EVALUATION IN VITRO DE L’ACTIVITE ANTIMITOTIQUE DES

EXTRAITS TOTAUX AQUEUX DES FEUILLES, ECORCES ( TIGES

ET RACINES) DE PENIANTHUS LONGIFOLIUS
(Menispermaceae)
Isaac MWESA MWANANGWA
Gradué en Sciences Pharmaceutiques

DIRECTEUR: Prof. Dr. Trésor KIMBENI M.

 INTRODUCTION
 OBJECTIFS
 MATERIEL
 METHODE
 RESULTATS ET DISCUSSION
 CONCLUSION
 L’homme sait depuis for tlongtemps tlongtemps que la
nature est por teuse d’une richesse médicinale
incontestable. Les peuples ancestraux du monde
entier ont tiré prof it des propriétés biologiques
des extraits de diverses plantes rencontrées dans
no s fo rêt s po ur s o i g ner et préveni r les
pathologies courantes. C’est ainsi que cer ta ins
utilisaient par exemple les extraits des pa ies de
c e r ta i n e s p l a n t e s d e l a f a m i l l e d e s
M e ni s p e r ma c e a e ( Pe n i a n t h u s l o n g i f o l i u s ,
Penianthus patuliner v i s ) pour traiter cer ta ines
pathologies, notamment le cancer.
L’Afrique  fardeau dispropo ionné des maladies transmissibles et
non-transmissibles.
NON-transmissible: Cancer.
Les projections laissent apparaitre 15 millions nouveaux cas/an d’ici
2020, dont 70 % dans les PED et plus d’un million dans la région
africaine où l’on a enregistré 582 000 cas en 2002, chi re qui devrait
doubler d’ici 2020(3)
Les décès 12,5% en 2005
Il impo e de signaler d’une pa que le pro l épidémiologique du
cancer en RDC n’est pas connu et pou ant la maladie demeure un
sérieux problème de santé publique;
et d’autre pa , le test de ce aines substances naturelles extraites
de la ore et de la faune a conduit a des succès notables au plan
thérapeutique comme au plan commercial.
D’où aussi l’impo ance de faire des études sur des plantes
présentant un potentiel dans la prise en charge du cancer.
Objectif général
 Evaluer l’activité antimitotique des
extraits de Penianthus longifolius;

Objectifs spéci ques

 Evaluer le pouvoir inhibiteur de la
germination des grains de sorgho par
Penianthus longifolius;
 Déterminer les di érentes
concentrations minimales inhibitrices
(CMI).
I. Matériel de laboratoire
II. les solvants et les réactifs
III. Matériel végétal
1. a. Echantillon
Les feuilles, écorces de tiges et racines de
Penianthus longifolius
1. b. Témoin
Les feuilles et écorces des tiges et racines de
Catharanthus roseus
c. Le matériel germant
Les grains de sorgho
 SCREENING CHIMIQUE
Sur des extraits préparés par décoction et
macération;
Par des réactions de coloration en solution.

 METHODE D’INHIBITION DE LA
GERMINATION DES GRAINS DE SORGHO
(Test antimitotique)
I. RESULTATS
I.1. SCREENING CHIMIQUE
Tableau I. RESULTATS DU SCREENING CHIMIQUE

Groupe chimique Sur la drogue sèche

Sur les feuilles Sur les écorces des racines Sur les écorces des
tiges
M D M D M D
1. POLYPHENOLS TN + TN + TN +
a. Tanins catéchique TN + TN - TN -

b. Tanins galliques TN - TN - TN -
c. Flavonoides TN + TN + TN +
d. Quinones liés TN - TN - TN -
e. Quinones libres - - -
f. Anthocyanes TN - TN - TN -
g. Coumarines TN TN TN TN TN TN
2. SAPONINES + + +
3. ALCALOIDES TN + TN + TN +
4. HETEROSIDES - - -
CARDIOTONIQU
ES
5. CO M P O SES + + +
REDUCTEURS
6 . S TERO I DES & TN TN TN TN TN TN
TRITERPENES
7. CAROTENOIDES + TN - TN - TN
SCREENING CHIMIQUE (SUITE)
LEGENDE
M: Macéré - : Absence
D : Décocté TN : Test non réalisé
+ : présence
Ce tableau indique que les alcaloïdes et les sucres
réducteurs, saponines et les avonoïdes sont
présents dans toutes les pa ies de la plante
alors que les anthocyanes, quinones libres et
liés, les hétérosides cardiotoniques y sont
absents.
 I.2. RESULTATS DE L’EVALUATION DE L’ACTIVITE ANTIMITOTIQUE

