REPUBLIQUE DU BENIN

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA

RECHERHCHE SCIENTIFIQUE

UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI

ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI

Département : Génie Biomédical

Filière : Maintenance Biomédicale et Hospitalière
Semestre no4
Cours : Equipements et signaux biomédicaux

THEME :
La centrifugeuse

Membres du groupe : Nom des enseignants :

ADIMI Serge M. DATON Medenou
AGBODJELOU Arielle Mme. OGOUDIKPE
Nicarette
ALINEHEBOU-SALAKO
Kevin
GODONOU Gilles
HOUNSA Eloïse
HOUNSOSSOU Espoir
 PLAN
Introduction
1. Définition de la centrifugeuse
2. Les différents composants d’une centrifugeuse et les paramètres de son
utilisation
3. Les différents types de rotors
4. Les types de centrifugeuses
5. Domaines d’utilisations
6. Principe de fonctionnement d’une centrifugeuse
7. Précautions d’usage
8. Défaillances de l’appareillage
9. Maintenance d’une centrifugeuse
Conclusion
Webographie

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 Introduction

Dans les laboratoires plusieurs expériences sont effectuées grâce à des dispositifs, nous pouvons
mentionner parmi ces expériences la centrifugation. Cette expérience vise à séparer des liquides
contenus dans un même tube, ceci ne peut être fait sans le dispositif appelé centrifugeuse qui
fait tourner ces tubes avec une grande vitesse pour entrainer le dépôt du liquide lourd au fond
des tubes et la submersion du liquide léger dans le même tube placé dans ce dispositif. De quoi
est fait ce dispositif ? Comment fonctionne-t-il ? Comment le surveiller ?

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 1. Définition d’une centrifugeuse
Une centrifugeuse est un dispositif tournant à grande vitesse utilisé au laboratoire pour effectuer
la centrifugation. La centrifugation est un procédé de séparation des composés d'un mélange en
fonction de leur différence de densité en les soumettant à une force centrifuge. Le mélange à
séparer peut être constitué soit de deux phases liquides, soit de particules solides en suspension
dans un fluide.

2. Les différents composants d’une centrifugeuse et les paramètres de son

utilisation

Le composant principal d’une centrifugeuse est le rotor, qui est la partie mobile qui tourne à
des vitesses importantes. Les rotors peuvent être fixés en place, ou une centrifugeuse peut
utiliser plusieurs rotors fixés au sommet de la tige. Généralement, le rotor de la centrifugeuse a
un couvercle qui est visé étroitement vers le bas pour empêcher les échantillons de s’envoler.
La majorité des centrifugeuses possède une partie de réfrigération qui permet de contrôler la
température interne lors de la rotation.

Elles comprennent aussi des boutons permettant d’entrer les paramètres pour chaque utilisation,
ce qui peut inclure : La durée de la centrifugation, la température, et l’amplitude de la rotation
en termes de vitesse et de force relative. La vitesse de rotation est mesurée en nombre de
rotations par minute appelé RPM (revolutions per minute en anglais). RPM est une valeur
délicate, parce-que ce n’est pas la vitesse de la centrifugeuse qui provoque la séparation des
particules dans un mélange, mais la force qui s’applique sur ces particules. La force agissant
sur une particule est fonction du rayon du rotor de la centrifugeuse, et vu que des centrifugeuses
différentes ont des tailles de rotor différentes, différentes forces peuvent être appliquées à la
même vitesse, ou RPM. La force de centrifugation peut aussi être quantifiée comme la force
centrifuge relative ou RCF (Relative centrifugal force en anglais). La RCF est généralement

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présentée comme un multiple de l’accélération de la pesanteur de la terre. La RCF est exprimée
comme le produit du rayon du rotor par le carré de la vitesse angulaire divisé par l’accélération
de la pesanteur terrestre. La RCF peut être mise en relation avec le RPM par l’équation suivante,
où r est le rayon de la centrifugeuse mesuré en centimètres. L’utilisation de cette équation peut
faire la différence entre une expérimentation ratée ou réussie, mais vous ne devez pas
nécessairement réaliser ce calcul pour chaque nouvelle procédure. Les centrifugeuses sont
souvent livrées avec des abaques qui peuvent aider à convertir la RCF en RPM assez facilement.
Utilisez une règle pour connecter le rayon de la centrifugeuse et une valeur de RPM donnée, en
vue d’obtenir la RCF.

