INTRODUCTION

La descente est très indispensable dans notre cursus médical nous permet de
concilier la pratique médicale à la théorie apprise durant le cours. Ce pour cela, nous avons
effectué notre descente de Biologie Clinique u laboratoire de l’ l’hôpital KMC, le Dimanche
11. Septembre.2022 afin d’acquérir le nécessaire pouvant nous être utile dans notre cursus
médical. Sous la direction du PO Dr Victor NDIBUALONJI, qui était accompagnés des
techniciens de labo dont M. Matthieu, Madame Lydia et M. ARON. Ce présent rapport se
divise en 4 points :

 Présentation des matériels ;

 Techniques de laboratoire en hématologie ;
 Techniques de laboratoire en biochimie ;
 Techniques de laboratoire en parasitologie et microbiologie.

I. PRESENTATION DES MATERIELS

 Pipettes en verre ;
 Tube à essai ou éprouvette : utilisé pour la conservation du plasma sanguin ou du sérum
après prélèvement ;
 Bain marie : récipient permettant le chauffage d’une préparation ;
 Les verreries, boites à pétri ;
 Le microscope optique ;
 L’automate hématologique : permet d’effectuer certains examens tel que le GB, formule
leucocytaire, réticulocyte, résultats plaquettaires, les GR dans un timing minime ;
 Le spectrophotomètre : permet le calcul de la longueur d’ondes ;
 Centrifugeuse;
 Seringues ;
 Aiguilles ;
 lancettes ;
 La montre ou chronomètre.
 II. TECHNIQUES DE LABORATOIRE EN HEMATOLOGIE
En particulier nous avions recherche :
 le temps de saignement(TS) :c’est le temps qui s’écoule entre une lésion
vasculaire et l’arrêt du saignement. Par la méthode de Duke nous avions mesure la
dure du saignement provoquer par une incision horizontale à l’aide d’une lancette
dans la zone médiane du lobule de l’oreille. Commencer à compter le temps de
saignement après chaque 30 sec à l’aide d’une montre trotteuse (chronomètre).
Notre patient avait mis 2 min lors de la pratique. C’est qui est normal par rapport
temps normal variant entre 1 et 3 minutes.
 le temps de coagulation (TC) : c’est le temps mesurant la durée pendant laquelle le
sang coagule par la formation de la fibrine. Il est à noter que le temps de
coagulation c’est un examen qui se fait avant toute intervention chirurgicale et
pour le temps de saignement nous utilisons un papier bivalve et ce temps est utilisé
chez un patient en pré opératoire en faisant le bilan. Notre patient avait mis 4 min
lors de la pratique. C’est qui est normal par rapport temps normal variant entre 4
et 8 minutes.
 Le dosage de l’hémoglobine par la méthode de SAHLI , on prélève le sang
capillaire puis mettre dans un tube on ajouter 10µm de l’HCl; ensuite on placer la
tube dans la boite de Sahli on commence aujouter le serum physiologique goutte à
goutte en comparent au deux tubes qui sont déjà dans l’instrument de Sahli.

III. Techniques du laboratoire en biochimie

Aucune réaction biochimique n’est peut se réaliser sans l’appareil

spectrophotomètre, toute fois nous avons besoin des réactifs ; les matériels accessoires pour
réaliser les analyses biochimiques et aussi avoir l’échantillon. Pour que la réaction puisse
arrivée à un résultat il faudrait avoir :

- Le plasma : qui est obtenue après prélèvement sanguine à l’aide d’un seringue, plonger dans
un tube qui contient un anticoagulant qu’on soumet à une centrifugeuse de 2500 à 3500 tours/
min pendant 5 à 10 min et le liquide jaunâtre surnageant c’est le plasma ;

- Le sérum : ici ça se procède de la même façon que l’obtention du plasma, mais le sang
prélevé est mise dans un tube qui ne contient pas d’anticoagulant.
N.B : pour les analyses en biochimies la personne doit être à jeun au minimum de 8h ou 12h.

Dans cette partie nous sommes passe au dosage de 3 éléments uniquement :