I.2.1. LA POUSSÉE DES PLANTULES DANS LE TÉMOIN NÉGATIF

Tableau II. Longueurs moyennes des plantules en centimètres (cm)

ayant poussé en présence de l’eau distillée (témoin négatif)

PLANTULE I II III IV V VI VII VIII IX X Lo n g u eu r

moyenne
Feuilles (en cm) 2,2 6,4 7 6 5 6 5,2 6 3 6,7 5,35

Tige 2,7 4 4,5 3 3,5 4,5 2,8 3,2 4 5 3,72

Racine 5,1 5 8 5 4 5,1 6,2 4 4,5 6,3 5,32

Plantule entière 10 15,4 1 9 , 14 12,5 1 5 , 1 4 , 1 2 , 1 1 , 18 14,39

5 6 2 2 5
I.2.2. Inhibition dans l’extrait total de la pa ie souterraine du témoin positif (Catharanthus
roseus)

Tableau III : Longueurs moyennes des plantules (en cm) ayant poussé en présence de
l’extrait lyophilisé du décocté de Catharanthus roseus (Pa ie souterraine).
Plantules I II III IV V VI VII VIII IX X Moyenne LEGENDE
Concentratio P a r ti e en cm R: Racine
n mesurée T: Tige
0,125g/40ml R 1,0 0,7 0,7 0,5 0,4 1,4 0,7 0,8 1,2 1,0 0,84 F: feuille
T 0,7 0,4 0,2 0,1 0,1 0,5 0,5 0,5 0,6 0,7 0,43 P: plantule entière
F 0,2 0,1 0,2 0,5 0,7 0,2 0,5 0,4 0,8 0,2 0,38
P 1,9 1,2 1,1 1,1 1,2 2,1 1,7 1,7 2,6 1,9 1,65
0,25g/40ml R 0,5 0,5 0,3 0,1 0,5 0,5 0,2 0,5 0,6 0,5 0,42
T 0,3 0,1 0,2 0,1 0,3 0,2 0,3 0,1 0,2 0,3 0,19
F 0,8 0,5 0,2 0,3 0,3 0,2 0,3 0,3 0,2 0,3 0,34
P 1,6 1,1 0,7 0,4 1,1 0,9 0,8 0,9 1,0 1,1 0,96
0,35g/40ml R 0 0,1 0 0 0,1 0,1 0,1 0 0 0,1 0,05
L a Co n cen tratio n
T 0 0 0,2 0 0,1 0 0,1 0 0,1 0 0,05
F 0 0 0 0 0,1 0 0,1 0 0 0 0,02
Minimale inhibitrice est
P 0 0,2 0,2 0 0,2 0,1 0,3 0 0,1 0,1 0,12 supérieure ou égale a
0,4g/40ml 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0,4g/40ml
0,5g/40ml 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
0,75g/40ml 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
 I.2.2. Inhibition dans l’extrait total de la pa ie souterraine du témoin
positif (Catharanthus roseus) (suite)

Tableau IV : Ef fet d’inhibition de la germination des grains de sorgho

par les éc o rc es des rac i n es de Catharanthus roseus (par ti e
souterraine)
Plantule I II III IV V VI VII VIII IX X L ∆L E f fet
s en %

Concentr
at io n e n
g/40ml
0,125 1,9 1,2 1 , 1 , 1 , 1,2 2,1 1,7 1,7 1,9 1,65 12, 7 88,39
1 1 2 2
0,25 1,6 1,1 0 , 0 , 1 , 0,9 0,8 0,9 1,0 1,1 0,96 13, 4 93,74
7 4 1 3
LEGENDE
0,35 0 0,2 0 , 0 0 , 0,1 0,3 0 0,1 0,1 0,12 14, 2 99,16
L: longueur moyenne 2 cm 2 7
∆L: Variation
0,4 0 0de la0longueur
0 0 0 0 0 0 0 0 14, 3 100
∆L : 14,39 – L (14,39 cm = longueur moyenne des plantules dans le témoin négatif)
9
L’e et d’inhibition en % =
I.2.3. Extrait total de la pa ie souterraine (PENIANTHUS LONGIFOLIUS)