3. Les différents types de rotors

La fabrication et la conception des rotors doivent tenir compte de nombreuses contraintes. Ils
doivent être évidemment suffisamment résistants pour supporter les accélérations voulues mais
suffisamment légers pour que le moteur de la centrifugeuse puisse les faire tourner à la vitesse
requise. Pour les centrifugations à faible vitesse peuvent se faire avec des rotors en acier.
Cependant, pour les fortes accélérations, on utilise des alliages à base de métaux à la fois légers
et résistants comme l'aluminium et le titane. Les rotors faits de matériaux composites (à base
de fibres de carbone), extrêmement résistants et légers, ont même fait leur apparition depuis
quelques années.

C'est pourquoi chaque rotor a une vitesse maximale à laquelle on peut les faire tourner. Il est
essentiel de respecter scrupuleusement cette limite pour éviter le bris du rotor ou celui du
moteur.

Une autre contrainte est la dimension du rotor. Pour maximiser la vitesse de rotation il faut
minimiser le rayon du rotor, donc sa taille. Pour centrifuger de gros volumes, il faut évidemment
de plus gros rotors, ce qui explique que les rotors de grande capacité ne peuvent tourner qu'à
des vitesses réduites. Il existe trois grands types de rotor : à angle fixe, à godets mobiles et
verticaux.

Les rotors à angle fixe ("fixed angle") sont faits de blocs de métal (aluminium, titane) avec des
puits creusés à l'intérieur et inclinés avec un certain angle par rapport à l'horizontale,
généralement de l'ordre de 15° à 35° selon les modèles. Les tubes à centrifuger sont déposés
dans ces puits. Comme ces rotors sont relativement compacts. Ils sont plus faciles de les faire
tourner rapidement à cause de leur rayon relativement court. Les particules sédimenteront
surtout le long de la paroi du tube (voir figure suivante). De plus, elles s'accumulent plutôt sur
des côtés du fond du tube à centrifuger. Pour certains types de particules cela engendre une
friction qu'elles ne peuvent pas supporter et se brisent. Cependant, la plupart des centrifugations
à vitesses moyennes et élevées se font avec ce type de rotor.

Les rotors à godets mobiles ("swinging buckets") se réorientent lors de la centrifugation. En

effet, les godets sont disposés sur des crochets ou un système à bascule. Quand la rotation du
rotor débute les godets (et les tubes qu'ils contiennent), sous l'effet de la force centrifuge, se
réorientent et passent en position horizontale. Les particules peuvent donc sédimenter
directement dans le fond du tube sans jamais heurter les parois du tube (voir figure suivante).
Elles s'accumulent dans le fond du tube à centrifuger. Le principal inconvénient de ce type de
rotor est qu'il ne peut pas atteindre des vitesses très élevées comparé à l'autre. En effet, les

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godets en position horizontale allongent énormément le rayon du rotor, ce qui rend plus difficile
de lui imprimer des vitesses de rotations élevées. Ce genre de rotor est utilisé principalement
dans les centrifugations en gradients discontinus ou continus.

