Pruebas Transfuncionales

DR. A. BARBARÁN
PATÓLOGO CLÍNICO
HOSPITAL
“ARZOBISPO LOAYZA
”
 Antecedentes
 1875: Landois – Glóbulos rojos de una especie mezclados con suero
sanguíneo de otra especie: Aglutinación o hemólisis.

 1900: Erlich y Morgenroth – Idem anterior pero entre animales de la misma

especie.

 1900: Landsteiner – Idem anterior pero en personas: Descubrimiento del

sistema ABO.

 1908: Ottenberg y Epstein – Teoría de la herencia del sistema ABO.

 1910: Von Dungern y Hirszfield – Herencia del sistema ABO de acuerdo a las leyes
de Mendel.

 1927: Landsteiner y Wiener – Descubrimiento de los sistemas MN y P.

 1939: Levine y Stetson / Landsteiner y Wiener – Descubrimiento del sistema

Rh (eritroblastosis fetal).
 Definición
 Los grupos sanguíneos son aloantígenos que se heredan

bajo control genético siguiendo las leyes de la herencia

establecidas por Mendel.

 Membrana del Hematíe

7% Carbohidratos

50% Proteínas 43% Lípidos

 Membrana del Hematíe
Proteína
Periférica Actina Ankirina Espectrina

Proteína Integral
 Medicina Transfusional

 Incompatibilidad entre receptor de una transfusión de sangre y GR del

donante puede ser causa de una reacción hemolítica intra o

extravascular.

 Incompatibilidad entre madre sensibilizada y GR de su hijo pueden ser

responsables de la enfermedad hemolítica del feto y RN.

 Casi todos los anticuerpos de importancia clínica son de la clase Ig G

(Rhesus, Kell, Duffy, Kidd y Ss).

 Reacciones hemolíticas tardías: Sintomatología moderada.

 Reacciones por anticuerpos Ig M (fríos) son muy raras.

 Sistema ABO
 Antígenos:

 Glucolípidos.

 Presente en otras células del organismo y en líquidos corporales

(glucoproteínas).

 Presencia depende de la herencia de genes alélicos.

 Sustancias precursoras:

 Tipo I: Galactosa terminal unida a N - acetilglucosamina por unión 1 - 3.

 Tipo II: Galactosa terminal unida a N - acetilglucosamina por unión 1 - 4.

 Antígenos de GR provienen de cadenas de tipo II.

 Antígenos del plasma provienen de cadenas de tipo I y II.

 Sistema ABO
 Anticuerpos:

– Ig M e Ig G.

– Sustancia precursora H presente en la estructura orgánica de muchos individuos

(Anticuerpo anti – H es bastante raro).

– Fenotipo Bombay (Oh) forman anti – H (personas A1 y A1B con una menor

frecuencia).

– Síntesis a partir de los 3 – 6 meses de edad, alcanzando títulos más altos entre

los 5 – 10 años.

– Inmunización secundaria a:

– Embarazo ABO incompatible.

– Transfusión glóbulos rojos.

 Anti A, Anti B, Anti AB

Clínicamente significativo Clase de Anticuerpo

SI Ig M, Ig G.
Rango Térmico EHRN
Ig M: 20ºC SI (Ig G)
Ig G: 37ºC

Reacciones Transfusionales
H. Extravascular H. Intravascular
SI SI
 Sistema Rh
 Antígenos:

 Más de 40 distintos.

 Los más importantes: D, C, c, E, e.

 Si el antígeno D no se expresa: Rh Negativo.

 Síntesis bajo control genético

 Variante D: Débilmente expresado.

 Sub unidades del antígeno D: Molécula de gran tamaño integrada por un

número de determinantes antigénicos o sub unidades genéticamente

determinadas (mosaico).
 Sistema Rh

 Anticuerpos:

– Resultado de la inmunización mediante la transfusión o embarazo.

– Excepcionalmente se presentan en forma natural.

– Anti – D el más frecuente encontrado.

– La gran mayoría son Ig G y reaccionan mejor en medios de alta proteína.

– No fijan complemento.

– Efecto de dosis con anti – E, anti – c, y menos frecuente anti – C.

 Anti Rh

Clínicamente significativo Clase de Anticuerpo

SI Ig G.
Rango Térmico EHRN
4ºC – 37ºC SI
Reacciones Transfusionales
H. Extravascular H. Intravascular
SI NO
 Otros Grupos Sanguíneos

 Públicos: Antígenos presentes en casi todas las

personas (de alta incidencia).
 Privados: Antígenos de baja frecuencia en la
población general (de baja incidencia).