Tableau n° V : ce tableau montre les longueurs moyennes des plantules (en cm) ayant
poussé en présence de l’extrait lyophilisé du décocté de PENIANTHUS LONGIFOLIUS :
Pa ie souterraine
Plantules I II III IV V VI VII VIII IX X Moyenne
Concentrati Par tie en cm
on me su r
ée
0,125g/40ml R 0,7 0,5 0,5 0,7 0,6 0,8 0,2 1,3 0,9 1,0 0,72
T 0,4 0,5 1 0,9 1 0,6 0,7 0,4 0,4 0,4 0,75
F 0,3 0,5 0,6 0,6 0,7 0,5 0,7 0,3 0,3 0,3 0,48
P 4,9 3,8 2,4 2,1 3,1 3,3 4,9 3,6 3,2 3,0 1,95
0,25g/40ml R 0,7 0,4 0,3 0,4 0,7 0,6 0,3 0,3 0,6 0,2 0,45
T 0,4 0,3 0,5 0,1 0,2 0,2 0,2 0,3 0,2 0,5 0,29
F 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,2 0,1 0,3 0,4 0,4 0,29
P 1,4 1,0 1,1 0,8 1,2 1,0 0,6 0,9 1,2 1,1 1,03
0,35g/40ml R 0 0,1 0 0 0,1 0,1 0,1 0,1 0 0 0,05
T 0 0 0,2 0,1 0,1 0 0,1 0,1 0 0,1 0,07
F 0 0 0,1 0 0 0 0,1 0 0 0,1 0,03
P 0 0,2 0,3 0,1 0,2 0,1 0,3 0 0,1 0,2 0,15
0,4g/40ml R 0 0,1 0 0,1 0 0 0 0 0 0,2 0,4
T 0 0 0,2 0 0 0 0,1 0 0,1 0,1 0,5
LEGENDE F 0 0 0 0 0 0 0 0 0,1 0 0,1
R : Racine
P 0 0,1 0,2 0,1 0 0 0,1 0 0,2 0,3 0,10
T : Tige
0,5g/40ml 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
F : feuille
0,75g/40ml 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
P : plantule entière CMI ≥ 0,5g/40ml
I.2.3. Extrait total de la par tie souterraine (PENIANTHUS LONGIFOLIUS)
(SUITE)

Tableau VI. Ef fet d’inhibition de la germination des grains de sorgho par le

l yo p h i l i s a t d u d éc o c t é d es éc o rc es d es ra c i n es d e P E N IAN T H U S
LONGIFOLIUS : pa ie souterraine
Plantule I II III I V V V I V I IX X L ∆L Ef fe t
s V I I II en %

Con cen
tratio n
e n
g/40ml
0,125 4, 3, 2, 2, 3 , 3, 4 , 3 , 3 , 3 , 1 , 1 2 , 86,4
9 8 4 1 1 3 9 6 2 0 95 44

LEGENDE 0,25 1, 1, 1, 0, 1 , 1, 0 , 0 , 1 , 1 , 1 , 1 3 , 92,8

L : longueur moyenne cm4 0 1 8 2 0 6 9 2 1 03 36
∆L : Variation de la longueur
∆L : 14,39 – L (14,39 cm = longueur
0,35 0 0, 0, 0,moyenne
0 , 0, 0 , des
0 plantules
0 , 0 , 0 , dans le témoin
1 4 , 98.9
négatif) 2 3 1 2 1 3 1 1 15 24
L’e et d’inhibition en % =
Tableau VII : Comparaison de l’ef fet d’inhibition (en %) des lyophilisat des
ex t ra it s a q ueux ( d éco ct é) d es éco rces d es ra cin es d e PE N I A N T H U S
LONGIFOLIUS et de CATHARANTUS ROSEUS. (Pa ie souterraine)

