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Atena 1

O livro 'Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2' apresenta vinte capítulos que abordam temas relevantes nas áreas de Genética, Citogenética, Imunologia, Parasitologia, Química medicinal, Saúde pública e Ecologia. A obra é resultado de uma colaboração de diversos autores e foi submetida a avaliação cega por pares, garantindo a integridade e a qualidade acadêmica. A publicação é licenciada sob a Licença Creative Commons, permitindo o compartilhamento e download, desde que os créditos sejam atribuídos aos autores.
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Atena 1

O livro 'Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2' apresenta vinte capítulos que abordam temas relevantes nas áreas de Genética, Citogenética, Imunologia, Parasitologia, Química medicinal, Saúde pública e Ecologia. A obra é resultado de uma colaboração de diversos autores e foi submetida a avaliação cega por pares, garantindo a integridade e a qualidade acadêmica. A publicação é licenciada sob a Licença Creative Commons, permitindo o compartilhamento e download, desde que os créditos sejam atribuídos aos autores.
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Editora chefe

Profª Drª Antonella Carvalho de Oliveira


Editora executiva
Natalia Oliveira
Assistente editorial
Flávia Roberta Barão
Bibliotecária
Janaina Ramos
Projeto gráfico
Camila Alves de Cremo
Daphynny Pamplona
Gabriel Motomu Teshima 2022 by Atena Editora
Luiza Alves Batista Copyright © Atena Editora
Natália Sandrini de Azevedo Copyright do texto © 2022 Os autores
Imagens da capa Copyright da edição © 2022 Atena Editora
iStock Direitos para esta edição cedidos à Atena
Edição de arte Editora pelos autores.
Luiza Alves Batista Open access publication by Atena Editora

Todo o conteúdo deste livro está licenciado sob uma Licença de Atribuição
Creative Commons. Atribuição-Não-Comercial-NãoDerivativos 4.0
Internacional (CC BY-NC-ND 4.0).

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Conselho Editorial desta Editora, tendo sido aprovados para a publicação com base em critérios de
neutralidade e imparcialidade acadêmica.

A Atena Editora é comprometida em garantir a integridade editorial em todas as etapas do processo


de publicação, evitando plágio, dados ou resultados fraudulentos e impedindo que interesses
financeiros comprometam os padrões éticos da publicação. Situações suspeitas de má conduta
científica serão investigadas sob o mais alto padrão de rigor acadêmico e ético.

Conselho Editorial
Ciências Biológicas e da Saúde
Profª Drª Aline Silva da Fonte Santa Rosa de Oliveira – Hospital Federal de Bonsucesso
Profª Drª Ana Beatriz Duarte Vieira – Universidade de Brasília
Profª Drª Ana Paula Peron – Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Prof. Dr. André Ribeiro da Silva – Universidade de Brasília
Profª Drª Anelise Levay Murari – Universidade Federal de Pelotas
Prof. Dr. Benedito Rodrigues da Silva Neto – Universidade Federal de Goiás
Prof. Dr. Cirênio de Almeida Barbosa – Universidade Federal de Ouro Preto
Profª Drª Daniela Reis Joaquim de Freitas – Universidade Federal do Piauí
Profª Drª Débora Luana Ribeiro Pessoa – Universidade Federal do Maranhão
Prof. Dr. Douglas Siqueira de Almeida Chaves – Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
Prof. Dr. Edson da Silva – Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri
Profª Drª Elizabeth Cordeiro Fernandes – Faculdade Integrada Medicina
Profª Drª Eleuza Rodrigues Machado – Faculdade Anhanguera de Brasília
Profª Drª Elane Schwinden Prudêncio – Universidade Federal de Santa Catarina
Profª Drª Eysler Gonçalves Maia Brasil – Universidade da Integração Internacional da Lusofonia Afro-Brasileira
Prof. Dr. Ferlando Lima Santos – Universidade Federal do Recôncavo da Bahia
Profª Drª Fernanda Miguel de Andrade – Universidade Federal de Pernambuco
Prof. Dr. Fernando Mendes – Instituto Politécnico de Coimbra – Escola Superior de Saúde de Coimbra
Profª Drª Gabriela Vieira do Amaral – Universidade de Vassouras
Prof. Dr. Gianfábio Pimentel Franco – Universidade Federal de Santa Maria
Prof. Dr. Helio Franklin Rodrigues de Almeida – Universidade Federal de Rondônia
Profª Drª Iara Lúcia Tescarollo – Universidade São Francisco
Prof. Dr. Igor Luiz Vieira de Lima Santos – Universidade Federal de Campina Grande
Prof. Dr. Jefferson Thiago Souza – Universidade Estadual do Ceará
Prof. Dr. Jesus Rodrigues Lemos – Universidade Federal do Piauí
Prof. Dr. Jônatas de França Barros – Universidade Federal do Rio Grande do Norte
Prof. Dr. José Aderval Aragão – Universidade Federal de Sergipe
Prof. Dr. José Max Barbosa de Oliveira Junior – Universidade Federal do Oeste do Pará
Profª Drª Juliana Santana de Curcio – Universidade Federal de Goiás
Profª Drª Lívia do Carmo Silva – Universidade Federal de Goiás
Prof. Dr. Luís Paulo Souza e Souza – Universidade Federal do Amazonas
Profª Drª Magnólia de Araújo Campos – Universidade Federal de Campina Grande
Prof. Dr. Marcus Fernando da Silva Praxedes – Universidade Federal do Recôncavo da Bahia
Profª Drª Maria Tatiane Gonçalves Sá – Universidade do Estado do Pará
Prof. Dr. Maurilio Antonio Varavallo – Universidade Federal do Tocantins
Profª Drª Mylena Andréa Oliveira Torres – Universidade Ceuma
Profª Drª Natiéli Piovesan – Instituto Federacl do Rio Grande do Norte
Prof. Dr. Paulo Inada – Universidade Estadual de Maringá
Prof. Dr. Rafael Henrique Silva – Hospital Universitário da Universidade Federal da Grande Dourados
Profª Drª Regiane Luz Carvalho – Centro Universitário das Faculdades Associadas de Ensino
Profª Drª Renata Mendes de Freitas – Universidade Federal de Juiz de Fora
Profª Drª Sheyla Mara Silva de Oliveira – Universidade do Estado do Pará
Profª Drª Suely Lopes de Azevedo – Universidade Federal Fluminense
Profª Drª Vanessa da Fontoura Custódio Monteiro – Universidade do Vale do Sapucaí
Profª Drª Vanessa Lima Gonçalves – Universidade Estadual de Ponta Grossa
Profª Drª Vanessa Bordin Viera – Universidade Federal de Campina Grande
Profª Drª Welma Emidio da Silva – Universidade Federal Rural de Pernambuco
Ciências biológicas: gênese na formação multidisciplinar 2

Diagramação: Camila Alves de Cremo


Correção: Yaiddy Paola Martinez
Indexação: Amanda Kelly da Costa Veiga
Revisão: Os autores
Organizadora: Alana Maria Cerqueira de Oliveira

Dados Internacionais de Catalogação na Publicação (CIP)

C569 Ciências biológicas: gênese na formação multidisciplinar 2 /


Organizadora Alana Maria Cerqueira de Oliveira. –
Ponta Grossa - PR: Atena, 2022.

Formato: PDF
Requisitos de sistema: Adobe Acrobat Reader
Modo de acesso: World Wide Web
Inclui bibliografia
ISBN 978-65-5983-841-7
DOI: https://doi.org/10.22533/at.ed.417221701

1. Ciências biológicas. I. Oliveira, Alana Maria Cerqueira


de (Organizadora). II. Título.
CDD 570
Elaborado por Bibliotecária Janaina Ramos – CRB-8/9166

Atena Editora
Ponta Grossa – Paraná – Brasil
Telefone: +55 (42) 3323-5493
www.atenaeditora.com.br
[email protected]
DECLARAÇÃO DOS AUTORES

Os autores desta obra: 1. Atestam não possuir qualquer interesse comercial que constitua um conflito
de interesses em relação ao artigo científico publicado; 2. Declaram que participaram ativamente da
construção dos respectivos manuscritos, preferencialmente na: a) Concepção do estudo, e/ou
aquisição de dados, e/ou análise e interpretação de dados; b) Elaboração do artigo ou revisão com
vistas a tornar o material intelectualmente relevante; c) Aprovação final do manuscrito para
submissão.; 3. Certificam que os artigos científicos publicados estão completamente isentos de dados
e/ou resultados fraudulentos; 4. Confirmam a citação e a referência correta de todos os dados e de
interpretações de dados de outras pesquisas; 5. Reconhecem terem informado todas as fontes de
financiamento recebidas para a consecução da pesquisa; 6. Autorizam a edição da obra, que incluem
os registros de ficha catalográfica, ISBN, DOI e demais indexadores, projeto visual e criação de capa,
diagramação de miolo, assim como lançamento e divulgação da mesma conforme critérios da Atena
Editora.
DECLARAÇÃO DA EDITORA

A Atena Editora declara, para os devidos fins de direito, que: 1. A presente publicação constitui apenas
transferência temporária dos direitos autorais, direito sobre a publicação, inclusive não constitui
responsabilidade solidária na criação dos manuscritos publicados, nos termos previstos na Lei sobre
direitos autorais (Lei 9610/98), no art. 184 do Código Penal e no art. 927 do Código Civil; 2. Autoriza
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está isenta de repasses de direitos autorais aos autores; 4. Todos os membros do conselho editorial
são doutores e vinculados a instituições de ensino superior públicas, conforme recomendação da
CAPES para obtenção do Qualis livro; 5. Não cede, comercializa ou autoriza a utilização dos nomes e
e-mails dos autores, bem como nenhum outro dado dos mesmos, para qualquer finalidade que não o
escopo da divulgação desta obra.
APRESENTAÇÃO

O Livro “Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2”, traz ao leitor


vinte capítulos de relevada importância na área de Genética, Citogenética, Imunologia,
Parasitologia, Química medicinal, Saúde pública e Ecologia. Entretanto, caracteriza-se
como uma obra multidisciplinar que engloba diversas áreas da Ciências biológicas.
Os capítulos estão distribuídos em temáticas que abordam de forma categorizada e
multidisciplinar a Ciências biológicas , as pesquisas englobam estudos de: mapeamentos
genético, citogenético, sequenciamento, genética e educação ,análises forenses , doenças
genética, eugenesia clássica, engenharia genética, análise por PCR, cultura de células de
linfoma e leucemia, saúde mental, resposta imune, vacinação contra a covid-19, vírus
Sars-Cov-2, métodos de extração de lipídios ,levantamento taxonômico, morfologia vegetal,

espectroscopia de infravermelho (IV) e espectrometria de massas (EM), problemática


ambiental e de saúde pública, poluentes emergentes e biodiesel.

e estudantes pertencentes às áreas de Ciências biológicas e Ciências da Saúde e suas

alguma forma se interessam pela área.

de maneira clara e efetiva, em português, inglês ou espanhol. Utilizando uma linguagem


acessível, concisa e didática, atraindo a atenção do leitor, independente se seu interesse é

O livro Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2”, traz publicações


atuais e a Atena Editora traz uma plataforma que oferece uma estrutura adequada, propícia

Alana Maria Cerqueira de Oliveira


SUMÁRIO
CAPÍTULO 1 ................................................................................................................. 1
LA ERRADICACIÓN DE LAS ENFERMEDADES GENÉTICAS: DE LA EUGENESIA
CLÁSICA A LA INGENIERÍA GENÉTICA
Alejandro Gordillo-García
María del Carmen García Rodríguez
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 2 ...............................................................................................................14
MAPEAMENTOS GENÉTICO, CITOGENÉTICO E DE SEQUENCIAMENTO DO FEIJÃO-
FAVA: UMA REVISÃO
André Oliveira Melo
Marcones Ferreira Costa
Michelli Ferreira dos Santos
Verônica Brito da Silva
Maria Fernanda da Costa Gomes
Gleice Ribeiro Orasmo
Lidiane de Lima Feitoza
Lívia do Vale Martins
Raimundo Nonato Oliveira Silva
Ângela Celis de Almeida Lopes
Regina Lucia Ferreira Gomes
Sérgio Emílio dos Santos Valente
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 3 ...............................................................................................................34
GENETICS AND EDUCATION: OVER 50 YEARS GENERATING COLLABORATIONS,
BUILDING BRIDGES AND WEAVING NETWORKS IN ENDLESSLY TURBULENT
SCENARIOS
Alberto Sergio Fenocchio
Verónica Graciela Teza
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 4 ...............................................................................................................38
DROGAS MAIS CONSUMIDAS NO BRASIL E SUA RELAÇÃO EM CRIMES CONTRA
O INDIVÍDUO: COMO UM TESTE RÁPIDO AJUDARIA EM CASOS DE PRISÃO EM
FLAGRANTE
Águida Maiara de Brito
Lustarllone Bento de Oliveira
Melissa Cardoso Deuner
Felipe Monteiro Lima
Joselita Brandão de Sant’Anna
Jackson Henrique Emmanuel de Santana
José Vanderli da Silva
Caio César dos Santos Mognatti
Juliana Paiva Lins