Les rotors à angle vertical présentent la longueur de trajet la plus courte, le temps d'exécution
le plus rapide et la plus haute résolution. Dans un rotor vertical, les tubes sont verticaux pendant
la course. La courte longueur de trajet et les faibles facteurs K de ces rotors signifient que la
particule n'a qu'une courte distance pour se déplacer vers une pastille, ce qui réduit le temps
d'exécution de l'application. Ce n'est pas le meilleur rotor à utiliser pour la granulation, car la
force centripète dans un tube parfaitement vertical écarte la pastille sur toute la paroi extérieure
du tube. Un rotor vertical est utilisé pour :

 Séparations iso pycniques - spécifiquement pour la bande de DNS dans le chlorure de

césium
 Séparations de coussins en gradient et densité, comme pour les particules virales

4. Les différents types de centrifugeuses

La principale limite qui détermine la vitesse de rotation du rotor et évidemment la force du

moteur qui le fait tourner. Plus le rotor est lourd et volumineux, plus l'effort que doit fournir le
moteur est grand.

Centrifugeuses de table : Les modèles les plus simples, souvent appelées centrifugeuses
cliniques, permettent d'atteindre de faibles accélérations (1000 à 3000 xg) à des vitesses de
rotation relativement basses (moins de 3000 RPM). Certains modèles sont réfrigérés et d’autres
non.

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Centrifugeuses au sol : Ces appareils sont un peu plus complexes. Elles permettent d'obtenir
des vitesses de rotation de l'ordre de 30 000 RPM, donnant pour les plus petits rotors des
accélérations d'environ 20 000xg. Tous les modèles sont réfrigérés. Ces centrifugeuses
permettent de centrifuger relativement de gros volumes. Certains rotors peuvent même contenir
quatre ou six bouteilles de 250mL.

Ultracentrifugeuses : Ce sont des appareils complexes et coûteux qui permettent d'atteindre des
accélérations très élevées (jusqu'à 300 000 xg) en faisant tourner des rotors très rapidement (50-
130 000 RPM). De telles vitesses de rotation ne peuvent s'obtenir que sous pression très réduite.
Les faibles pressions permettent aussi d'éviter la surchauffe du rotor et de l'échantillon. Tous
les modèles sont réfrigérés. Ces appareils doivent donc être munis de pompe à vide et de
systèmes de réfrigération. Les volumes sont quelque peu limités, généralement on ne trouve pas
de rotors pouvant contenir plus d'une dizaine de tubes de 40mL.

Micro centrifugeuses : Ce sont des centrifugeuses spécialement conçues pour les micro-
volumes très souvent employés en biochimie moderne. Les micros tubes à centrifuger sont des
petits tubes coniques généralement de 1.5mL (entre 0.2 et 2mL) fait de polypropylène et assez
peu dispendieux. Les centrifugeuses de ce type peuvent être réfrigérées et atteindre des
accélérations de l'ordre de 12-15 000 xg en faisant tourner le rotor entre 10000 et 16000RPM.
Les modèles les moins couteux n'ont pas de contrôle de vitesse et ne sont pas réfrigérés.

Ultracentrifugeuses analytiques : Ce sont des appareils de moins en moins utilisés. Ces

centrifugeuses servent surtout à analyser la taille et la masse des particules et des protéines.
D'autres techniques beaucoup moins coûteuses sont utilisées de nos jours : électrophorèse,
filtration sur gel...

5. Domaine d’utilisation

Les centrifugeuses ont de multiples applications dans de nombreux domaines, seule leur
utilisation en laboratoire de biologie médicale nous intéressera ici.
Elles permettent :
- En biochimie : la séparation du plasma ou du sérum sur lesquels seront pratiqués
différents dosages, la clarification des urines pour dosages spécifiques, etc ;
- En hématologie : la détermination de l’hématocrite, les dosages des facteurs
plasmatiques de la coagulation ;
- En immunohématologie : détermination des anticorps irréguliers, des groupes sanguins,
lavage des hématies pour les débarrasser du plasma, etc ;
- En bactériologie : pour la cytologie de liquides de différentes origines, etc ;
- En parasitologie : pour des épreuves de concentration des parasites, etc ;
- En toxicologie, pharmacologie, etc. : la fréquence d’utilisation des centrifugeuses est
moindre dans ces domaines.