Concentra 0,125g / 4 0,25g/40 0,35g/40 0,4g/40 0,5g/40

tion 0 ml ml ml ml ml
Extraits
CATHARA 88,39 93,74 99,16 100
N T U S
Concentration
ROSEUSminimale inhibitrice (CMI) ≥ 0,5g/40ml

PENIANTH 86,4 92,8 98,9 99,3 100

U S
LONGIFOL
IUS
I.2.4. Extrait total de la pa ie aérienne du témoin positif (CATHARANTHUS ROSEUS)

Tableau n° VIII: Ce tableau indique les longueurs moyennes des plantules (en cm) ayant poussé en présence
de l’extrait lyophilisé du décocté de CATHARANTHUS ROSEUS : pa ie aérienne

Plantules I II III IV V VI VII VIII IX X Moyen

Concentr Pa ie ne en
ation me su cm
rée LEGENDE
0,125g/4 R 1 2 2 2 0 , 0 , 1 , 3 , 3 , 3 , 1,85 R : Racine
0ml 3 3 3 2 1 3 T : Tige
T 3 3 2,5 1,8 1 , 1 , 1 1 , 2 1 , 1,9 F : feuille
8 2 5 2 P : plantule entière
F 3 , 3,3 3,5 3 3 3 3 , 3 , 3 , 3 , 3,29
5 2 2 7 5
P 7 , 8,3 7,0 6,8 5 , 4 , 5 , 7 , 8 , 7 , 7,04
5 1 5 5 9 8 0
0,25g/40 R 1 0,5 0,5 0,5 0 , 0 , 1 1 , 0 , 1 0,71
La Concentration Minimale Inhibitrice
ml 5 5 1 5 (CMI) ≥ 0,35g/40ml
T 2 , 1,5 1,7 1,5 1 , 2 1 , 2 2 1 1,68
2 2 7
F 1 , 1 1 1 1 , 1 , 1 , 1 , 1 , 1 1,15
2 3 1 3 4 2
P 4 , 3,0 3,2 3,0 3 , 4 , 4 , 4 , 3 , 3 3,54
4 0 6 0 5 7
0,35g/40 R 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
ml
T 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
I.2.4. Extrait total de la pa ie aérienne du témoin positif (CATHARANTHUS ROSEUS) (suite)

Tableau IX : Ef fe t d’inhibition de la germination des grains de sorgho par le lyophilisat du décocté

des écorces des racines de CATHARANTHUS ROSEUS : pa ie aérienne

Plantules I II III IV V VI V I VII IX X L ∆L E f fe t

I I en %
Concentra
tion en
g/40ml
0,125 7 , 8 , 7 , 6 , 5,1 4 , 5 , 7 , 8 , 7,0 7,0 7,35 51,1
5 3 0 8 5 5 9 8 4
0,25 4 , 3 , 3 , 3 , 3,0 4 , 4 , 4 , 3 , 3 3,5 10,8 75,39
4 0 2 0 6 0 5 7 4 5
0,35 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 14,3 100
LEGENDE 9
L : longueur
0,4 0 0moyenne
0 0 0cm 0 0 0 0 0 0 14,3 100
∆L: Variation de la longueur 9
∆L: 14,39 –
0,5 0L0(14,39
0 0cm0= longueur
0 0 0 moyenne
0 0 0des14,3
plantules
100 dans le
témoin négatif) 9

L’e et d’inhibition en % =
I.2.5. Extrait total de la pa ie aérienne (PENIANTHUS LONGIFOLIUS)

Tableau X : Ce tableau indique les longueurs moyennes des plantules (en cm) ayant poussé en présence de
l’extrait lyophilisé du décocté de PENIANTHUS LONGIFOLIUS (échantillon) : pa ie aérienne