SUMÁRIO
Jéssica dos Santos Folha
Bruno Henrique Dias Gomes
Erica Carine Campos Caldas Rosa
Marcela Gomes Rola
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 5 ...............................................................................................................54
IMPLICAÇÕES DA VACINAÇÃO CONTRA A COVID-19 EM GESTANTES E PUÉRPERAS
EM CONTEXTO PANDÊMICO: UMA REVISÃO DE LITERATURA
Ana Luíza Moraes Oliveira
Jéssica de Moutta Gomes
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 6 ...............................................................................................................66
EFEITO DO BIOFILME DE Arthrographis kalrae NA RESPOSTA IMUNE DE MACRÓFAGOS
INFECTADOS
Bianca Dorana de Oliveira Souza

Bruno Fernando Cruz Lucchetti


Phileno Pinge Filho
Mario Augusto Ono
Ayako Sano
Luciene Airy Nagashima
Adriane Lenhard-Vidal
Franciele Ayumi Semêncio Chiyoda-Rodini
Eiko Nakagawa Itano
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 7 ...............................................................................................................76
POTENTIAL OF Saccharomyces cerevisiae IN Fusarium graminearum ANTIBIOSIS AND
ZEARALENONE DETOXIFICATION
Andressa Jacqueline de Oliveira
Mario Augusto Ono
Melissa Tiemi Hirozawa
Jaqueline Gozzi Bordini
Claudemir Zucareli
Elisabete Yurie Sataque Ono
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 8 ...............................................................................................................93
BIOLOGICAL EVALUATION OF A THERAPEUTIC DEVICE THAT IS BASED IN PULSED-
ELECTROMAGNETIC FIELDS AND STATIC MAGNETIC FIELDS ON A MURINE MODEL
Abraham O. Rodríguez-De la Fuente
José Antonio Heredia-Rojas
Pilar Carranza-Rosales
Omar Heredia-Rodríguez
Gerardo Lozano-Garza

SUMÁRIO
Angel Zavala-Pompa
Pedro Antonio Noguera-Díaz
José Alberto Valadez-Lira
Ricardo Gómez-Flores
Pedro César Cantú-Martínez

https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 9 .............................................................................................................107
SÍNTESE, CARACTERIZAÇÃO E ATIVIDADE BIOLÓGICA DO DERIVADO
TIAZACRIDÍNICO LPSF/AA-57
Marcel Lucas de Almeida
Valécia de Cassia Mendonça da Costa
Michelly Cristiny Pereira
Ivan da Rocha Pitta
Marina Galdino da Rocha Pitta
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 10........................................................................................................... 114


CONCEPÇÃO DE CLÍNICA AMPLIADA E OS DESAFIOS DAS PRÁTICAS EM SAÚDE
MENTAL NA ATUALIDADE
Celian Araújo da Nóbrega Souza
Carmen Silva Alves
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 11 ...........................................................................................................127
MADUREZ SEXUAL Y ESPECTRO TRÓFICO DE Pterois volitans (Linnaeus, 1758) EN EL
PARQUE NACIONAL SISTEMA ARRECIFAL VERACRUZANO, MÉXICO
Emmanuel Velasco-Villalobos
Elizabeth Valero-Pacheco
Luis Gerardo Abarca-Arenas
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 12...........................................................................................................139
POTENCIAL EVOCADO AUDITIVO DE LONGA LATÊNCIA: MONITORAMENTO DE
EFICÁCIA DA INTERVENÇÃO FONOAUDIOLÓGICA EM ESCOLARES COM DISLEXIA
Ana Luiza de Faria Luiz
Yara Bagali Alcântara
Brena Elisa Lucas
Carolina Almeida Vieira
Simone Aparecida Capellini

https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 13...........................................................................................................149
COMPARAÇÃO DE MÉTODOS DE EXTRAÇÃO DE LIPÍDIOS DA MICROALGA

SUMÁRIO
Scenedesmus sp.
Alana Ramos Nobre
Karollyna Menezes Silva
Keilla Santos Cerqueira
Jacqueline Rego da Silva Rodrigues
Roberto Rodrigues de Saouza
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 14...........................................................................................................164
EFFECT OF LACTIC ACID BACTERIA ON Fusarium verticillioides GROWTH AND
FUMONISIN B1 DETOXIFICATION
Melissa Tiemi Hirozawa
Mario Augusto Ono
Sandra Garcia
Jaqueline Gozzi Bordini
Andressa Jacqueline de Oliveira
Elisa Yoko Hirooka
Elisabete Yurie Sataque Ono
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 15...........................................................................................................183
PARÂMETROS REPRODUTIVOS EM ESPÉCIES NEOTROPICAIS DE Drosophila
(DIPTERA; DROSOPHILIDAE)
Lorenna Tayrini de Oliveira da Silva
Silvana Aparecida Beira
Camila Heloise dos Santos
Janaina Cosmedamiana Metinoski Bueno
Natana Maria Metinoski Bueno
Rogério Pincela Mateus
Luciana Paes de Barros Machado
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 16...........................................................................................................207
BENZOFENONA E OCTOCRILENO COMO POLUENTES EMERGENTES: UMA
PROBLEMÁTICA AMBIENTAL E DE SAÚDE PÚBLICA
Diego Espirito Santo
Andrielle Karine Ribeiro Mendes
Débora Cristina de Souza

Ana Paula Peron


https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 17...........................................................................................................228
MORFOLOGIA VEGETAL: UMA ABORDAGEM PALINOLOGICA DE HIBISCUS ROSA-
SINENSIS L.
João Marcos Gomes Leite
Maristela Tavares Gonçalves

SUMÁRIO
Alessandro Oliveira Silva
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 18...........................................................................................................236
CONSIDERAÇÕES SOBRE O FITOPLÂNCTON DO SUBMÉDIO RIO SÃO FRANCISCO:
GRUPOS FUNCIONAIS DE REYNOLDS (GFR) E IMPLICAÇÕES PARA OS MÚLTIPLOS
USOS DA ÁGUA
Vladimir de Sales Nunes

Caio Carvalho Novais de Moraes


Bruno Cézar Silva
René Geraldo Cordeiro Silva Júnior
Edson Gomes de Moura Júnior
Ludwig Lima Nunes
Carlos Vinícius da Silva Cabral
Angélica Barbosa Jericó
Nadiane Nunes da Silva
Gabriel Luiz Celante da Silva
Benoit Jean Bernard Jahyny
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 19...........................................................................................................251
AVALIAÇÃO DE MISTURAS TERNÁRIAS DIESEL-BIODIESEL-ETANOL PARA
APLICAÇÃO COMO COMBUSTÍVEL EM MOTORES DE CICLO DIESEL
Guilherme Brandão Guerra
Gisel Chenard Díaz
Yordanka Reyes Cruz
Vinicius Rossa
Donato Alexandre Gomes Aranda
Rene Gonzalez Carliz
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 20...........................................................................................................265
EFICIÊNCIA DE INSETICIDAS EM TRATAMENTO DE SEMENTES DE FEIJOEIRO NO
DESENVOLVIMENTO INICIAL
Stella Mendes Pio Oliveira
Guilherme Mendes Pio Oliveira
Luana Ranieri Massucato
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 21...........................................................................................................277
ANÁLISE DA APLICAÇÃO DO JOGO DIDÁTICO “ECOLOGIA NO LABIRINTO” PARA OS
ALUNOS DO ENSINO MÉDIO
Milena Resende Nascimento
Mariana Fideles Ferreira
Francielly Felix da Silva Isaias
Mayra Luzia da Cruz e Souza

SUMÁRIO
Frederico Miranda
Polyanna Miranda Alves
Polyane Ribeiro Machado
https://doi.org/10.22533/at.ed.

CAPÍTULO 22...........................................................................................................281
AVALIAÇÃO DAS ALTERAÇÕES HEMATOLÓGICAS EM INDIVÍDUOS COM
TALASSEMIAS ALFA E BETA E CORRELAÇÃO COM A INCIDÊNCIA NO MUNICÍPIO DE
ASSIS E REGIÃO
Julia Amanda Rodrigues Fracasso
Luiz Fernando Moraes-Silva
Guilherme de Oliveira-Paes
Luisa Taynara Silvério da Costa
Maria José Malagutti-Ferreira
Lucinéia dos Santos
Renata Aparecida de Camargo Bittencourt
https://doi.org/10.22533/at.ed.

SOBRE A ORGANIZADORA...................................................................................295

ÍNDICE REMISSIVO .................................................................................................296

SUMÁRIO
CAPÍTULO 1
LA ERRADICACIÓN DE LAS ENFERMEDADES
GENÉTICAS: DE LA EUGENESIA CLÁSICA A LA
INGENIERÍA GENÉTICA

Data de aceite: 10/01/2022


Data de submissão: 29/09/2021

THE ERADICATION OF GENETIC


DISEASES: FROM CLASSICAL
Alejandro Gordillo-García EUGENICS TO GENETIC ENGINEERING
Center for Logic and Philosophy of Science ABSTRACT: This essay offers a historical,
Institute of Philosophy, KU Leuven, Belgium

María del Carmen García Rodríguez


Laboratorio de Antimutagénesis,
of the historical antecedents of eugenics: the
Anticarcinogénesis y Antiteratogénesis
“selective infanticides” carried out in Ancient
Ambiental
Sparta and “selective breeding” proposed by
Facultad de Estudios Superiores “Zaragoza”,
UNAM, CDMX, México Plato. Subsequently, the history of classical
ORCID 0000-0001-5970-0835
eradicate genetic diseases emphasizing the

humanity committed. Finally, the most recent


RESUMEN: En el presente ensayo se muestra achievements in genetic engineering and their
potential to eradicate genetic diseases in the not-
del interés de la humanidad por erradicar las
enfermedades genéticas. Se inicia con una philosophical and social implications.
descripción de los antecedentes históricos de la KEYWORDS: Genetic diseases; Classical
eugenesia: “infanticidios selectivos” realizados eugenics; Genetic engineering; Philosophical
en la Antigua Esparta y la “crianza selectiva” and social implications.
propuesta por Platón. Posteriormente, se
presenta la historia de la eugenesia clásica como
el primer intento de erradicar las enfermedades INTRODUCCIÓN
En todo el mundo, miles de estudiantes
abusos y crímenes a la humanidad cometidos.
de genética se gradúan cada año. Nuevos
Finalmente, se discuten los más recientes
avances en ingeniería genética y su potencial laboratorios de investigación son abiertos
para erradicar las enfermedades genéticas en el regularmente en universidades, hospitales,
futuro no muy lejano, así como sus implicaciones clínicas y empresas privadas. Las patentes
en genómica y genética van en aumento, así
PALABRAS-CLAVE: Enfermedades genéticas;
Eugenesia clásica; Ingeniería genética;
relevantes en estas áreas. La demanda de

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 1


genetistas en el mercado laboral jamás había sido tan buena, quienes generalmente
ejercen como investigadores, profesores, laboratoristas, ingenieros, consultores e incluso
abogados. En efecto, la genética es una ciencia en pleno crecimiento que está adquiriendo

tendencia vaya a desacelerar, el siglo XXI es un prospecto para convertirse en el “Siglo de


la Genética.”

momento apartaran la vista del ocular del microscopio, que apagaran las centrifugas, los
secuenciadores de DNA y los termocicladores (máquinas de PCR; reacción en cadena de
polimerasa, por sus siglas en inglés). Si les pidiéramos que solo por un instante dejaran de

área de genética, seguramente nos dirán que, además de percibir un salario, trabajan en esta
área porque quieren mejorar la salud humana. Y es que en la actualidad se tiene registro de
miles de enfermedades monogénicas.1 Así mismo, de acuerdo con la Organización Mundial
de la Salud, afectaciones asociadas a alteraciones en múltiples loci en el genoma, llamadas
enfermedades poligénicas, como la cardiopatía isquémica (bloqueo o reducción de las
arterias coronarias) y los infartos fulminantes (repentina perdida de funciones neurológicas)
encabezaron la lista de causas de muerte del 2000 al 2019.2 La estructura o el número de
cromosomas de un recién nacido también puede ser anormal (mutaciones cromosómicas).

complicaciones particulares en el desarrollo físico y mental).


¿Cómo puede ayudar un genetista a combatir las enfermedades y condiciones
genéticas? En primer lugar, es importante poder detectarlas lo más pronto posible mediante
estudios que permitan obtener diagnósticos genéticos en cualquier etapa de la vida
(incluidas la pre-natal y pos-natal). En este ámbito, las tecnologías de diagnóstico genético
han progresado enormemente en las últimas décadas. Actualmente, existen miles de
exámenes genéticos en uso y se están desarrollando aún más. No obstante, diagnosticar
una enfermedad sería una actividad médica fútil si no se desarrollaran a la par tratamientos

enfermedades genéticas partiendo


desde los “infanticidios selectivos” realizados en la Antigua Esparta hasta el actual uso de
la biotecnología en procedimientos de terapia génica.

