DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
DU
PALUDISME
Sofiane Benseghier 2007
Protozoaire du genre Plasmodium transmis par les anophèles (70/400 sont
vecteurs)
1. HISTORIQUE
• Maladie très ancienne (homme préhistorique)
• Dans le passé, le paludisme était fréquent dans les marais Pontins
(Rome)
en Italien « mauvais air » : « mal-
aria
•1881» : découverte dans le sang par Alphonse Laveran (Prix Nobel)
•1948 : Toutes les phases du cycle de développement sont connues
(homme et animal)
•1960 : dernier cas autochtone en Europe (jusqu'en 2006 en Corse,
voir BEH) (paludisme d’importation et « d’aéroport »)
2. EPIDEMIOLOGIE
Dans le monde
environ 500 millions de personnes sont exposés au paludisme
endémique.
2,5 millions de décès par an, dont 1 million d'enfants.
En France
Plus de cas autochtone depuis le milieu du XXème siècle (Corse) : Cas
d’importation.
Paludisme d’importation: environ 6000 cas par an (5300 en 2005)
Létalité observée 0,4%
A Cochin
En 2006: 45 cas de paludisme Environ 8 demandes /
semaine
En 2007: 35 cas de paludisme
1 Positif / 6 demandes
3. REPARTITION GEOGRAPHIQUE Régions tropicales
CARTE DE REPARTITION
DU PALUDISME RESISTANT
(mise à jour : 11/05/2004)
3. REPARTITION GEOGRAPHIQUE
P.ovale uniquement en
Afrique
CARTE DE REPARTITION
DU PALUDISME RESISTANT
(mise à jour : 11/05/2004)
4. METHODES DIAGNOSTIQUES
Frottis
• Méthode de référence.
• Etalement d'une goutte de sang
sur lame porte-objet
• Fixation à l'alcool
• Coloration au Giemsa ou MGG
pdt 10 minutes.
• Lecture à l'objectif X100 à
l'huile à immersion.
• Seul examen permettant
le Dg d’espèce en pratique
courante.
• Permet le calcul de la
parasitémie.
4. METHODES DIAGNOSTIQUES
Goutte
épaisse
•Principe: Technique de
concentration
•Dépôt d'une goutte de sang au
centre d'une lame porte –objet.
Séchage.
•Coloration au Giemsa après ou en
même temps que la
• Différentes techniques
deshémoglobinisation
• Sensibilité améliorée ++
• Mais : Apprentissage de lecture
plus long.
• Lecture à l’objectif x100.
• Pas de diagnostic d ’espèce sur
GE (en principe)
NB: La NABM demande « Frottis + GE » (B100)
4. METHODES DIAGNOSTIQUES
Détection antigénique
ICT Now ® malaria : 2 antigènes
-HRPII (T1) spécifique de P. falciparum
-aldolase (T2) Ag commun aux 4 espèces
Sensibilité inférieure
à GE (FN avec les non
falciparum)
Reste positif après
traitement
Rares faux positifs
Coût
4. METHODES DIAGNOSTIQUES
Sérologie(A Cochin : IFI, antigène P. falciparum de BioMérieux)
Indication limitée :
•Diagnostic rétrospectif
•Détection des donneurs de sang ou d'organes
•Enquête épidémiologique
•Suivi de la décroissance des anticorps après accès aigu
•Paludisme viscéral évolutif (titres ⇗⇗)
5. PRISE EN CHARGE AU
LABORATOIRE UR
• Enregistrement : code "FGE" dans alphaS ! GE
N CE
• Frotti • Coloration au Giemsa !
s dilué (35 gouttes de Giemsa Téléphoner
dans 10 ml d'eau) pendant 10 systématiquement
2 lames
minutes le résultat au service
• Lecture 20 minutes
• Lecture à l’objectif
x100.