Plantules I II III IV V VI VII VIII IX X Moye

Concentratio Pa r ti nne
n e me e n
surée cm
LEGENDE
0,125g/40ml R 1 0,5 0,4 0,5 0,7 0,8 1,2 0,3 0,3 0,6 0,63 R : Racine
T 2,5 1,5 1 1 1,1 1 2 1,3 1,2 1,7 1,43 T : Tige
F 1,4 1,8 1 0,6 1,3 1,5 1,7 1 0,7 0,7 1,17 F : feuille
P 4,9 3,8 2,4 2,1 3,1 3,3 4,9 3,6 3,2 3,0 3,23 P : plantule entière
0,25g/40ml R 0,6 0,5 0,6 0,2 0,3 0,6 0,5 0,5 0,3 0,5 0,46
T 0,5 0,4 0,5 0,5 0,3 0,7 0,3 0,4 0,3 1,0 0,49 Concentration Minimale
F 0,5 0,2 0,2 0,1 0,3 0,3 0,2 0,1 0,1 0,5 0,25 Inhibitrice (CMI) ≥
P 1,6 1,1 1,3 0,8 0,9 1,6 1,0 1,0 0,7 2,0 1,2 0,75g/40ml
0,35g/40ml R 0,5 0,3 0,4 0,2 0,1 0,1 0,3 0,2 0,4 0,1 0,26
T 0,3 0,2 0,2 0,1 0,1 0,2 0,1 0,7 0,6 1 0,35
F 0,2 0,8 0,6 0,2 0,3 0,7 0,1 0 0,5 0 ,2 0,36
P 1,0 1,3 1,2 0,5 0,5 1,0 0,5 0,9 1,5 1,3 0,97
0,4g/40ml R 0,3 0 0,1 0,2 0,2 0,1 0,1 0,2 0,1 0,1 0,14
T 0,7 0,5 0,6 0,5 1 1 1,1 1 0,4 0,4 0,72
F 0 0,1 0,3 0,1 0,1 0 0 0,1 0,1 0,1 0,09
P 1,0 0,6 1,1 0,8 1,3 1,4 1,2 1,3 0,8 0,8 0,95
0,5g/40ml R 0,2 0 0,2 0,2 0,1 0,2 0,3 0,2 0,2 0,2 0,18
T 0,5 1 0,5 0,6 0,4 0,4 0,5 1 1 1 0,65
I.2.5. Extrait total de la pa ie aérienne (PENIANTHUS LONGIFOLIUS) (suite)

Tableau XI : Ef fe t d’inhibition de la germination des grains de sorgho par le lyophilisat du

décocté des feuilles de PENIANTHUS LONGIFOLIUS : pa ie aérienne

Plantules I II III IV V VI VII V I IX X L ∆L E et

Concentr II e n
ation en %
Concentration
g/40ml
min imale in h ibitrice
0,125 4 , 3, 2 , 2 , 3,1 3 , 4 , 3 , 3 , 3,0 3 , 11,1 77,6
(CMI) ≥ 0,75g/40ml
9 8 4 1 3 9 6 2 23 6
0,25 1 , 1, 1 , 0 , 0,9 1 , 1 , 1 , 0 , 2,0 1 , 13,1 91,7
6 1 3 8 6 0 0 7 2 9
0,35 1 , 1, 1 , 0 , 0,5 1 , 0 , 0 , 1 , 1,3 0 , 13,4 93,3
0 3 2 5 0 5 9 5 97 2
0,4 1 , 0, 1 , 0 , 1,3 1 , 1 , 1 , 0 , 0,8 0 , 13,4 93,4
0 6 1 8 4 2 3 8 95 4
LEGENDE
0,5 0 , 1 0 , 0 , 0,5 0, 0 , 1 , 1 , 1,2 0 , 13,5 93,9
L : longueur
7 7 moyenne
8 6cm8 2 2 87 2
∆L
0,75 : Variation
0 0 0 de0 la0 longueur
0 0 0 0 0 0 1 4 , 3 100
∆L : 14,39 – L (14,39 cm = longueur moyenne 9 des plantules dans le
témoin négatif)
L’e et d’inhibition en % =
Tableau n°12 : Comparaison de l’e et d’inhibition (en
%) des lyophilisat des extraits aqueux (décocté) des
feuilles de Penianthus longifolius et de Catharanthus
roseus. (Pa ie aérienne)