ANTECEDENTES HISTÓRICOS: LA ANTIGÜEDAD


Los registros históricos y antropológicos muestran que en la Antigua Esparta (650 a.
C.), famosa por su ejército poderoso y sanguinario, se llevaba a cabo lo que hoy se denomina
“infanticidio selectivo.” Obviamente, los espartanos no sabían de genes, ni de mutaciones,
ni de leyes de la herencia. No sabían por qué algunos bebes nacían con deformidades en

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 2


que estos individuos eran diferentes, y consideraron que sus condiciones representaban
una discapacidad: jamás se desarrollarían como verdaderos espartanos y representarían
una carga para el Estado. Su solución fue arrojar a los bebés y niños con enfermedades o
condiciones congénitas por un acantilado hacia su muerte segura.3 Esta práctica, guiada
por motivos más socioculturales que de salud pública, aseguraba que los individuos con
genes defectuosos no contribuyeran genéticamente a las siguientes generaciones. Desde
luego, no se puede pasar por alto lo innecesariamente cruel que es practicar el “infanticidio
selectivo” para erradicar las enfermedades hereditarias.
Otra referencia histórica sobre la erradicación de las enfermedades hereditarias
en la Antigüedad la encontramos en la obra La Republica (370 a.C.), escrita por Platón
en forma de dialogo en donde se discute la “crianza selectiva.” El personaje Sócrates
cuestiona a Glaucón sobre sus aves y perros: “¿Y entonces haces que nazcan crías de
todos por igual o te esfuerzas para que nazcan especialmente los mejores?... ¿Y si no es
así como nacen, consideras que la raza de tus aves y de tus perros será mucho peor?”,

muy bueno hacer lo mismo con seres humanos.4 Aunque el “infanticidio selectivo” de los
Espartanos y la “crianza selectiva” en humanos propuesta por Platón pertenecen a la
Antigüedad, no podemos negar que nos resultan perturbadoramente familiares. En efecto,
son dos ejemplos de lo que hoy conocemos como “eugenesia.” En pocas palabras, como se
explicará a continuación, la eugenesia se basa en la idea de que la especie humana puede

disponibles racionalmente para guiar nuestra propia evolución.

EUGENESIA CLÁSICA: EL PRIMER INTENTO DE ERRADICAR LAS


ENFERMEDADES GENÉTICAS
La historia de la

seres vivos se encuentran en una “lucha por la existencia” ya que la cantidad de recursos
necesarios para la supervivencia y reproducción son proporcionalmente menores a la

billones de años de vida en este planeta han sido de incesante competencia, en la cual
siempre algunos han salido victoriosos logrando sobrevivir para reproducirse mientras que
los demás han perecido necesariamente. Nosotros, por ejemplo, somos los descendientes
directos de los ganadores en la lucha por la existencia reciente entre especies del género
Homo (lucha que perdió el Homo neanderthalensis, Homo erectus y ).
Pero es importante tomar en cuenta que nada asegura que seamos la ascendencia de
los próximos pobladores de la Tierra, lo que lleva a preguntarse por qué algunos ganan

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 3


que el nivel de adaptabilidad a las condiciones locales de vida puede variar de individuo
a individuo y de especia a especie. Aunque en su época el conocimiento de genética era

con variaciones en sus rasgos corporales, mentales e incluso de comportamiento. Esto


no es sorpresa, pues, así como nosotros no somos idénticos a nuestros padres, “nadie
supone que todos los individuos de la misma especie estén fundidos absolutamente en
el mismo molde.”5 Ahora, en el contexto correcto, algunas de estas variaciones pueden
representar una valiosa ventaja en la “lucha por la existencia.” Un cuello de jirafa más largo
para alcanzar el follaje, una toxina más mortífera de un pino para eliminar nematodos,
un comportamiento social más desarrollado en humanos para forjar grupos fuertes son

de este modo tendrán seguramente las mayores probabilidades de conservarse en la lucha


por la vida y, por el poderoso principio de herencia, tenderán a producir descendientes
con caracteres semejantes. A este principio de conservación o supervivencia de los más
adecuados lo he llamado selección natural.”5

algunos no pudieron evitar señalar que aún estaba inconcluso pues excluyó el tema de
la selección natural en humanos y la posibilidad de guiar racionalmente nuestra propia
evolución. Fue su primo Francis Galton quien se encargaría de abordar este tema. Galton

aún, cuando leyó la teoría de su primo consideró que comprender el proceso de evolución

los más aptos de nuestra especie al igual que el decremento de la reproducción de los
menos aptos. Denominó “eugenesia” (del griego eu: buen, y genos: origen o nacimiento) a

prima de una raza y también aquellas que la pueden desarrollar hasta alcanzar la máxima
superioridad.”6
La primera gran victoria pública de Galton fue su descubrimiento de que, además
de los rasgos físicos, los rasgos mentales como la inteligencia y la personalidad también
son heredables. Su enfoque fue el análisis estadístico de cientos de genealogías familiares

descubrió fue que las personas con alta inteligencia y rasgos de personalidad particulares
(e.g., talento, moralidad, honestidad, responsabilidad social) tienden a tener hijos y nietos
con estos mismos rasgos. Por lo tanto, pensó Galton, lo que verdaderamente determina
nuestro destino es lo que heredamos biológicamente de nuestros padres y no las
circunstancias ambientales y sociales, como el nivel de educación o estatus económico, en
las que nos desarrollamos. El trabajo de Galton sentó el precedente y marcó la dirección
de las discusiones sobre eugenesia que se darían en las próximas décadas. De acuerdo

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 4


pueden ser manipuladas y moldeadas a nuestra conveniencia: “si una veinteava parte de
los costes y esfuerzos que se invierten en mejorar la cría de caballos y ganado se invirtiera
en medidas para la mejora de la raza humana, ¡qué galaxia de genios podríamos crear!”7

algunos puntos importantes. En primer lugar, al igual que muchos otros pensadores de
su tiempo, Galton consideró que las sociedades humanas estaban pasando por un grave
momento de deterioro genético, particularmente en las naciones industrializadas. Muchos
estudios indicaban que el estrato social menos favorecido, que incluye a los aquejados por
enfermedades genéticas, los pobres y los alcohólicos, tendían a multiplicarse más que los
favorecidos,8 lo que eventualmente podría llevar al deterioro de la sociedad (a este proceso
se le conoce como “disgenesia”). Galton buscaba mejorar la salud humana, la inteligencia y
el carácter moral mediante el aumento de “matrimonios eugenésicos,” es decir, matrimonio
entre individuos aptos. Propuso que esto se lograría educando al público en general sobre
la importancia de la eugenesia para que así puedan tomar decisiones informadas sobre su
reproducción. A este tipo de eugenesia se le llama “eugenesia positiva” ya que su objetivo
es aumentar los buenos rasgos en la población. En contraste, la “eugenesia negativa”
busca eliminar los rasgos inferiores.
eugenesia ya era un tema del dominio
público en Inglaterra y otros países. En 1907 se formó la Eugenics Education Society, la

pública sobre la importancia de los ideales eugenésicos, enseñar las leyes de la herencia
y “promover la enseñanza eugenésica, en el hogar, en las escuelas y en otros lugares.”9

economista John Maynard Keynes, el escritor H. G. Wells, la activista Marie Stopes, entre
eugenesia como el Annals of Eugenics, The
Eugenics Review y Biometrika adquirieron una gran prominencia y difusión. Todos estos
esfuerzos por parte de los eugenistas tuvieron sus frutos en 1913 cuando el Parlamento
inglés aprobó la primera ley eugenésica conocida como y los
británicos celebraban el nacimiento de quien consideraron la primera “bebe eugénica”
llamada Eugenette Bolce.
Mientras tanto, la eugenesia comenzaba a insinuarse en las corrientes intelectuales,
programas médicos y proyectos políticos de muchos otros países incluyendo Japón,
Noruega, Canadá, Brasil y México.10 Sin embargo, dos países requieren nuestra particular
atención pues destacaron por la extensión e idiosincrasias de sus programas eugenésicos:
Estados Unidos y la Alemania Nazi. Si bien la eugenesia británica se basaba en la estadística
y la biometría, en Estados Unidos fue el redescubrimiento del trabajo de Gregor Mendel lo
que dio un fuerte impulso a la eugenesia en ese país. A partir de miles de experimentos de
cruzamiento con chicharos, Mendel dedujo sus cuatro principios de la herencia: factores

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 5


en pareja, dominancia/recesividad, segregación al azar y transmisión independendiente.11
Mediante estos principios, Mendel predecía con gran exactitud las probabilidades de la
herencia de ciertos “factores hereditarios” (hoy llamados “genes”) de la planta Pisum
sativum
herencia de ciertos rasgos y enfermedades humanas como la alcaptonuria demostraron
que las leyes Mendelianas también operan en nuestra especie.12 Sin embargo, aún no

sobre el mecanismo molecular de la herencia, lo que permitió que varios investigadores


comenzaran a especular al respecto y exagerar libremente la herencia Mendeliana. Charles
Davenport fue el líder de la eugenesia en Estados Unidos. Llevó a cabo numerosos estudios
de árboles genealógicos que miles de familias enviaban por correspondencia a su Eugenics
en forma de cuestionarios, records de su historial médico y descripciones
personales. Cuando Davenport descubría algún rasgo recurrente en una familia, asumía
que éste era heredado por leyes Mendelianas. Así, aseguró sin mayor evidencia que la
criminalidad, la debilidad mental (hoy llamada discapacidad intelectual), el alcoholismo, el
pauperismo, la demencia, la prostitución, el nomadismo y el amor por el mar son rasgos
que se pasan a la descendencia por herencia Mendeliana.13 Estos resultados convencieron

la sobre-fertilidad de los defectuosos mentales y físicos.”14 En 1907, el estado de Indiana


aprobó la primera ley que estipulaba la esterilización obligatoria a criminales, débiles
mentales y violadores. La ley se popularizó rápidamente en el resto del país y más de
60,000 personas fueron esterilizadas.
La eugenesia negativa de Estados Unidos fue ampliamente admirada por los Nazis,
quienes enviaban comisionados a ese país para observar el desarrollo de sus programas
e importar ideas. Sin embargo, los Nazis fueron más allá e incluyeron en sus programas
eugenésicos la eutanasia (muerte intencionada a enfermos) y campos de concentración,
además de prohibir ciertos matrimonios, controlar estrictamente la inmigración y aplicar la
esterilización obligatoria. Bajo el liderazgo de Adolf Hitler, los Nazis se vieron a sí mismos,
la raza Aria, en una “lucha por la existencia.” Los individuos inferiores que vivían una
Lebensunwerten lebens (vida que no vale la pena ser vivida), como los aquejados por
enfermedades y condiciones genéticas, los gitanos, los judíos, los homosexuales, entre
otros, debían de ser extirpados de la sociedad en lo que denominaron una “higiene racial.”15
Como resultado, se estima que los programas eugenésicos Nazis esterilizaron entre
300,000 a 400,000 personas y exterminaron alrededor de 6,000,000 de judíos, 250,000
enfermos, más de 200,000 gitanos, 70,000 criminales y otros miles de homosexuales.16
El abuso de los Nazis, y de los demás países que igualmente implementaron medidas
eugenésicas, atestigua lo fácil que la ciencia puede ser malinterpretada y distorsionada

mitad del siglo XX, la eugenesia clásica perdió credibilidad y cayó en desgracia después

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 6


de que el mundo se enterara de los horrores del Nazismo. La que una vez fue considerada
la ciencia más importante del momento para garantizar el progreso de la humanidad, pasó
a ser mundialmente repudiada. Las leyes eugenésicas en los distintos países se fueron
anulando de manera paulatina. La mayoría de los institutos, sociedades y clínicas que se
habían dedicado al estudio y difusión de la eugenesia se desintegraron en su totalidad
incluyendo la de Davenport en Estados Unidos y los centros Nazis.

ejemplo, la Eugenics Education Society de Inglaterra cambió su nombre a Galton Institution


y su objetivo ahora es: “estimular e informar el debate público sobre la herencia humana y
las preguntas asociadas, y buscar promover la participación pública y la comunicación de
estos temas.”17 Así mismo, las revistas sobre eugenesia tuvieron que reinventarse como el
Annals of Eugenics, llamada ahora Annals of Human Genetics.