 LA GLYCEMIE : désigne le taux de glucose dans le sang. Ici nous avons besoin de
l’échantillon, des réactifs pour le dosage, de la solution standard et de l’appareil
spectrophotomètre, donc il faut prévoir 3 tubes mais nous avons utilisé qu’un seul
tube: La solution du travail mélangé (tube blanc ou témoin) ; La solution standard
pour tenir la concentration du glucose (100mg\dl) pour le malade.
Nous avons prélevé dans tous les tubes 10µl du liquide prête à l’emploi à l’aide de la
micropipette de 1000 µl, rajouter 10 µl pour le plasma du malade, incuber
l’échantillon pendant 15 min. après tout le mécanisme il faut aller au
spectrophotomètre pour faire la lecture enfin d’obtenir les absorbances ou les DO
(densités optique) de l’échantillon.
C’est ainsi qu’on a eu une valeur de 59,4 mg\dl de glycémie pour notre échantillon,
c’est qui n’est pas normal pour le patient par rapport à la valeur normale qui est de 60
à 110 mg\dl selon la méthode de Folin et wu.
N.B : Le résultat trouver était influencer par la présence du plasma et les globules
rouges dans un même tube pendant beaucoup de temps ce qui fait que les cellules
sanguines étaient en train d’utilisés le glucose.
 Phosphatase alcaline (PAL) : Normalement nous avons aussi deux réactifs pour
constituer la solution de PAL mais au laboratoire cette solution était déjà préparée,
nous avons prélevé 1000µm de cette solution, que nous avons ajouté 20µm du plasma,
nous avons incubé pendant une minute lire ensuite au spectrophotomètre à une
longueur d’onde de 405 nanomètre ; le résultat trouvé était de 159,8 UI/l qui est au-
delà de la normale qui varie entre 26 à 117UI/l. cette examen est demandé pour savoir
si il y a un problème hépatique aussi un problème lie aux os.
 L’enzyme GPT ou ALAT: la transaminase glutamopyruvique catalyse le transfert
deux groupements amine vers l’alpha cetoglutarate. Etant une enzyme cytotoxique,
elle augmente dans le plasma même pour des atteintes mineures du foie. Son analyse
est effectuée sur le sérum ou le plasma. Une hémolyse peut fausser les résultats. Nous
avons des deux réactifs dont le premier est de 800µm et le deuxième est de 200µm
qui était déjà préparer pour donne la solution d’ALAT ; nous avons eu à prélever
1000µm de cette solution puis on ajouter 100µm du plasma ;on homogénéise ;
 Incuber pendant une minute, en suite nous avons placer dans le spectrophotomètre et
le résultat était de 94,8 UI/l qui est au-dessus de la valeur normale qui varie entre 0 et
40 UI/l.

IV. Techniques de laboratoire en parasitologie et microbiologie

A) Parasitologie :

Cette technique nous aide à faire, L’examen des selles permettant la recherche des
œufs (ascaris, ankylostomes) , les kystes d’amibes, les parasites d’anguillules.

Les matériels utilisés pour les prélèvements des selles : Le microscope, La lame
couvre objet, La lame porte objet, Le bocard pour prélever l’échantillon, Le flacon pour
mettre les selles, Les réactifs on utilise la solution physiologique pour une bonne conservation
de l’échantillon. L’analyse de cet examen a commencé par un examen physique en regardant
l’aspect des selles et en suite un examen direct au microscope puis en examen indirect s’en
suivit nous permettant ainsi d’isoler et de concentrer les œufs et les larves des parasites.

B) Microbiologie :

 Goutte épaisse : C’est un examen pour détecter la présence ou non du parasite, nous
avons prélevé le sang au niveau de la pulpe du majeur, on a essuyé la première goutte
car elle contient la lymphe puis nous avons placer une goutte de sang sur une lame porte
– objet, défibriner immédiatement par un mouvement en spirale fait à l’aide d’un coin
d’une lame porte-objet, nous avons sécher à l’air libre puis colorer sans fixation avec la
solution de Giemsa 10%. Ceci a une double action : hémolyse, déshémoglobinisassions.
La coloration se fait pendant 15 à 30 minutes et est fonction de l’épaisseur de la goutte
épaisse ; laver à l’eau, sécher et examiner à l’oculaire 10x, objectif à immersion. 100x.
 Cette examen est complète par le flottis de sang qui maintenant avec le précèdent sont
faits sur une même lame, nous avons mis une autre goutte de sang sur l’autre cote d’une
même lame que la goutte épaisse, nous avons poussé la lame inclinée vers l’autre
extrémité de la lame porte objet, entraînant derrière elle le sang qui s’étale en une couche
d’épaisseur minimum, on laisse sécher puis on fixer pendant 3 minutes à l’aide du
méthanol absolu et colorer avec la solution de Giemsa 10% pendant 20 à 30 minutes
  La microscopie : nous a permis d’étudier la morphologie des bactéries de notre
échantillon par l’examen après coloration usuelles (différentielles) passant par la
coloration de Gram (utilisant certains réactifs) ;
CONCLUSION

Nous voilà arriver au terme de notre pratique au sein du laboratoire de KMC ; au

cours de laquelle nous avions su ajouter un savoir de plus sur notre théorie et surtout
comprendre certaines manipulations grâce à cette pratique. Il nous sera très ingrat si nous ne
savons revenir vers la main qui nous permis d’être en ce moment capable de se pointer dans
un laboratoire et d’ y réaliser un travail bien fait. C’est ainsi que nous adressons nos sincères
remerciements à notre encadreur principal le PO Dr Victor Ndibualonji de nous avoir
dispensé le cours de Biologie clinique ainsi que ceux qui l’ont accompagnés au cours de la
pratique. Car ils ont usé de leur zèle pour enfin contribuer à notre formation, en tout et pour
tout nous vous disons encore merci pour tout.

SUGGESTIONS

1. Que l’on puisse expliquer et donner la chance au moins à un étudiant d’applique pour
que l’encadreur puisse savoir sur quel point les étudiants n’ont pas pu comprendre ;
2. Commencer à faire toutes les mélanges en présences des étudiants ;
3. Que le gouvernement pour améliorer la santé de la population par le canal du
ministère de la santé de construire un laboratoire moderne dans la province du
Lualaba qui permettra aux étudiants et aux personnels soignants de
perfectionner dans le domaine médical et de financé les recherches scientifiques
médical.