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 6. Principe de fonctionnement d’une centrifugeuse

Une centrifugeuse est un appareil destiné à imprimer une force centrifuge, grâce à un
mouvement de rotation, à un mélange généralement liquide ou solide. La force centrifuge
est une accélération qui s’exerce vers l’extérieur de l’axe de rotation (la tige) et permet la
sédimentation au fond du tube des particules les plus lourdes et la submersion du liquide le
plus léger.

L’accélération obtenue s’exprime en « xg ». Elle est fonction de la vitesse angulaire w et de

la distance à l’axe de rotation (rayon) r en cM selon la formule : g=w2.r

L’accélération g peut aussi s’exprimer en fonction du nombre de tours par minute n selon
la relation : g=1,119.105.r.n2

La rotation est créée par un moteur électrique entrainant un rotor, le tout dans une enceinte
solide pouvant supporter, sans dégâts extérieurs, l’éclatement éventuel du rotor. Le rotor est
en général équipé de quatre branches sur lesquelles sont articulées des nacelles. Chaque
nacelle reçoit un plot de centrifugation dans lequel sont placés des tubes à centrifuger dont
le nombre et le volume dépendent du domaine d’application. Les centrifugeuses sont
équipées d’une sécurité bloquant l’ouverture de couvercle lorsqu’elle est en
fonctionnement.

7. Précautions d’usages

 Ne jamais oublier de vérifier le chargement et le bon positionnement des plots pour

assurer l'équilibrage, en cas de vibrations ou de bruit anormal, stopper d'urgence en
ramenant le sélecteur de vitesse à zéro. Attendre l'arrêt complet pour soulever le capot ;
 N'utiliser que des plots fournis par le fabricant et adaptés aux tubes à centrifuger ;
 Ne jamais tenter de faire démarrer la centrifugeuse avec la main ;
 Ne jamais tenter d'ouvrir le couvercle en cours de centrifugation ;
 Ne jamais tenter de ralentir la centrifugeuse autrement qu'en utilisant le système de
freinage prévu ;
 En cas de bris de tube, prendre toute précaution utile et prévue par la PO d'Hygiène et
de Sécurité relative au secteur d'activité (PO5SH).

8. Maintenance d’une centrifugeuse

Le rotor et les accessoires doivent être nettoyés et désinfectés régulièrement. La qualité des
analyses peut être affectée par un appareil sale (risque de contamination croisée). Graisser
régulièrement les supports des nacelles pour une bonne mobilité de celle-ci pendant la
centrifugation.
Un programme de maintenance doit être prévu pour vérifier que la vitesse de centrifugation est
bien celle attendue.

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  Maintenance préventive
Vérification annuelle :
- Test de sécurité électrique ;
- Test de vérification du verrouillage du couvercle ;
- Arrimage des nacelles.
 Maintenance curative
Changement du moteur ou celui des charbons selon l’étendu des pannes.

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 Conclusion

Après la collecte des informations faites, nous pouvons dire que la centrifugeuse est un appareil
utilisé au laboratoire pour plusieurs applications. C’est un appareil constitué d’un moteur
électrique qui fait tourner le rotor de façon rotationnelle pour permettre de séparer les liquides
contenus dans les tubes qui sont placés dans les nacelles qui elles aussi font partir des branches
du rotor. Il existe plusieurs types de rotors selon les applications. Les centrifugeuses sont des
appareils qui sont comme d’autres appareils à surveiller.

Webographie
https://www.beckman.fr/centrifugeuses/rotors
http://coproweb.free.fr/gbearemi/pf4pm1.htm
http://www8.umoncton.ca/umcm-gauthier_didier/siitub/centrifugation.html
https://biologiesansfrontieres.org/wp-content/uploads/2018/04/Fiche-infos-
BSF-Humatem-Centrifugeuse.pdf
http://www.cscq.ch/SiteCSCQ/FichierPDF_FR/FT-Centrifugation.pdf

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