EUGENESIA EN EL SIGLO XXI: INGENIERÍA GENÉTICA Y LA ERRADICACIÓN


DE LAS ENFERMEDADES GENÉTICAS
Durante la segunda mitad del siglo XX se realizaron los descubrimientos más
fundamentales en el área de genética, incluyendo la estructura del DNA, el código genético,
el RNA mensajero, entre otros.18 Sin embargo, fue en la década de los 70s cuando se
descubrió la manera de editar el genoma de los seres vivos, lo cual cambiaría para siempre
nuestra visión y relación con el mundo natural: A partir de ese momento, la evolución
genética se volvió un proceso molecular directamente manipulable.19 Los genetistas Stanley
Cohen y Herbert Boyer desarrollaron la tecnología de DNA recombinante, la cual permite
la transferencia de genes entre distintos individuos de distintas especies. Su experimentó
consistió en cortar fragmentos de DNA (factor R de una bacteria responsable de resistencia

e introducirlos en un plásmido usando endonucleasas y ligasas de bacterias E. coli.20


El resultado fue trascendental: las E. coli
siguientes generaciones el fragmento de DNA introducido. Nació la ingeniería genética.

pronto surgió la industria biotecnológica. Las primeras empresas fueron “Cetus Corporation”
y “Genentech”. En 1978, comenzó a comercializarse la primera proteína biosintética
humana: insulina obtenida mediante la recombinación del DNA con el uso de bacilos E. coli
por introducción del código genético de la proinsulina humana.

genoma humano podría erradicar las enfermedades hereditarias. Es decir, no solo mitigar los
síntomas y mejorar la calidad de vida de los pacientes, sino eliminar del acervo genético de
la humanidad las mutaciones causantes de dichas enfermedades y condiciones genéticas
mediante técnicas de edición del genoma. Aunque en el siglo XX los avances en genética
médica fueron relativamente lentos debido a la falta de conocimiento sobre genómica y

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 7


ediciones genéticas exactas, en el siglo XXI, nuestro siglo, el panorama ha cambiado
radicalmente. En el 2001 se anunció la secuenciación del genoma humano, y en el 2002 se
inicio el proyecto HapMap que consiste en determinar los patrones comunes de variación
de la secuencia de DNA en el genoma humano.21,22 Conocer exactamente el orden y la

causantes de enfermedades genéticas y poder desarrollar curas. No obstante, también se

poligenéticas y las interacciones genoma/ambiente, los cuales son los objetivos de los
proyectos Proteoma, Transcriptoma y Epigenoma Humano.23,24
Por otra parte, el hallazgo de las repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y
regularmente interespaciadas (en inglés Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic
Repeats, CRISPR) ha sido de gran trascendencia para la ingeniería genética. En 1987
se publicó un artículo en el cual se describía cómo algunas bacterias (Streptococcus
pyogenes) se defendían de las infecciones víricas mediante enzimas capaces de distinguir
entre su material genético y el del virus.25 Al mapear los genomas de algunas bacterias se
encontraron separadas por «espaciadores» repeticiones palindrómicas de DNA (que se
leen igual al derecho y al revés) sin ninguna función aparente, pero parecidas a secuencias
presentes en virus y plásmidos.26 A estas secuencias se les llamó CRISPR. Cuando un virus
infecta a una bacteria, toma el control de la maquinaria celular interaccionando con distintos
componentes celulares. Como sistema de defensa, las bacterias están equipadas con un
complejo formado por proteínas (nucleasas Cas) asociado al RNA producido a partir de
las secuencias CRISPR. Al interaccionar con este complejo, el material genético del virus
es inactivado y posteriormente degradado. Pero el sistema va más allá. Las proteínas Cas

CRISPR como una “memoria inmunológica.” En el año 2012, estos hallazgos fueron
utilizados para generar una herramienta molecular de edición genética en el laboratorio
gracias a los estudios de Emmanuelle Charpentier y Jennifer Doudna en los que se logró

(no solo vírico) y lo cortara. Este sistema CRISPR/Cas9 es una tecnología que hace posible
corregir errores en el genoma y activar o inhibir genes en células y organismos de manera
más fácil y precisa que los métodos utilizados anteriormente. CRISPR/Cas9 funciona como

una edición precisa en los genes de interés.27 Este hallazgo les valió el premio Nobel en el
año 2020.
Con la tecnología CRISPR/Cas9 se inaugura una nueva era de la ingeniería
genética en la que se puede editar, corregir y alterar el genoma de cualquier célula de una
manera fácil, rápida, barata y, sobre todo, altamente precisa. En un futuro relativamente

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 8


cercano, esta tecnología servirá para curar enfermedades genéticas y que hasta ahora eran
incurables. Ya se está trabajando con esta tecnología en enfermedades como la Corea de

sobre la reprogramación de células para que corten el genoma del VIH. En el Instituto
Tecnológico de Massachussets se anunció en marzo de 2014 que se había conseguido
curar a un ratón adulto de una enfermedad hepática (tirosinemia de tipo I) de origen genético
utilizando esta tecnología,28 y en el 2015 se publicó el primer trabajo empleando edición en
cigotos humanos.29 Pero la tecnología CRISPR/Cas9 no solo ha quedado ahí, en el 2020
fue la base para el desarrollo de la primer vacuna de RNA para combatir la pandemia que
aún en la actualidad esta enfrentando la humanidad.30

molecular de la herencia biológica y la expresión génica, así como las tecnologías


de ingeniería genética capaces de editar los genes anormales. La normalización de la
ingeniería genética en hospitales y laboratorios representaría una revolución en la medicina

solucionemos nuestras enfermedades genéticas. Los genetistas y todos los que trabajan
en esta área, con su esfuerzo incansable y brillantes avances, están escribiendo la historia
de esta tecnología y, si son exitosos, veremos pronto noticias sobre la erradicación de la
primera enfermedad genética por medio de la biotecnología molecular. Hay una esperanza
renacida en cuanto a la erradicación de enfermedades genéticas gracias a estas técnicas
de bioingeniería, sin embargo, de ninguna manera se deben pasar por alto los riesgos que
el uso de la ingeniería genética en la humanidad implica pues podrían ser mayores que los

CONSIDERACIONES FINALES: EL DILEMA DEL SIGLO XXI

pueden recordar el pasado están condenados a repetirlo.”31 La eugenesia clásica no es


una curiosidad de museo que podamos observar y juzgar desde una distancia segura
creyendo que ya fue sepultada en la historia para siempre. Gracias a los recientes avances
en bioingeniería y medicina genética, las esperanzas de mejorar la salud humana y dirigir
nuestra evolución siguen vigentes. Sin embargo, debido al precedente de la eugenesia

tecnologías de ingeniería genética para erradicar las enfermedades genéticas y hacer el


bien sin caer nuevamente en los errores y perversidades del pasado?
Como se expuso en este ensayo, desde un principio la eugenesia clásica estaba
destinada a fracasar debido a que el conocimiento genético era muy pobre y ambiguo.
No obstante, los eugenistas actuaron con poco cuestionamiento crítico y asumieron que
la genética era una ciencia que dominaban. Si hiciésemos igualmente una evaluación de

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 9


la ciencia genética actual para determinar su estado de madurez, encontraremos que aún
hay muchos temas de los cuáles no se tiene una comprensión total, particularmente en
epigenética, proteómica y genómica. Desconocer aspectos clave de la genética humana
pone en duda la efectividad de la edición de genes como solución de las enfermedades

del momento, la incapacidad de reconocer la falibilidad humana y la mala ciencia. Los


eugenistas se dejaron guiar por el nacionalismo, el sexismo, el racismo y el capacitismo,

Si realmente queremos que en un futuro cercano se apliquen y normalicen las técnicas


de ingeniería genética en el genoma de células germinales y así erradicar eventualmente
las enfermedades y condiciones genéticas debemos plantearnos cómo lograrlo sin repetir
los errores que cometió la

comprender los riesgos? 2) ¿Está la sociedad intelectual y psicológicamente preparada


para este tipo de tecnología? y 3) ¿cuál es el mejor plan para normalizar la bioingeniería
genética?

AGRADECIMIENTOS
Para la realización de la presente investigación se contó con el apoyo del Programa
de Becas CONACyT para Estudios de Doctorado en el Extranjero (No. Becario 710049).

REFERENCIAS
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mode/2up

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 12


•Espartanos
650 a. C. •Infanticidio selectivo; primeros intentos en la erradicación de las
enfermedades hereditarias.

•Platon
370 a. C. •“La República”: Crianza selectiva.

•C. Darwin
1859 •Origen de las especies: Evolución por selección natural.

•F. Galton
1865 •Eugenesia

•G. Mendel
1865 •Leyes de la herencia. Dominancia/Recesividad.
•H. De Vries, C. Correns, E. Von Tschermak y W. Bateson
1900 • Redescubren las Leyes de Mendel. Términos de “genética” y
“alelo.”
•A. E. Garrod
1902 •Alcaptonuria como una enfermedad genética humana recesiva.

•EU, Alemania, Inglaterra...


1907-1949 •Uso irracional de la eugenesia.

•T. H. Morgan
1910 •Los genes se encuentran en los cromosomas.

•O. T. Avery, C. McLeod y M. McCarty


1944 •DNA es el material genético.

•J. Watson, R. Franklin y F. Crick


1953 •Estructura helicoidal del DNA.

•S. Ochoa, M. Warren Nirenberg, H. Gobind Khorana entre otros


1961-66 •Código genético.

•W. Fiers y colaboradores


1972 •Secuencia de un gen completo.

•S. N. Cohen, A. C. Y. Chang, H. W. Boyer, R. B. Helling


1973 •Tecnología de DNA recombinante.

•K. B. Mullis
1983 •Técnica de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

2003 •Se publica el borrador de los resultados finales del Proyecto


Genoma Humano.

2004-05 •Secuenciación de nueva generación (NGS).

•J. Doudna y E. Charpentier


2012 •Sistema CRISPR-Cas9 de edición genómica.

•P. Liang y colaboradores


2015 •Edición genetica en cigotos humanos.

•Comercialización por primera vez de una terapía génica capaz de


2017 modificar los glóbulos blancos en pacientes con leucemia.

•Primeras vacunas de RNA para combatir la pandemia de la


2020 COVID19.

Figura 1. Acontecimientos históricos en la erradicación de enfermedades genéticas.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 1 13


CAPÍTULO 2
MAPEAMENTOS GENÉTICO, CITOGENÉTICO E
DE SEQUENCIAMENTO DO FEIJÃO-FAVA: UMA
REVISÃO

Data de aceite: 10/01/2022 Lívia do Vale Martins


Departamento de Biologia, Universidade
Federal do Piauí
André Oliveira Melo
Teresina - Piauí
Departamento de Biologia, Universidade
https://orcid.org/0000-0003-4645-9055
Federal do Piauí
Teresina - Piauí Raimundo Nonato Oliveira Silva
https://orcid.org/0000-0001-6655-0476 Universidade Federal do Piauí
Floriano - Piauí
Marcones Ferreira Costa
https://orcid.org/0000-0002-9987-0043
Universidade Federal do Piauí
Floriano - Piauí Ângela Celis de Almeida Lopes
http://orcid.org/0000-0001-8210-2673 Departamento de Fitotecnia, Universidade
Federal do Piauí
Michelli Ferreira dos Santos
Teresina - Piauí
Universidade Federal do Piauí
https://orcid.org/0000-0002-9546-5403
Picos - Piauí
https://orcid.org/0000-0001-7668-0864 Regina Lucia Ferreira Gomes
Departamento de Fitotecnia, Universidade
Verônica Brito da Silva
Federal do Piauí
Departamento de Fitotecnia, Universidade
Teresina - Piauí
Federal do Piauí
https://orcid.org/0000-0002-7700-6959
Teresina - Piauí
https://orcid.org/0000-0001-7739-5061 Sérgio Emílio dos Santos Valente
Departamento de Biologia, Universidade
Maria Fernanda da Costa Gomes
Federal do Piauí
Universidade Estadual do Piauí
Teresina - Piauí
São Raimundo Nonato - Piauí
http://orcid.org/0000-0003-2953-7330
https://orcid.org/0000-0002-1089-8593

Gleice Ribeiro Orasmo


Departamento de Biologia, Universidade
RESUMO: Phaseolus lunatus L. (feijão-fava ou
Federal do Piauí
Teresina - Piauí feijão-lima) é uma das quatro espécies do gênero
https://orcid.org/0000-0002-4342-3287 Phaseolus L. mais exploradas comercialmente.
O feijão-fava é uma fonte de emprego e renda
Lidiane de Lima Feitoza para a população carente, além de ser uma
Departamento de Biologia, Universidade importante fonte de proteínas, sendo usado
Federal do Piauí tanto na alimentação humana como na ração
Teresina - Piauí
para bovinos. Diante da sua reconhecida
https://orcid.org/0000-0001-7884-7058

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 14


de diferentes pesquisas sobre mapeamentos genético, citogenético e sequenciamento do
genoma do feijão-fava. Esses estudos foram separados em três categorias: (1) investigação
da origem evolutiva e diversidade genética molecular, (2) mapeamento citogenético e de
sequenciamento, e (3) melhoramento genético do feijão-fava. Estudos adicionais utilizando
marcadores moleculares são necessários para analisar a diversidade inexplorada e para

leguminosa economicamente importante.


PALAVRAS-CHAVE: Diversidade Genética. Germoplasma. Marcadores moleculares.
Phaseolus lunatus.