Concentrati 0,125g/40 0,25g/40 0,35g/40 0,4g/40 0,5g/40 0,75g/40

on ml ml ml ml ml ml
Extraits

CATHARANT 51,1 75,39 100

H U S
ROSEUS

PENIANTHU 77,6 91,7 93,3 93,4 93,9 100

S LONGIFOLI
US
2.1. SUR LE SCREENING CHIMIQUE

Le screening chimique a été réalisé en vue de mettre en évidence les groupes

phytochimiques contenus dans la plante étudiée. Pour ce faire, nous avions
fait recours aux dif férentes réactions d’identif ic ations couramment utilisées en
pharmacognosie, bien que ces réactions sont à ces jours considérées comme
réactions d’orientation ou tests préliminaires et qu’il est mieux de réaliser des
identif ic ations par chromatographie avec des substances chimiques de
référence.
D’où l’impor tance de signaler que les moyens nous permettant de faire lesdites
chromatographies en vue de conf irmer les résultats obtenus par les réactions
soulevées ci-haut, ont constitué l’un des facteurs limitant de cette étude.
Le screening a été ef fectué sur les décotés et macérés chloroformiques des
feuilles, écorces des racines et écorces des tiges de la drogue sèche pour avoir
une idée sur la composition de notre plante bien que c’est le décocté qui soit le
plus utilisé par les tradipraticiens.
Nous avions constaté que les alcaloïdes et les sucres réducteurs, les saponines
et les avonoïdes sont présents dans toutes les pa ies de la plante alors que les
anthocyanes, quinones libres et liés, les hétérosides cardiotoniques sont
absents dans ce aines pa ies de la plante.
Il impor te aussi de dire que ce sujet devra être considéré dans l’avenir pour
conf irmer la composition de ladite plante par des méthodes plus précises telle
que la chromatographie.
2.2. L’EVALUATION DE L’ACTIVITE ANTIMITOTIQUE
2.2.1. Sur les extraits aqueux de la drogue

Nous avions évalué l’activité antimitotique des décoctés des feuilles et

écorces des tiges (qui ont constitué la par tie aérienne) et écorces des
racines (par tie souterraine) de la drogue sèche af in de voir laquelle
présente un pouvoir antimitotique élevé par rappor tà un témoin positif
( Catharanthus roseus ) dont nou s avions au ssi considéré les par ties
aérienne et souterraine et évidemment en présence d’un témoin négatif.
Notre étude a montré que c’est la par tie souterraine qui présente un grand
pouvoir antimitotique (CMI ≥ 0,5g/40ml) par rappor tà la par tie aérienne
(C M I ≥0, 75g / 40m l) bi en qu e le t ém o i n po s i t i f (par ti e aér i en n e et
souterraine) utilisé demeure plus actif que notre échantillon d’étude en
présentant respectivement des concentrations minimales inhibitrices ≥
0,35g/40ml et ≥0,4g/40ml.

Sur ce, nous ne pouvons prétendre conclure que Penianthus longifolius

présente une activité anticancéreuse puisque ce test basé sur l’inhibition
de la germination des grains de sorgho n’est qu’une orientation et
nécessite une conf ir mation sensée venir d’un autre test à réaliser sur des
cellules cancéreuses.
 Le présent travail a consisté à évaluer l’activité antimitotique des
extrai ts aqu eu x obten u s par déc oc ti on des par ti es aéri en n e et
souterraine de Penianthus longifolius , une plante utilisée par les
tradipratiiens pour traiter le cancer.

Ces humbles résultats démontrent clairement que la plante

possède bel et bien une activité antimitotique non négligeable.

Le manque des moyens et de temps ne nous ont pas permis de

pousser les études plus loin en vue de rechercher le(s) groupe(s)
phytochimique(s) éventuellement responsable(s) de ladite activité et de
c o n f ir mer c et t e ac t i vi t é en réali s an t des t est s s u r des c ellu les
cancéreuses.

Cela étant, il serait donc impor tant de faire des études sur des
plantes utilisées dans la thérapie du cancer par des tradipraticiens et
même celles utilisées dans d’autres thérapies en vue d’en déterminer
l’activité antimitotique pour pouvoir en faire bons usages.
 Au Maître de la création du Monde
visible et invisible;
 Au Professeur Trésor KIMBENI;
 Au C.T MUSUYU M.
 A mes très chers parents Denis
KTSALANGA et Rita KASONGO et à tous
ceux qui me sont chers;
 Au CAMPUS POUR CHRIST.
 MERCI
AKSANTI SANA