• Détection • Systématiquement sur les frottis
Antigénique négatifs.
fait par l'interne • A rajouter dans l’informatique. Code
• Goutte • Séchage «sur
ICT »
platine chauffante. Pas de fixation à l'alco
Épaisse
• Coloration au Giemsa dilué (35 gouttes de Giemsa dans 50 ml
2 lames
d'eau) pendant 30 minutes
• Colorée en même temps que le frottis
5. PRISE EN CHARGE AU
LABORATOIRE
• Dans tous les cas, quels que soient les résultats :
• Prévenir du résultat le médecin prescripteur.
• Devant tout résultat positif :
• Réaliser un frottis et une goutte épaisse supplémentaires (ne pas
fixer!!) pour le CNR du paludisme
• Mettre immédiatement l'échantillon au frais (frigo de la réception)
• Remplir la fiche papier de déclaration du CNREPIA.
(Centre National de Référence de l’Épidémiologie du Paludisme d’Importation et Autochtone) (Raccourci sur le bureau du
PC des internes) puis déclaration en ligne au CNR du paludisme
• Remplir la fiche d'envoi au CNR du paludisme (pour nous : PS) se
trouvant dans chaque boite cartonnée dédiée au transport des
échantillons.
• Envoyer le tube, les 2 lames, la fiche d'envoi dans boite cartonnée
"triple emballage" (1 boite est toujours stockée d'avance dans un frigo et les autres sont dans la réserve)
avec 3 blocs réfrigérants et le témoin de température (à activer).
• La feuille papier se conserve dans la pochette jaune "Paludisme"
6. DIAGNOSTIC D’ESPECE Sur le frottis
Taille du GR Formes en Schizontes Gamétocytes
Pigmentation Trophozoites
parasité développements
•Fins
Tâches de •Polyparasitismes possible Caractéristi-
Plasmodiu Non Inhabituel
Maurer •Formes marginales que en
hypertrophié
m (pH 7,2) •Double grains de Banane
falciparum chromatines possibles
Frottis monomorphe
6. DIAGNOSTIC D’ESPECE Sur le frottis
Taille du GR Formes en Schizontes Gamétocytes
Pigmentation Trophozoites
parasité développements
•Fins
Tâches de •Polyparasitisme possible Caractéristi-
Plasmodiu Non Inhabituel
Maurer •Formes marginales que en
hypertrophié
m (pH 7,2) •Double grains de banane
falciparum chromatines possibles
Frottis monomorphe
6. DIAGNOSTIC D’ESPECE Sur le frottis
Taille du GR Formes en Schizontes Gamétocytes
Pigmentation Trophozoites
parasité développements
•Fins
Tâches de •Polyparasitismes possible Caractéristi-
Plasmodiu Non Inhabituel
Maurer •Formes marginales que en
hypertrophié
m (pH 7,2) •Double grains de Banane
e
falciparum chromatines possibles
Frottis monomorphe
Granulations
Plasmodiu hypertrophié de Schüffner •Larges et grosssier Fréquentes
m vivax e fréquentes
6. DIAGNOSTIC D’ESPECE Sur le frottis
Taille du GR Formes en Schizontes Gamétocytes
Pigmentation Trophozoites
parasité développements
•Fins
Tâches de •Polyparasitismes possible caractéristiqu
Plasmodiu Non Inhabituel
Maurer •Formes marginales e en Banane
hypertrophié
m (pH 7,2) •Double grains de
e
falciparum chromatines possibles
Frottis monomorphe
Granulations
Plasmodiu hypertrophié de Schüffner •Larges et grossier Fréquentes
m vivax e fréquentes
6. DIAGNOSTIC D’ESPECE Sur le frottis
Taille du GR Formes en Schizontes Gamétocytes
Pigmentation Trophozoites
parasité développements
•Fins
Tâches de •Polyparasitisme possible Caractéristi-