GENETIC, CYTOGENETIC, AND SEQUENCING MAPPING OF FAVA BEANS: A


REVIEW
ABSTRACT: Phaseolus lunatus L. (Fava beans, Lima beans), is one of the four most
commercially exploited species of the Phaseolus L. genus. The Lima bean is an income

separated into three categories: (1) investigation of evolutionary origin and molecular genetic
diversity, (2) cytogenetic and sequencing mapping, and (3) genetic breeding of the fava bean.

important legume species.


KEYWORDS Phaseolus lunatus.

1 | INTRODUÇÃO
O feijão-fava (Phaseolus lunatus L.), popularmente conhecido por feijão-de-lima,
fava-de-lima ou simplesmente fava, é superado, em termos de consumo e áreas cultivadas,
apenas pelo feijão comum (P. vulgaris L.) (ARTEAGA et al., 2018). No cenário mundial, o
feijão-fava dispersou-se do seu local de origem, na região da Mesoamérica e dos Andes,
para regiões subtropicais do globo (SERRANO-SERRANO et al., 2010). Na América do
Norte, os Estados Unidos são o maior produtor de feijão-fava no mundo. Na Europa, é
cultivado em pequena escala nos países mediterrâneos (ARTEAGA et al., 2018). No Brasil,
o feijão-fava é produzido e comercializado por pequenos produtores na região Nordeste,
sendo consumido na forma verde e madura (MORAES et al., 2017).
Bonifácio et al. (2012) e Penha et al. (2016) destacam o potencial e a diversidade
genética do feijão-fava e suas aplicações em programas de conservação e melhoramento
genético dessa espécie. Penha et al. (2016) também ressaltam que, apesar da importância
do feijão-fava, variedades melhoradas dessa leguminosa não são produzidas no Brasil,
além de haver poucas informações sobre seu sistema de reprodução e da diversidade

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 15


genética existente.
O melhoramento genético atua diretamente na adaptabilidade e produtividade
dos cultivos, sendo necessário o conhecimento detalhado da constituição genética das
espécies (BERED; NETO; CARVALHO, 1997). Nesse contexto, estudos envolvendo a
construção de mapas genéticos, citogenéticos e de sequenciamento têm sido bastante úteis
na localização de genes que controlam características de importância morfoagronômica,
sendo ferramentas-chave para o melhoramento genético de uma espécie-alvo (HA et al.,
2012; ANDARGIE et al., 2013; SOUSA et al., 2015).
Diante de sua reconhecida importância, o presente trabalho objetivou realizar

P. lunatus e o recente sequenciamento do seu genoma, bem como sua aplicabilidade ao


melhoramento genético, destacando as possíveis implicações dessas pesquisas, além de
oferecer um panorama geral desses conhecimentos para futuras aplicações.

2 | METODOLOGIA
Este trabalho reuniu os principais conhecimentos acerca da genética, citogenética e
genômica do feijão-fava obtidos por meio de
de determinar o seu panorama atual.
A busca pelos artigos foi realizada nas bases de dados Science Direct, Google

(SCIELO). Foram utilizados os seguintes descritores: feijão-fava, marcadores moleculares,


mapeamento genético, mapeamento citogenético, sequenciamento e melhoramento
genético, lima bean, molecular markers, genetic mapping, cytogenetic mapping, genetic
breeding, sequencing e Phaseolus lunatus L.
Fizeram parte da pesquisa os artigos que obedeceram aos seguintes critérios:
estudos abordando dados genéticos e citogenéticos de feijão-fava, trabalhosutilizando
marcadores moleculares e citogenéticos e estudos que oferecem conhecimentos relevantes
para o seu panorama geral.
A partir desses trabalhos e seu compilado de informações, dividimos a revisão em
três categorias: (1) investigação da origem evolutiva e diversidade genética molecular, (2)
mapeamento citogenético e sequenciamento, e (3) melhoramento genético do feijão-fava.
Para o entendimento da evolução do conhecimento obtido em cada categoria ao longo do
tempo, os estudos selecionados foram postos, via de regra, em ordem cronológica, sendo
cada estudo abordado separadamente.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 16


3 | MAPEAMENTO GENÉTICO, MAPEAMENTO CITOGENÉTICO E
SEQUENCIAMENTO DO GENOMA DE PLANTAS
Diante da importância nutricional e alimentar das espécies vegetais no mundo todo
e visando o desenvolvimento de espécies com maior rendimento e resistência a estresses
bióticos e abióticos, como resistência a vírus e tolerância à seca, respectivamente,
pesquisas genômicas têm sido voltadas ao melhoramento genético de plantas (VARSHNEY
et al., 2010; VARSHNEY, GRAMER; SORRELLS, 2005).
Nesse contexto, o desenvolvimento de mapas genéticos, citogenéticos e, mais
recentemente, o sequenciamento do genoma de plantas têm se tornado abordagens
genéticas clássicas e modernas cada vez mais utilizadas, permitindo a localização de
regiões gênicas de interesse, sendo ferramentas-chave para o melhoramento genético
vegetal, para o mapeamento genômico comparativo e para obtenção de um mapa de
referência para a maioria das espécies vegetais.
Mapas genéticos disponíveis para espécies vegetais têm auxiliado a detecção de
genes economicamente importantes. Vários tipos de marcadores podem ser utilizados
na construção desses mapas, como: AFLPs (

Polymorphism DNA
( Sequências Simples Repetidas) e SNPs (Single Nucleotide
Polymorphisms et al., 2009; ZOLET et al.,
2017). Tais marcadores são importantes para o mapeamento genético e para a seleção
assistida por marcador (WANG et al. 2006).
Essas marcas genéticas podem, ainda, ser associadas e integradas a cromossomos

genéticas e físicas, a análise da distribuição de sequências repetitivas no genoma de


determinada espécie, bem como a determinação da origem do seu genoma (MARTINS,
2020). Essas marcas correspondentes em cada grupo de ligação são utilizadas como
sondas para Hibridização in situ Fluorescente (FISH), permitindo a sua integração e
localização física nos cromossomos de espécies-alvo (CARNEIRO; VIEIRA, 2002).
O sequenciamento do genoma possibilitou a associação de marcas relacionadas a

de uma espécie é um processo relativamente oneroso e laborioso, sendo limitado a apenas


algumas espécies vegetais. A primeira espécie a ter o genoma sequenciado e montado
foi Arabidopsis thaliana (L.) Heynh. (Arabidopsis Genome Initiative, 2000), em 2000,
tornando-a um organismo-modelo para o estudo de organização genômica e evolução de
plantas (SOUSA et al., 2015; DASH et al., 2016).
Com os avanços das tecnologias de sequenciamento, aliados à sua redução de
custo e de tempo, o sequenciamento do genoma de espécies vegetais tem se tornado

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 17


cada vez mais acessível, aumentando a disponibilidade de dados para espécies
economicamente importantes. Schneider et al
de sequenciamento e o aumento do investimento em pesquisas relacionadas à Biologia
Molecular tem relacionado o uso de marcadores moleculares a estudos cada vez mais

Estudos comparativos e evolutivos, assim como programas de melhoramento de


espécies cultivadas, realizados com uso de marcadores moleculares, permitem avaliar
sistematicamente a diversidade genética entre cultivares de uma espécie, construir
mapas de ligação mais detalhados e selecionar marcadores associados a características
morfológicas de interesse (ALMEIDA, 2006).
A herança de caracteres quantitativos é fundamental para pesquisas no campo da
genética agrícola e evolutiva. Através de um mapa genético supersaturado, é possível
localizar genes e QTLs (Quantitative Trait Loci; Loci de características quantitativas)
associados a características morfoagronômicas de interesse, além de estudos comparativos
de sintenia entre espécies, contribuindo para o entendimento acerca da evolução dos
genomas de plantas (ANDARGIE et al., 2013; POLANCO et al., 2019). O número de loci,
suas posições genômicas, suas interações genéticas e sua resposta a fatores bióticos ou
genética de
características individuais.
Mais recentemente, os avanços nas técnicas de edição do genoma baseados em
CRISPR/Cas ( Repetições
palindrômicas curtas agrupadas e interespaçadas) aplicadas na agricultura possibilitam

genitores (CHEN et al., 2019).

4 | O FEIJÃO-FAVA

4.1 Descrição e taxonomia


O feijão-fava (P. lunatus) é distribuído do sul dos Estados Unidos ao norte da
Argentina, desde o nível do mar até aproximadamente 2.700m de altitude (DOHLE,
2017). Essa espécie é proximamente relacionada ao feijão comum (P. vulgaris) ambas
pertencentes à subfamília Papilionoideae, família Leguminosae (AZANI et al., 2017).
O gênero Phaseolus L.
representado por espécies majoritariamente difundidas nos Andes e nas Américas Central
e do Sul, sendo o México seu principal centro de diversidade (com 90% das espécies

secundários do grupo (LIOI; RIERGIOVANNI, 2015). Esse gênero é composto por cerca
de 75 espécies subagrupadas em dois clados maiores e divididos em oito grupos,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 18


Leptostachyus, Lunatus, Polystachios e Vulgaris pertencentes ao clado B. Pelo menos
sete eventos independentes de domesticação ocorreram dentro do gênero, o que gerou o
isolamento reprodutivo de cinco espécies domesticadas: P. acutifolius A. Gray, P. coccineus
L., P polyanthus Greeman, P. lunatus e P. vulgaris, sendo as duas últimas de maior destaque
mundial (DELGADO-SALINAS; BIBLER; LAVIN, 2006; BITOCCHI et al., 2017).

de Phaseolus ocorreu por volta de 2 milhões de anos atrás. De acordo com Baudoin (1988)
e Bitocchi et al. (2017), P. lunatus é uma espécie predominantemente autógama que inclui
arbustos anuais determinados e escaladores indeterminados que são frequentemente
perenes devido à sua raiz principal alargada.

4.2 Importância econômica


Os feijões do gênero Phaseolus são uma importante fonte nutricional, com cerca de
30% de proteínas presentes nos seus grãos, além de serem ricos em carboidratos, ácido
fólico e sais minerais, como zinco, cálcio, magnésio e fósforo, dentre outros (USDA, 2015).
São amplamente adaptados, de ciclo de vida curto, de fácil produção e de alto consumo,
especialmente em países em desenvolvimento. Esses feijões constituem a principal fonte
de subsistência para a população de baixa renda, devido ao seu alto valor proteico, além
de serem uma fonte geradora de emprego e renda para as famílias carentes (BOUKAR et
al., 2016).
O feijão comum é uma das leguminosas de grãos com maior consumo mundial
em termos de rendimento total e área cultivada, apresentando um papel importante na
alimentação em países em desenvolvimento da África e das Américas Central e do Sul
(GIOIA et al., 2019). Dados mais recentes disponibilizados pela da FAO (Organização das
Nações Unidas para Agricultura e Alimentação), relativos ao ano de 2018, indicam que
a sua produção mundial foi estimada em cerca de 55 milhões de toneladas métricas (t)
(FAO, 2020). O Brasil é considerado o principal produtor de grãos de feijão comum com

de Goiás responsável por 37% da sua produção (EMBRAPA, 2021).


O feijão-fava, por sua vez, apresenta produção e produtividade inferiores quando
comparado ao feijão comum. Na América do Norte, os Estados Unidos são o maior
produtor de feijão-fava no mundo. Na Europa, é cultivado em pequena escala nos países
mediterrâneos, principalmente na Espanha, onde é um ingrediente da tradicional “paella”
(ARTEAGA et al., 2018). No Brasil, os estados do Ceará e da Paraíba são uns dos maiores
produtores nacionais de feijão-fava (IBGE, 2019). Algumas regiões apresentam baixos
níveis de produção em relação à quantidade de recursos utilizados, principalmente devido
à falta de programas de pesquisas sobre nutrição mineral (OLIVEIRA et al., 2004). Em
2019, a produção nacional dessa leguminosa contabilizou 11.449 t (IBGE, 2019).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 19


4.3 Mapeamento genético do feijão-fava
As pesquisas com feijão-fava que utilizam marcadores moleculares geralmente
possuem três objetivos principais: (1) investigação da origem evolutiva e diversidade
genética molecular, (2) mapeamento citogenético e sequenciamento, e (3) aplicações

acima mencionados são detalhados a seguir.

4.3.1 Origem evolutiva e diversidade genética molecular

origem pré-colombiana para P. lunatus. Entretanto, mais informações seriam necessárias

propiciaram ferramentas para a realização de estudos relativos à diversidade genética em


espécies vegetais (DURAN et al., 2009).
O estudo da evolução de uma espécie vegetal pode ser feito através de um mapa único
de referência (CARNEIRO; VIEIRA, 2002). Desse modo, é possível entender a evolução de
uma espécie com base nos dados genéticos obtidos de espécies evolutivamente próximas.
No caso do feijão-fava, que sofreu domesticações desde os tempos pré-colombianos, a
comparação das formas silvestres e cultivadas é de suma importância para a compreensão
dos seus processos evolutivos.

