. J Clin Microbiol. 2018 Oct 25;56(11).: e01247-18.
Negativa 0 139 139 M. K.Villageois-Tran, A.A. Mariaggi, A. Godmer, M. Lambot, T. Leclitpeux, G. Arlet, Y. Benzerara and S.
Gallah. P2333 - A new method for detection of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae carriage.
Total 25 139 164 28th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases, Infectious Diseases April
Intervalo de confianza 95 %1 21 – 24, 2018.
Sensibilidad: 100 % (83,4 a 100 %) N. Y. Glupczynski, T.D. Huang, S. Evrard and P. Bogaerts. P2328 – Evaluation of the NV K-SeT, a new
lateral flow assay for the detection of VIM and NDM producing bacteria. 28th European Congress of
Especificidad: 100 % (96,6 a 100 %) Clinical Microbiology and Infectious Diseases, Infectious Diseases April 21 – 24, 2018.
Valor predictivo positivo: 100 % (83,4 a 100 %) O. P. Bogaerts, S. Evrard, L. Denorme, Q. Gilleman, P. Mertens, T.-D. Huang,1 and Y. Glupczynski.
Valor predictivo negativo: 100 % (96,6 a 100 %) Evaluation of a new lateral flow assay for the detection of VIM-producing bacteria. 37e Réunion
Concordancia: 100 % (164/164) interdisciplinaire de chimiothérapie anti-infectieuse 18-19 décembre, 2017 Paris
P. C.Mathlouthi N, Al-Bayssari C, Bakour S, Rolain JM, Chouchani C. Prevalence and emergence of
carbapenemases-producing Gram-negative bacteria in Mediterranean basin. Crit Rev Microbiol. 2017
Método molecular Feb; 43(1):43-61
Positiva Negativa Total
Prueba de NDM
Positiva 31 0 31
Negativa 3 130 133 Última actualización: 21 de SEPTIEMBRE de 2020
Total 34 130 164 Número de catálogo Fabricante
Intervalo de confianza 95 %1
Sensibilidad: 91,2 % (75,2 a 97,7 %) Dispositivo médico para Límites de
Especificidad: 100 % (96,4 a 100 %) diagnóstico in vitro temperatura
Valor predictivo positivo: 100 % (86,3 a 100 %) Contenido suficiente para
Código de lote
Valor predictivo negativo: 97,7 % (93,0 a 99,4 %) <n> pruebas
Concordancia: 98,2 % (161/164) Consulte las instrucciones
No reutilizar
de uso
Método molecular
Positiva Negativa Total Mantener en lugar seco
Fecha de
Prueba de VIM caducidad
Positiva 36 0 36
CONT Contiene azida
Negativa 4 124 128 DIL SPE Muestra de diluyente
NaN3 sódica
Total 40 124 164
Intervalo de confianza 95 %1

1
Newcombe, Robert G. "Two-Sided Confidence Intervals for the Single Proportion: Comparison of
Seven Methods," Statistics in Medicine, 17, 857-872 (1998).