El reconocimiento de ellos fue debido al

descubrimiento de anticuerpos producidos
secundariamente a múltiples transfusiones o
embarazos.
 Anti Kell

Clínicamente significativo Clase de Anticuerpo

SI Ig G, Ig M (raro)
Rango Térmico EHRN
4ºC – 37ºC SI
Reacciones Transfusionales
H. Extravascular H. Intravascular
SI RARO
 Anti Lewis

Clínicamente significativo Clase de Anticuerpo

RARAS VECES Ig M
Rango Térmico EHRN
4ºC – 22ºC (común) NO
22ºC – 37ºC (raro)

Reacciones Transfusionales
H. Extravascular H. Intravascular
RARO RARO
 Anti Duffy

Clínicamente significativo Clase de Anticuerpo

SI Ig G
Rango Térmico EHRN
4ºC – 37ºC SI
Reacciones Transfusionales
H. Extravascular H. Intravascular
SI SI
 Anti Kidd

Clínicamente significativo Clase de Anticuerpo

SI Ig G
Rango Térmico EHRN
4ºC – 37ºC SI
Reacciones Transfusionales
H. Extravascular H. Intravascular
SI SI
 Anti Lutheran

Clínicamente significativo Clase de Anticuerpo

SI Ig M, Ig G
Rango Térmico EHRN
4ºC – 37ºC RARO
Reacciones Transfusionales
H. Extravascular H. Intravascular
NO SI
PRUEBA DE
COMPATIBILIDAD
 Antecedentes

Siglo XVII:

• Descubrimiento de la circulación sanguínea (Harvey - 1616).

• Primeras transfusiones: Lower (Inglaterra- 1665) y Denys (Francia - 1667).

Siglo XIX:

• Transfusiones a puérperas con hemorragias: Blundell (Inglaterra - 1818).

Siglo XX:

• Descubrimiento de los grupos sanguíneos: Landsteiner (1900).

• Uso del citrato de sodio como anticoagulante: Hustin (Bélgica - 1914).

• Descubrimiento del factor Rh: Landsteiner y Wiener (1940)

 PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
DEFINICION: Conjunto de procedimientos que
deben llevarse a cabo antes de entregar la
sangre para transfusión.

OBJETIVO: Garantizar, dentro de lo posible,

que la sangre del donante no provoque
ninguna reacción adversa en el paciente y los
GR tengan una sobrevida máxima.
 Etapas del Procedimiento
1) Identificación del paciente, colección de la muestra adecuada y

revisión de los registros del paciente.

2) Determinación del grupo ABO y Rh del paciente y verificación de

los resultados previos.

Si es posible tamizaje de anticuerpos irregulares.

3) Selección de sangre ABO adecuada para la transfusión

4)Realización de la prueba de compatibilidad

5)Reidentificacion y control clínico del Receptor.

 SENSIBILIZACIÓN

Definición: Proceso mediante el cual el anticuerpo se une al antígeno

en la superficie del hematíe.

Factores que influyen:

• Proporción relativa de Antígeno y Anticuerpo.

• pH del medio donde se produce la reacción.

• Temperatura.

• Potencial iónico del medio.

SENSIBILIZACIÓN
 AGLUTINACIÓN
Definición: Indicador de la reacción antígeno – anticuerpo más
comúnmente usado.

Factores que influyen:

• Potencial iónico del medio.

• Presencia de albúmina.

• Tratamiento enzimático de los GR.

• Temperatura.

• Densidad del antígeno.

• Agrupación y movilidad de los antígenos.

• Características del anticuerpo.

AGLUTINACION
Para que la sensibilización produzca

aglutinación visible es preciso que la porción

Fab del anticuerpo pueda unirse a los GR

adyacentes, para lo cual estos deberán estar

suficientemente próximos.
 Test de Coombs

Fijación de Acs Ig M a GR produce aglutinación.

Acs Ig G se fijan a GR pero no produce aglutinación.

Test de Coombs permite detectar la sensibilización de GR por Ig G.

Dos tipos:

Directa: GR del paciente sensibilizados en su propio organismo (in vivo).

Indirecta: GR del paciente sensibilizados in vitro.

 Test de Coombs

Hematíes sensibilizados Aglutinación

Anti – Ig G
 PRUEBA CRUZADA

Receptor Donante

Muestra de Unidad
sangre (sin de
anticoagulante) sangre
Hematíes
del
donante
Suero del
receptor
 Procedimiento
Lavado de G.R. del donante al 5%.
Colocar 3 gotas de suero del paciente.
Agregar una gota de G.R. lavados y mezclar.
Centrifugar a 1000 rpm x 1 minuto para sedimentar los G.R.
Examinar el tubo en busca de hemólisis y/o aglutinación.
Agregar 2 gotas de albúmina bovina al 22% o LISS.
Mezclar e incubar x 15’ a 37ºC.
Examinar el tubo en busca de hemólisis y/o aglutinación.
Lavar los G.R. X 3 a 4 veces.
Agitar el tubo, agregar 2 gotas de AHG y mezclar.
Centrifugar a 1000 rpm x 15 - 20’.
Examinar el tubo en busca de hemólisis y/o aglutinación.
Agregar 1 gota de G.R. recubierta de Ig G de control (Rvo. de Coombs).
 PRUEBA CRUZADA
AGLUTINACION

Anti – Ig G

Anticuerpo
del
suero

NO AGLUTINACION

Anti – Ig G

GR Añadir Añadir
donante suero reactivo
paciente AGH
 Sangre Compatible ABO

Grupo del 1ra. 2da. 3ra.

paciente alternativa alternativa alternativa
O O --- ---

A A PG “O” ---

B B PG “O” ---

AB AB PG “A” o PG “O”
“B”
 Sangre Compatible Rh

Grupo del 1ra 2da

paciente alternativa alternativa
Rh “positivo” Rh “positivo” Rh “negativo”

Rh “negativo” Rh “negativo” Solo en

emergencia