(1995) analisaram as proteínas de sementes de feijão-fava silvestre e híbridos cultivados.


Esses autores concluíram que as formas silvestres podem ser divididas em dois grupos: o
primeiro, que possui sementes menores e uma área de distribuição que se estende desde
o México, América Central à encosta oriental dos Andes; e o segundo, que possui uma
distribuição mais circunscrita na costa oeste dos Andes no Equador e norte do Peru.

mostraram que os cultivares de sementes grandes foram domesticados a partir de feijões-


fava silvestres de sementes grandes no oeste da América do Sul. Lioi (1996) analisou a
diversidade de feijão-fava silvestre utilizando a eletroforese da proteína faseolina e, a partir
desses dados, sugeriu que a área de distribuição de formas selvagens Mesoamericanas de
feijão-fava estende-se do México à Argentina; já as formas selvagens Andinas teriam uma
distribuição mais limitada.

de feijão-fava e de outras espécies de Phaseolus, incluindo o feijão comum, de origem


Mesoamericana e Andina. Os resultados sugerem que as espécies Mesoamericanas são

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 20


grande semelhança com o pool gênico Mesoamericano de feijão-fava. Dessa forma, foi
sugerida uma origem Andina para o feijão-fava e para as espécies selvagens Andinas,
sendo candidatas a apresentarem genes de interesse para o melhoramento genético dessa
cultura.
Serrano-Serrano et al. (2010), usando marcadores moleculares de DNA nuclear
genética e a hipótese de
uma origem Andina relativamente recente dessa espécie, conforme apontado por Delgado-
Salinas, Bibler e Lavin (2006). Serrano-Serrano et al. (2010) analisaram uma coleção de
feijão-fava silvestre, três espécies selvagens Andinas (P. augusti Harms,
Harms e P. bolivianus Piper) e três espécies Mesoamericanas (P. leptostachyus Bentham,
P. marechalii Delgado e P. novoleonensis

da origem Andina do feijão-fava silvestre na época do Pleistoceno e com uma divergência


inicial de três pools
principalmente de forma isolada. Sendo assim, tais pools são importantes em programas
de conservação e melhoramento (MAQUET; VEKEMANS; BAUDOIN,1999).
Martínez-Castillo, Colunga-GarcíaMarín e Zizumbo-Villarreal (2008) usaram 90
marcadores SSRs para estimar a diversidade genética de 21 raças primitivas de espécies
nativas de feijão-fava da Península de Yucatán no México, com o objetivo de analisar o risco
de erosão genética e gerar dados moleculares aplicáveis à conservação in situ. Comparado
ao pool genético silvestre, o pool genético domesticado apresentou menor diversidade
genética e as variedades locais abundantes apresentaram uma diversidade genética mais

de erosão genética para as raças de feijão-fava domesticado da Península de Yucatán e,


por isso, precisam ser conservados in situ.
Martínez-Castillo et al. (2014) utilizaram 67 populações selvagens de feijão-fava
mediante análise de 10 loci SSRs. Os resultados mostraram que a variação interpopulacional
pools de
genes (MI e MII) no México e, ainda, foi proposta a existência de dois subgrupos dentro
genética do feijão-fava silvestre é mais

subgrupos MIa e MIb.

hipótese de dois eventos de domesticação para as raças indígenas Mesoamericanas


com sementes pequenas, caracterizaram 62 acessos de feijão-fava domesticados, 87
selvagens e seis invasores com 10 loci SSRs. Os resultados sugerem que houve pelo
menos um evento de domesticação na área do pool MI no centro-oeste do México e que
algumas raças locais são geneticamente relacionadas a acessos selvagens do pool MII.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 21


indígenas Mesoamericanas de feijão-fava. Entretanto, os resultados sugerem que essas
raças não compõem um grupo geneticamente homogêneo, o que indica a ocorrência de
mais de um evento de domesticação e múltiplos eventos de introgressão. Dessa forma,
é necessária uma amostragem maior em áreas da América Central, especialmente em
Honduras, Nicarágua e Panamá, no norte da América do Sul, além de mais dados do
genoma desses acessos para ampliarmos o conhecimento a respeito dos processos de
domesticação dessa espécie.
Chacón-Sánchez e Martínez-Castillo (2017) analisaram a estrutura genética do
pool de genes selvagens de feijão-fava na Mesoamérica por meio de marcadores SNPs.
Analisou-se dois eventos de domesticação para MI e MII separadamente, e um evento de
domesticação do pool
Os marcadores SNPs também foram usados para avaliar a estrutura genética do feijão-fava,
o efeito de sua domesticação na diversidade genética e a detecção de genes candidatos
pools de genes de
feijão-fava: dois Mesoamericanos (MI e MII) e um Andino (AI), o que corrobora com as
informações obtidas por Martínez-Castillo et al. (2014). Ainda, foi proposta a possibilidade
da existência de outro pool gênico Andino (AII) no centro da Colômbia. Quanto aos possíveis
cenários de domesticação, um único evento de domesticação do pool gênico MI seguido
pela mistura com populações selvagens mostrou-se estatisticamente mais provável. As
análises genéticas para domesticação indicam o envolvimento de efeitos fundadores, que
resultaram na perda da diversidade genética e aumento do desequilíbrio de ligação (LD)
nas raças locais. Além disso, as regiões genômicas relacionadas à domesticação dessa
espécie foram detectadas.
Penha et al. (2016) buscaram estimar as taxas de cruzamento natural e os níveis de
diversidade genética de P. lunatus var. lunatus, variedade botânica domesticada de feijão-
fava do Brasil, por meio de 10 loci
e melhoramento. Os resultados mostraram que o feijão-fava brasileiro possui uma taxa de
cruzamento natural de 38,1%, o que indica a predominância de autofecundação em um
sistema de cruzamento misto. A maioria dos cruzamentos ocorreu entre parentes, gerando
irmãos completos, meios-irmãos e irmãos que se autofecundam. Segundo os autores,
as implicações dos resultados afetam positivamente os programas de melhoramento,
uma vez que as altas taxas de cruzamento aceleram a geração de novas linhagens de
variedades melhoradas. Entretanto, as implicações para os programas de conservação
estão relacionadas à multiplicação e regeneração do material em bancos de germoplasma,
que devem ser realizadas sob condições controladas visando evitar a troca de pólen entre
as plantas. Além disso, um grande tamanho de amostra é necessário para reter o máximo
de diversidade para a conservação ex situ. Ainda, percebeu-se que a diversidade de feijão-
fava no Brasil é maior que a encontrada em outras regiões da América e comparável

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 22


à observada em populações selvagens da Península de Yucatán, no México, que é
considerada o centro de diversidade genética de feijão-fava.
Gomes et. al. (2019) analisaram a diversidade genética de 153 acessos de feijão-

P. lunatus da Universidade Federal do Piauí (BGP-UFPI), já que bancos de germoplasma


com alta variabilidade são excelentes recursos para o estudo da diversidade de uma
espécie e para evitar sua erosão genética. Para isso, foram usados 11 marcadores SSRs,
gerando um total de 113 alelos com média de 10,27 alelos por locus. Os resultados
indicaram que esses mesmos alelos poderiam ser representados por um mínimo de 34 dos
153 acessos de feijão-fava, podendo formar uma coleção nuclear representada por 22%
dos acessos do BGP-UFPI, com baixa redundância. A avaliação da coleção nuclear indicou
que as culturas representativas possuem maior índice de diversidade que a coleção inteira
do banco de germoplasma. Os autores concluem que a coleção nuclear irá auxiliar os
estudos das variações morfológicas de interesse agronômico, estudos de campo e estudos
de associação genômica com feijão-fava, mas advertem que essa deve ser atualizada
periodicamente, incluindo germoplasmas de feijão-fava adicionais na coleção de base,
examinando sua resistência a doenças e à seca.

4.3.2 Mapeamento citogenético

A citogenética é uma ferramenta valiosa para caracterização da diversidade dos


recursos genéticos vegetais. A análise de cariótipos envolvendo o número, morfologia
e tamanho dos cromossomos, presença de constrição secundária e quantidade de
heterocromatina são informações importantes para comparar espécies ou detectar

espécie ou entre homeólogos de espécies relacionadas (MOSCONE; LAMBROU;


EHRENDORFER, 1996). Esses dados, associados a outras características citológicas, têm
se mostrado importantes para o reconhecimento de variedades, híbridos e poliploides e na

Os primeiros relatos sobre o número cromossômico em Phaseolus ocorreram em


n = 22 para as espécies de feijão comum (P. vulgaris),
feijão escarlate (P. coccineus), feijão-fava (P. lunatus) e feijão tepário (P. acutifolius).
Dessa forma, estabeleceu-se x = 11 como o número básico de cromossomos do gênero
(MERCADO-RUARO; DELGADO-SALINAS, 2000). Mercado-Ruaro e Delgado-Salinas
Phaseolus
e das diferentes hipóteses para explicar as alterações cromossômicas nesse gênero.
Reduções no número cromossômico foram relatadas em três espécies relacionadas do
gênero: P. leptostachyus, P. micranthus P. macvaughii A. Delgado, todos
com 2n = 2x = 20 cromossomos, sendo essa redução causada por eventos de disploidia

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 23


descendente (MERCADO-RUARO; DELGADO-SALINAS, 2000; FONSÊCA; FERRAZ;
PEDROSA-HARAND, 2016).
Com o surgimento da técnica de FISH (Hibridização in situ Fluorescente), foi

comumente utilizadas como sondas em FISH são: DNA altamente repetitivo em tandem,
como os sítios de DNA ribossomais (DNAr) 5 e 35S; sequências centroméricas; teloméricas;
repetitivas dispersas, como os elementos transponíveis; e sequências repetitivas e cópia-

Leveduras (YACS) e de Bactérias (BACs) (GUERRA, 2004; JIANG; GILL, 2006).


Estudos citogenéticos moleculares têm sido conduzidos em espécies dos gêneros
Phaseolus, utilizando como sondas sítios de DNAr (GUERRA et al., 1996; MOSCONE et
al., 1999; PEDROSA-HARAND et al., 2009), DNA centromérico, sequências teloméricas
(IWATA-OTSUBO et al., 2016), DNA satélite (RIBEIRO et al., 2019) e BACs (PEDROSA-
HARAND et al., 2009; BONIFÁCIO et al., 2012; ALMEIDA; PEDROSA-HARAND, 2013).

cultivados de feijão-fava oriundas de pools gênicos Mesoamericanos e Andinos e de formas


intermediárias. Foram utilizados oligonucleotídeos (oligos), marcados com digoxigenina,
como sondas para FISH. Cinco dos marcadores utilizados, (AAT)5, (ATG)5, (GACA)4,
(GATA)4, (GGAT)4,
genética em feijão-
fava.
Almeida (2006) estudou a evolução cariotípica de feijão-fava e do feijão comum
através da distribuição de heterocromatina e do número de sítios de DNAr 5S e 35S em
acessos Mesoamericanos e Andinos de ambas as espécies e construiu um mapa citogenético
comparativo baseado nos padrões de localização e distribuição de sítios DNAr e de regiões
heterocromáticas [CMA/DAPI (Cromomicina A3
as espécies, a heterocromatina está geralmente localizada na região pericentromérica da
maioria dos cromossomos. O feijão-fava apresentou um par de sítios 35S, enquanto o
feijão comum apresentou dois pares em todos os acessos analisados.
Almeida e Pedrosa-Harand (2011) determinaram a distribuição dos sítios de DNAr
5S e 35S em 17 acessos de feijão-fava pertencentes a diferentes centros de domesticação.
Os cromossomos de P. lunatus, assim como os de P. vulgaris, possuem sítios de DNAr 35S
localizados no cromossomo 6. Através de análises adicionais por BAC-FISH, foi observado
que o cromossomo 6 é conservado entre as espécies previamente analisadas (P. vulgaris,
P. lunatus, P. microcarpus e P. leptostachyus), sendo considerado o provável cromossomo
ancestral dentro do gênero (ALMEIDA; PEDROSA-HARAND, 2013; FONSÊCA; FERRAZ;
PEDROSA-HARAND, 2016).
O mapa físico do feijão comum foi primeiramente realizado por Pedrosa-Harand
et al.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 24


posteriormente estabelecido por Fonsêca, Ferraz e Pedrosa-Harand (2016), que mapearam
os sete pares cromossômicos restantes. Em seguida, a biblioteca de sondas BACs de
P. vulgaris foi utilizada em estudos carioevolutivos em diferentes espécies do gênero,
incluindo P. lunatus.
Bonifácio et al. (2012) realizaram uma análise comparativa entre os cromossomos
do feijão-fava e do feijão comum usando BACs de feijão comum como sondas para FISH,
que foram mapeados nos cromossomos do feijão-fava, permitindo estabelecer homeologias
cromossômicas e os mecanismos evolutivos que moldaram os cariótipos analisados.
Também foram mapeados os sítios de DNAr 5S e 35S, sequências repetitivas contidas em
BACs e regiões de heterocromáticas por coloração CMA/DAPI. Corroborando com Almeida
(2006), sete dos 22 BACs selecionados de diferentes cromossomos de feijão comum não
puderam ser mapeados, pois demonstraram padrões pericentroméricos repetitivos no

cópia-única. Na maioria das extremidades cromossômicas do feijão comum, foi encontrado


um padrão repetitivo subtelomérico, o que não ocorreu com o feijão-fava, apontando falta
de conservação dessa repetição subtelomérica. Os resultados indicam alta conservação
da macrossintenia (conservação de blocos cromossômicos entre espécies) e colinearidade
(manutenção da ordem desses blocos cromossômicos entre espécies) envolvendo os 11
pares cromossômicos entre as espécies analisadas, apesar das diferenças que sugerem
ocorrência de inversões pericêntricas nos cromossomos 2, 9 e 10. A pequena quantidade
de rearranjos estruturais indica, portanto, alta estabilidade cariotípica do gênero Phaseolus.
Posteriormente, Almeida e Pedrosa-Harand (2013) construíram um mapa
citogenético comparativo dos cromossomos 3, 4 e 7 do feijão comum e do feijão-fava
usando 30 BACs e dois bacteriófagos. Nove BACs apresentaram um padrão repetitivo de
DNA com distribuição pericentromérica. Vinte e três BACs cópia-única do feijão comum
foram mapeados nos cromossomos 3 (9 BACs), 4 (8 BACs) e 7 (6 BACs) do feijão-fava,

o feijão-fava, sendo as principais diferenças cariotípicas associadas à fração repetitiva do


DNA.