Plasmodiu Non Inhabituel
Maurer •Formes marginales que en
hypertrophié
m (pH 7,2) •Double grains de Banane
falciparum chromatines possibles
Frottis monomorphe
Granulations
Plasmodiu hypertrophié de Schüffner •Larges et grossier Fréquentes
m vivax fréquentes
hypertrophié, Granulations En marguerite
de Schüffner, •Larges
Plasmodiu hématie (P.malariae)
ovalisée, si présente, ms plus
m ovale bien
crénelée grossier
prononcées
Uniquement en Afrique
6. DIAGNOSTIC D’ESPECE Sur le frottis
Taille du GR Formes en Schizontes Gamétocytes
Pigmentation Trophozoites
parasité développements
•Fins
Tâches de •Polyparasitismes possible Caractéristi-
Plasmodiu Non Inhabituel
Maurer •Formes marginales que en
hypertrophié
m (pH 7,2) •Double grains de banane
falciparum chromatines possibles
Frottis monomorphe
Granulations
Plasmodiu hypertrophié de Schüffner •Larges et grossier Fréquentes
m vivax fréquentes
hypertrophié, Granulations En marguerite
de Schüffner, •Large
Plasmodiu hématie (P.malariae)
ovalisée, si présente, ms plus
m ovale bien
crénelée grossier
prononcées
Uniquement en Afrique
6. DIAGNOSTIC D’ESPECE Sur le frottis
Taille du GR Formes en Schizontes Gamétocytes
Pigmentation Trophozoites
parasité développements
•Fins
Tâches de •Polyparasitismes possible caractéristi-
Plasmodiu Non Inhabituel
Maurer •Formes marginales que en
hypertrophié
m (pH 7,2) •Double grains de Banane
falciparum chromatines possibles
Frottis monomorphe
Granulations
Plasmodiu hypertrophié de Schüffner •Larges et grossier Fréquentes
m vivax fréquentes
hypertrophié, Granulations En marguerite
de Schüffner, •Larges
Plasmodiu hématie (P.malariae)
ovalisée, si présente, ms plus
m ovale bien
crénelée grossier
prononcées
Uniquement en Afrique
•Carées
•Jusqu’en plaque
Plasmodiu Non
équatoriales En Marguerite
m malariae hypertrophié
•Grains de chromatines
e
parfois à la surface interne
des trophozoïtes
6. DIAGNOSTIC D’ESPECE Sur le frottis
Taille du GR Formes en Schizontes Gamétocytes
Pigmentation Trophozoites
parasité développements
•Fins
Tâches de •Polyparasitismes possible Caractéristi-
Plasmodiu Non Inhabituel
Maurer •Formes marginales que en
hypertrophié
m (pH 7,2) •Double grains de Banane
falciparum chromatines possibles
Frottis monomorphe
Granulations
Plasmodiu hypertrophié de Schüffner •Larges et grossier Fréquentes
m vivax fréquentes
hypertrophié, Granulations En marguerite
de Schüffner, •Larges
Plasmodiu hématie (P.malariae)
ovalisée, si présente, ms plus
m ovale bien
crénelée grossier
prononcées
Uniquement en Afrique
•Carées
•Jusqu’en plaque
Plasmodiu Non
équatoriales En Marguerite
m malariae hypertrophié
•Grains de chromatines
parfois à la surface interne
des trophozoïtes
Pf Pv
formes en anneau, formes marginales, trophozoïtes épais, hématies hypertrophiées.
hématies non hypertrophiées, aspect monomorphe
du frottis. Différents frottis
Po Pm
hématies hypertrophiées, formes ovalaires. trophozoïtes en bande équatoriale (ou en drapeau),
hématies non hypertrophiées.
Accès pernicieux
Schizontes de Plasmodium
falciparum
Plasmodium falciparum
Aspects de goutte
épaisse
Plasmodium vivax
Plasmodium malariae
Aspects de goutte
épaisse
Plasmodium
falciparum
