UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO
RUIZ GALLO
FACULTAD DE INGENIERÍA
QUÍMICA E INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS
Escuela Profesional de Ingeniería
Química
Microbiología Industrial
PRÁCTICA DE LABORATORIO N°8
“Siembra de levaduras del género Saccharomyces
mediante diluciones seriadas en caldo Sabouraud”
PRESENTADO POR:
Limo Burga Luis Brayan Autor
REVISADO POR:
Dr. Díaz zapata Alberto ASESOR
LAMBAYEQUE – PERÚ
2025
1. INTRODUCCIÓN
El cultivo de microorganismos mediante siembras en medios líquidos o sólidos permite
su propagación y observación para estudios microbiológicos. Las levaduras, como
Saccharomyces cerevisiae, son hongos unicelulares que se emplean ampliamente en
procesos biotecnológicos y fermentativos. La técnica de diluciones seriadas permite
disminuir la concentración celular inicial, facilitando el análisis y control del
crecimiento microbiano. Esta práctica tiene como finalidad realizar una siembra de
Saccharomyces en medio líquido (caldo Sabouraud) tras aplicar diluciones seriadas,
favoreciendo la cuantificación y observación de su desarrollo en condiciones
controladas.
2. OBJETIVOS
General:
● Realizar la siembra de levaduras del género Saccharomyces mediante
diluciones seriadas en medio líquido, utilizando caldo Sabouraud como medio
de cultivo.
Específicos:
● Preparar una solución madre de levadura y diluirla seriadamente.
● Inocular diferentes diluciones en tubos con caldo Sabouraud.
● Incubar las muestras y observar el desarrollo microbiano.
3. MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales Cantidad
Levadura seca activa (Saccharomyces) 10 g
Agua destilada 100 mL
Tubos de ensayo 7 unidades
Pipetas automáticas y puntas 2
Gradilla 1
Caldo Sabouraud líquido 4 tubos
Mechero Bunsen 1
Incubadora (30 °C aprox.) 1
4. PROCEDIMIENTO
Preparación de la solución madre:
● Se disuelven 10 gramos de levadura Saccharomyces en 90 mL de agua
destilada estéril. Esta es la solución madre.
Preparación de diluciones seriadas:
● Se toma 1 mL de la solución madre y se transfiere a un tubo de ensayo con 9
mL de agua destilada estéril → Tubo I (10⁻¹).
● Se toma 1 mL del Tubo I y se transfiere a otro tubo con 9 mL de agua destilada
estéril → Tubo II (10⁻²).
● Se toma 1 mL del Tubo II y se transfiere a un tercer tubo con 9 mL de agua
destilada estéril → Tubo III (10⁻³).
● Siembra en medio de cultivo:
● Se inocula 1 mL de la solución madre directamente en un tubo con caldo
Sabouraud → Tubo SM (solución madre).
● Se inocula 1 mL de cada uno de los tubos I, II y III en tubos individuales con
caldo Sabouraud → Tubo I, Tubo II, Tubo III.
Incubación
● Se etiquetan todos los tubos y se colocan en una incubadora a 30 °C por 48
horas.
Siembra en placa para conteo de UFC
● Se siembra 0.1 mL (100 µL) del Tubo IV en una placa Petri con agar Sabouraud
utilizando técnica de extensión superficial.
● La placa se incuba a 30 °C por 48 horas para el desarrollo de colonias.
5. RESULTADOS ESPERADOS
Turbidez observada:
● Tubo 10⁻¹ (I): Sí presenta turbidez.
● Tubo 10⁻² (II): No se observó turbidez significativa.
● Tubo 10⁻³ (III): No se observó turbidez significativa.
Tubo 10⁻⁴ (IV): Sí presenta turbidez tras incubación.
Conteo de colonias en placa:
● Se observó un total de 40 colonias en la placa sembrada con 0.1 mL del Tubo
10⁻⁴.
Cálculo de UFC/mL
6. CONCLUSIONES
● Se confirmó el crecimiento de levaduras en los tubos con mayor carga
microbiana (10⁻¹ y 10⁻⁴), evidenciado por la turbidez observada.
● La técnica de diluciones seriadas fue efectiva para obtener una concentración
adecuada para el conteo de UFC.
● El valor de 4 × 10⁶ UFC/mL indica una alta carga microbiana en la solución
madre inicial.
● Este procedimiento permite una cuantificación precisa y es fundamental para
aplicaciones en microbiología industrial, control de calidad y procesos
fermentativos.
ANEXOS