4.3.3 Sequenciamento do genoma

Durante os últimos anos, os avanços das pesquisas genômicas suportadas pelas


plataformas de bioinformática e de sequenciamento de nova geração (NGS) permitiram um
progresso nos estudos citogenéticos moleculares de sintenia e evolução cromossômica em
plantas (CHÈVRE et al., 2018).
Dentre as espécies de Phaseolus, o genoma de P. vulgaris (~587 Mb) foi o primeiro
a ser publicado, mediante abordagem combinada pelas plataformas Roche 454, Illumina e
Sanger (SCHMUTZ et al., 2014). Posteriormente, Lobaton et al. (2018) ressequenciaram

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 25


o genoma inteiro de 35 variedades cultivadas e elites de P. vulgaris pertencentes a
diferentes programas de melhoramento genético do gênero, bem como de P. acutifolius e
P. coccineus genética entre e
dentro espécies fornecendo, assim, informações valiosas para programas de melhoramento
genético voltados para as espécies do gênero.
Recentemente, Garcia et al. (2021) sequenciaram e montaram o genoma (542
Mb) de um acesso de feijão-fava domesticado do pool genético MI coletado na Colômbia,
mediante sequenciamento do
genoma completo (WGS), 10X Genomics, GBS ( Genotipagem
por sequenciamento) e sequenciamento de RNA (RNA-seq) associada à montagem do
transcriptoma de novo. Dos ~28.500 genes anotados, 1.917 genes foram particularmente

diferencialmente expressos que podem estar relacionados à deiscência da vagem e ao


desenvolvimento das sementes. A montagem de alta qualidade do genoma de P. lunatus
fornece, portanto, suporte e aplicabilidade para programas de melhoramento genético
voltados ao gênero Phaseolus.
A comparação estrutural entre 22.180 genes ortólogos de feijão-fava com feijão
comum corroborou a alta sintenia apontada por Bonifácio et al. (2012) e Almeida e
Pedrosa-Harand (2013) e revelou cinco rearranjos cromossômicos: (1) inversão de 5
Mb no braço longo do cromossomo 3 de P. luntatus (Pl03); (2) inversão de 10 Mb no
braço longo do cromossomo Pl07; (3) translocação complexa dentro do braço curto do
cromossomo Pl09; (4) inversão do braço curto do cromossomo Pl10; (5) translocação da
região pericentromérica do cromossomo 2 de P. vulgaris (Pv02) dentro do braço curto do
cromossomo Pl02. Esses resultados também sugerem que há uma organização em seis
grupos com distribuições não sobrepostas e que as raças locais mesomericanas podem
ser subdivididas em três subaglomerados. Além disso, foram estabelecidas associações
de loci genéticos com características relevantes para os processos de domesticação e
melhoramento em feijão-fava.
Os dados obtidos por Garcia et al. (2021) são de interesse para todos os três objetivos
de pesquisa abordados neste trabalho, uma vez que suas informações e conclusões
contribuem para um maior entendimento da evolução e diversidade de Phaseolus, para o
mapeamento genético de feijão-fava e também para o melhoramento genético do gênero,
com ênfase em P. lunatus.

4.4 Melhoramento genético

de interesse econômico têm revolucionado a agricultura (CARRER; BARBOSA; RAMIRO,


2010). Um exemplo disso são os estudos que avaliaram a resistência de feijão-fava a
fatores abióticos, pragas e doenças.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 26


Mhora et al. (2016) utilizaram GBS para obter 12 marcadores associados ao fenótipo
de resistência à raça F de Phytophthora phaseoli, um oomiceto causador de míldio, em

mapear sete loci de resistência à raça F de P. phaseoli em 256 acessos de feijão-fava.


Os ensaios utilizados obtiveram sucesso na genotipagem do painel de diversidade do

funcionalidade dos métodos aplicados para prever os fenótipos de resistência do feijão-


fava à raça F de P. phaseoli. Os autores apontam para a possibilidade da existência de
mais de um gene de resistência à P. phaseoli e propõem que seu uso em conjunto, a

mapear esses loci


feijão-fava (Almeida e Pedrosa-Harand, 2013). Esses dados podem auxiliar programas de
melhoramento genético dessa espécie, tanto em relação à pragas quanto a condições
ambientais de estresse.
Preocupados com as consequências das mudanças climáticas para a agricultura e
visando entender melhor a resposta do feijão-fava a tais mudanças, Martínez-Nieto et al.
(2020) compararam as características e a adaptabilidade das sementes de três cultivares

entre os cultivares estudados, foram usados oito marcadores moleculares. Os resultados

uma relação entre a porcentagem e o tempo médio de germinação, a temperatura de


30 °C foi considerada ideal para o grupo de cultivares estudados. Os autores também
investigaram uma possível correlação entre as características genéticas e as respostas
de germinação das cultivares. Porém, a técnica DNA barcoding não encontrou diferenças
genéticas entre as raças valencianas. Os autores propõem que as diferentes respostas
dessas raças geneticamente próximas podem ser explicadas por mecanismos epigenéticos
ou por alguns genes que desempenham um papel relevante nas respostas aos estresses.
Algumas doenças transmitidas por insetos geram prejuízos em quantidade e
qualidade para espécies cultivadas do gênero Phaseolus et al. (2021) avaliaram o
feijão comum e feijão-fava em relação à resistência à doença do crumple da folha causada
por dois begomovírus transmitidos pela mosca branca (Bemisia tabaci): o vírus do crumple
da folha da cucurbitácea (CuLCrV) e o vírus do mosaico dourado sida da Flórida (SiGMFV).
Foram examinados 82 genótipos de feijão comum e dois de feijão-fava para resistência
contra CuLCrV e/ou SiGMFV. Desses, 20 apresentaram níveis altos a moderados de
resistência a CuLCrV e/ou SiGMFV, sendo 21 considerados altamente suscetíveis. O

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 27


distribuídos nos 11 cromossomos dessas espécies, sendo o cromossomo 2 (49,67 Mb) com
maior número de variantes (73.326). Segundo os autores, os dados obtidos serão úteis em
genética da resistência
ao begomovírus em espécies do gênero Phaseolus.

5 | CONSIDERAÇÕES FINAIS
Marcadores moleculares e citogenéticos apresentaram uma grande importância
nos estudos de feijão-fava. No que tange à origem evolutiva e à diversidade genética
dessa espécie, as pesquisas corroboram a hipótese de uma origem Andina na época do
Pleistoceno e sugerem a existência de dois pools gênicos Mesoamericanos (MI e MII) e
dois Andinos (AI e AII). A diversidade de feijão-fava, apesar de ser afetada negativamente
pela erosão

melhoradas, principalmente no Brasil, que possui um potencial ainda pouco explorado.


A construção de mapas citogenéticos e o sequenciamento do genoma do feijão-
fava elucidaram os mecanismos genéticos/genômicos responsáveis pela separação
das linhagens de feijão-fava e feijão comum. As aplicações de melhoramento genético

fava mais resistentes.


Diante disso, é necessário dar continuidade a trabalhos utilizando abordagens
baseadas em mapas citogenéticos, sequenciamento e marcadores moleculares para
P. lunatus. É necessária,
portanto, a preservação dessa diversidade genética em bancos de germoplasma, além de
realizar estudos que explorem a diversidade genética do feijão-fava.

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 2 33


CAPÍTULO 3
GENETICS AND EDUCATION: OVER 50 YEARS
GENERATING COLLABORATIONS, BUILDING
BRIDGES AND WEAVING NETWORKS IN
ENDLESSLY TURBULENT SCENARIOS

Data de aceite: 10/01/2022 of


support from provincial, national institutions,
including international, especially Brazilian, public
Alberto Sergio Fenocchio
and private.
Verónica Graciela Teza
RESUMO: Os acontecimentos que acontecem na
sociedade tem impacto direto sobre os setores
ABSTRACT: The events that happen in society
have a direct impact on the so-called “productive”
como verdadeira e seguindo cronológicamente
sectors. Assuming this statement as true and
a história da Argentina desde os anos 70 até a
presente data pode-se comprobar que os tempos
from the 70s to the present date, it is possible to
de crise oferecem OPORTUNIDADES. Apesar
disto, as crises ocultam AMEAÇAS que, como no
Despite this, the crises hide THREATS that, as in
caso da carreira universitária de grau “Licenciatura
(=Bacharelado) em Genética, tem se mostrado
Genetics, have
como aquelas forças que se opõem às mudanças
pela rigidez das autoridades circunstanciais,
changes due to the rigidity of circumstantial
authorities, professional groups that have been
áreas de atuação e ainda por pessoas pouco
threatened in their areas performance and even
afetas ao desenvolvimento de inovações se
by people little affected by the development of
elas não surgem do seu próprio círculo áulico.
A Licenciatura em Genética começou a ser
aulic circle. The Degree in Genetics began to
oferecida em 1975, no seio de uma sociedade
comocionada pela violência em uma recém criada
Universidad Nacional de Misiones, verdadeira
“colcha de retalhos”, fato que desmascarou as
DEBILIDADES, a quase inexistente infraestrutura
almost non-existent infrastructure and support
e estrutura de sustentaçao necessária para o
structure necessary for the immense effort that
imenso esforço que representa a criação de uma

peripheral geographic location (northeast of the


periférica (nordeste do país) que ameaçava o
country) that threatened the centralist paradigm
paradigma centralista que ainda hoje caracteriza
that still characterizes Argentina today. Faced
à Argentina. Perante os constantes ataques
desferidos durante uns 20 anos à tentativa,
que não surgiu do e nem no país “central”,
or in the “central” country, spiritual, immaterial,
surgiram as FORÇAS espirituais, imateriais, e
and professional FORCES emerged in a group

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 3 34


de Instituiçoes provinciais, nacionais, inclusive internacionais, especialmente brasileiras,
públicas e privadas, alicerçando as bases para que hoje na Argentina haja três carreiras
universitárias de graduação em Genética.
PALAVRAS-CHAVE: Docência, Interação, Sinergia.

Society of Genetics, its name is due to the fact that Prof. Dr. Francisco Sáez has been

Due to the nuances of chance he, Uruguayan by birth, developed his studies and

Nacional de La Plata also teaching at the universities of La Plata and Buenos Aires (UBA).

develop his research and teachings.


This article is based on memory, but memory is fragile and biased, on photographs

reasons explained above, this article is supported by these three sources.


At memories of the political situation and conditions of Argentine universities

and then his university studies in Biology at the National University of La Plata (Province

Genetics.

actively participated in the movement that promoted the creation of a university in this
distant region.
In 1966 the Organization of American States (OAS) promoted a program to improve

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 3 35


areas such as Ecology and

in relation to improving the teaching of Biology, and the decision to promote ecological and
fundamentally studies.

Genetics as a fundamental area of Biological Sciences.


The person in charge of dictating the

exile of many intellectuals.


In this serious situation, Prof. Dr. Frota Pessoa offered Professor Beltrami the
possibility of doing his postgraduate studies at the University of São Paulo, opening the

Human
Genetics.

one of the many dictatorships and beginning an ephemeral and chaotic democratic period

in favor of creation from the National University of Misiones (1973) and immediately in the

Genetics that started to function in 1975.

As the title of this article says, from 1970 to the present 50 years have passed, 46
Genetics and 41 years since the
Genetics. Today there

his mentor, Prof. Dr. Frota Pessoa, they burned all of us.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 3 36


He made a point, but after many other Bachelors in

professors and researchers.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 3 37


CAPÍTULO 4
DROGAS MAIS CONSUMIDAS NO BRASIL E SUA
RELAÇÃO EM CRIMES CONTRA O INDIVÍDUO:
COMO UM TESTE RÁPIDO AJUDARIA EM CASOS
DE PRISÃO EM FLAGRANTE

Data de aceite: 10/01/2022 José Vanderli da Silva


Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
Taguatinga
Águida Maiara de Brito
Taguatinga, DF
Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
http://lattes.cnpq.br/9684793696420465
Taguatinga
Taguatinga, DF Caio César dos Santos Mognatti
http://lattes.cnpq.br/9974074193835939 Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
Taguatinga
Lustarllone Bento de Oliveira
Taguatinga, DF
Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
http://lattes.cnpq.br/2548302917685608
Taguatinga
Taguatinga, DF Juliana Paiva Lins
http://lattes.cnpq.br/8523196791970508 Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
Taguatinga
Melissa Cardoso Deuner
Taguatinga, DF
Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
http://lattes.cnpq.br/0577086161279377
Taguatinga
Taguatinga, DF Jéssica dos Santos Folha
http://lattes.cnpq.br/1858895763510462 Secretária Municipal de Saúde
Valparaíso, GO
Felipe Monteiro Lima
Hospital CAIS II
Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
http://lattes.cnpq.br/1624049224269863
Taguatinga Sul
Taguatinga, DF Bruno Henrique Dias Gomes
http://lattes.cnpq.br/1716595016675287 Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
Taguatinga
Taguatinga, DF
Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
http://lattes.cnpq.br/1433679199177049
Taguatinga
Taguatinga, DF Erica Carine Campos Caldas Rosa
http://lattes.cnpq.br/7307926945059462 Centro Universitário ICESP
Brasília, DF
Jackson Henrique Emmanuel de Santana
http://lattes.cnpq.br/5179075026961554
Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
Taguatinga Marcela Gomes Rola
Taguatinga, DF Faculdade Anhanguera de Brasília – Unidade
http://lattes.cnpq.br/0551045014158520 Taguatinga
Taguatinga, DF
http://lattes.cnpq.br/5551200316101130

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 38


RESUMO: O consumo de

adicto sejam bem estabelecidos, ainda é difícil mensurar como o comportamento do indivíduo
usuário de drogas pode ser afetado pelo uso constante dessas substâncias. Os indivíduos
tidos como adictos são considerados os mais propensos a cometerem crimes, sobretudo
crimes de caráter violento, sendo além de um problema de saúde pública, um problema
para o sistema penal e carcerário. Devido ao caráter nóxio das substâncias de abuso, estes
indivíduos podem ser caracterizados como inimputáveis legais, em decorrência de o vício
ser considerada uma doença que requer tratamento e monitoramento do indivíduo viciado,
em alguns casos é solicitada a inimputabilidade legal de modo a levar a defesa do celerado
a solicitar uma pena alternativa por alegar que este indivíduo cometeu o crime sob uso de

traçar a importância do desenvolvimento de um teste rápido para a detecção de drogas no

forenses.
PALAVRAS-CHAVE: Drogas; Drogadição; Vício; Crimes; Análises Forenses.

MOST CONSUMED DRUGS IN BRAZIL AND THEIR RELATIONSHIP IN CRIMES


AGAINST THE INDIVIDUAL: HOW WOULD A QUICK TEST HELP IN FLAGRING
PRISON CASES
ABSTRACT: Drug use is currently a public health problem, although its mechanisms of action

constant use of these substances. Individuals considered to be addicts are considered the

a public health problem, a problem for the penal and prison system. Due to the noxious
nature of substances of abuse, these individuals can be characterized as legal inimputable,
as addiction is considered a disease that requires treatment and monitoring of the addicted
individual, in some cases legal inimputability is requested in order to lead to the defense the
defendant to request an alternative penalty for alleging that this individual committed the crime

the importance of developing a rapid test for the detection of drugs in the body, aiming to

custody that can be supported by forensic testing and analysis.


KEYWORDS: Drugs; Drug addiction; Addiction; Crimes; Forensic analysis.

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS


GABA Ácido Gama-Aminobutírico
LSD Dietilamida do Ácido Lisérgico

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 39


OMS Organização Mundial da Saúde

1 | INTRODUÇÃO
O consumo de drogas é um assunto de grande importância para as áreas de saúde,
segurança e educação, visto que este problema é tratado como uma epidemia, não só
no Brasil como no mundo. A maior preocupação atual com o cenário de abuso de drogas
ou substâncias entorpecentes é o mecanismo de tolerância e dependência geradas pelo
organismo do usuário de drogas. Deste modo, a dependência é a necessidade que o
indivíduo tem de voltar a utilizar a substância após ter cessado seu efeito no organismo,

alimentada pelo mecanismo de ação da substância, bem como pelos seus efeitos ao
organismo.
Atualmente tratado como questão de saúde pública, a situação de pessoas
dependentes de drogas é vista ainda sob o olhar proibicionista, porém estudos comprovam
que drogas como a maconha podem ser usadas em caráter medicinal. Desta maneira, não
é correto recorrer somente ao caráter ilícito da droga, embora questões sociais delituosas
que envolvem o usuário da mesma pode sim ser caracterizados como ilicitude.

comportamento do indivíduo e o caráter legal que enquadra pessoas que cometem delitos,
sobretudo crimes de caráter violento sob o efeito de substâncias entorpecentes que este

a elucidação de como o trabalho policial, pericial e judicial seria facilitado, caso o estado

drogas.
Considerando o mecanismo de ação dos principais entorpecentes utilizados em
território brasileiro, seria possível, de acordo com a ciência, estabelecer se a droga agiu
de modo a favorecer o cometimento desse ato? É possível traçar um paralelo em como a
ciência e como o código penal brasileiro encara os indivíduos que cometem crimes sob o
efeito neuroquímico de drogas de abuso, o uso de entorpecentes pode ser tratado como
agravante ou atenuante?
De maneira geral, os usuários de entorpecentes, independentemente de sua
natureza, são mais propensos a cometer crimes, sobretudo crimes de caráter violento,
deste modo, este trabalho tem como propósito fazer um levantamento de como a ciência

perante o uso de drogas atualmente.


Ao longo deste capítulo, será abordado ainda se há algum tipo de detecção de

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 40


detecção dos principais entorpecentes consumidos no Brasil seria uma alternativa cabível
para melhor determinação da condição do indivíduo no ato da prisão, pois sabendo do
grau de entorpecimento em que o autor do crime cometeu o delito poderia aplicar mais
precisamente a penalidade incumbida ao crime. Trazendo assim uma forma de a ciência
ajudar nas outras áreas do conhecimento, possibilitando a execução das áreas correlatas
em ciências da saúde, trabalhando à serviço da sociedade e das demandas que ocorrem,
não ocasionalmente e permitindo a execução interdisciplinar das diversas áreas do
conhecimento.
Sendo assim, este capítulo foi elaborado de modo a descrever como as drogas
agem no organismo, e buscará fazer um breve levantamento de como os usuários de
drogas são tratados pelo sistema policial e jurídico, para que a ciência seja utilizada de
modo a contribuir positivamente com pesquisas e estudos nesta área. O principal foco
deste capítulo seria os estudos mais recentes, dados e levantamentos dos últimos anos,

na pesquisa de artigos das últimas duas décadas.

2 | OS MECANISMOS DE DEPENDÊNCIA DAS DROGAS DE ABUSO


Ao longo dos diversos períodos da humanidade, o uso de substâncias que são
capazes de alterar o nível de consciência, trazer estados de relaxamento, euforia ou alterar
a forma de interação interpessoal dos indivíduos foram relatados inúmeras vezes. Em
algumas culturas o uso destas substâncias era aplicado como ritos de passagem, como
tratamentos medicinais ou ainda como formas de acessar o sagrado daquela cultura. Tais

com intuito recreativo (FARIA, 2013).


Por muitos anos, o uso de drogas era tachado apenas como uma compleição do
caráter, ou seja, a sociedade encarava tal inclinação como má índole, proveniente de

como médicos e magistrados começarem a notar que havia uma grande diferença
entre os indivíduos que usavam substâncias como o álcool esporadicamente, possuíam
comportamentos distintos dos os indivíduos que utilizavam esta substância de forma
descontrolada, os alcoólatras, e sugeriram que estes requeriam mais atenção e tratamento
(GARCIA-MIJARES; SILVA, 2006).
O termo “drogas” é utilizado para designar substâncias que são capazes de afetar

seja em caráter laboral, suas relações interpessoais ou ainda o caráter econômico do


drogas de acordo com a sua

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 41


nas atitudes dos indivíduos que delas fazem uso (OMS, 2018).
O conceito de
o organismo funciona, estas mudanças podem ocorrer no âmbito físico, emocional e
psicológico do indivíduo. Esta variação também permeia o caráter social do indivíduo, visto
que a adição a drogas pode gerar alterações em seu comportamento e em como esse
indivíduo se comporta perante a sociedade. (FARIA, 2013)
Embora o caráter nóxio gere diversas condições insalubres a seus usuários, a
procura por estas substâncias estão se tornando cada vez mais recorrentes na sociedade
atual. As substâncias que são consideradas portas de entrada para outras drogas mais
pesadas são o álcool e o tabaco, drogas que possuem livre comércio em grande parte dos
países (GUERRI, 2012).
Atualmente dispomos de dez classes distintas de drogas, são elas: álcool,
cafeína, Cannabis, alucinógenos, inalantes, opióides, sedativos, hipnóticos e ansiolíticos,

de acordo com seu funcionamento no organismo e/ou em decorrência da sua origem


(AMERICAN PSYCHIATRIC ASSOCIATION, 2014).

que o consumo de drogas em território nacional é um problema atual e crescente. Com


a última atualização do Relatório Brasileiro sobre Drogas, apresentado em 2010 e com
dados coletados em cerca de sete anos, o panorama de ilicitude social já era considerado

fenômeno social e econômico, o documento apresentado foi elaborado com o intuito de


traçar um panorama, bem como salientar a necessidade de pesquisas e estudos acerca
deste fenômeno complexo e que vem tomando proporções maiores a cada ano que passa
(DUARTE; BARROSO; STEMPLIUK, 2009).
Drogadição ou ainda adição a drogas é o termo utilizado para se referir ao indivíduo
que usa constantemente substâncias entorpecentes ou psicotrópicas, gerando no mesmo
um quadro de dependência que pode afetar seu estado de saúde geral, bem como o
contexto social e psicológico do indivíduo (LINS; SCARPARO, 2010).
Estes sintomas são persistentes e alguns traços podem ser observados mesmo
após o afastamento da substância ou retirada total da mesma, onde sua retirada abrupta
e total pode acarretar no que é conhecido com abstinência e resultar em uma recaída. Isto

a substância provoca no organismo. A adição pode ser caracterizada ainda por padrões

desejo de uso da substância e até mesmo ocasionar defasagens crescentes e recorrentes


no cotidiano do indivíduo. O que pode gerar prejuízos em suas relações, perda econômica,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 42


deslocamento social dentre outras diversas perdas e prejuízos para o usuário (AMERICAN
PSYCHIATRIC ASSOCIATION, 2014).
No âmbito social, novas discussões vêm ganhando fôlego em virtude do debate
acerca da necessidade de descriminalizar a droga. Esta discussão é embasada com o
intuito de deslegitimar o proibicionismo punitivo, que são estratégias que visam a redução
de danos sociais e de saúde pública, visando principalmente a ordem social, porém este
proibicionismo tem seus efeitos, e podem exceder a lógica punitiva (SILVA; MAIA, 2016).
A adição é um problema latente em diversas sociedades, este transtorno acomete
jovens, adultos e idosos das diferentes classes sociais, níveis de instrução e não está
associada somente ao uso de drogas. O termo adição vem sendo utilizado mais
frequentemente que o termo viciado, esta adaptação ocorreu porque para uma pessoa
adicta, o termo viciado tem uma entonação negativa o que pode ocasionar em um
constrangimento e perturbar a dignidade do indivíduo (FAVARO; PAULA, 2012).
Atualmente o maior debate acerca da adição está pautada na lei 10.2016/2001, que
caracteriza o uso de drogas dentro do âmbito das doenças mentais, o que permite ao usuário
um amparo legal acerca do tratamento de sua condição de usuário ou de dependente.

a distinção entre o uso, abuso e a dependência de drogas. Vale ressaltar que o termo
“doença” vem sendo substituído pela expressão “transtorno”. Esta compreensão auxilia
tanto o tratamento de saúde do indivíduo como a atuação do poder judiciário no caso de
envolvimento deste indivíduo em situação de ilicitude (FARIA, 2013).

provocada pelas consequências do uso indiscriminado destas substâncias, que provocam

se no organismo, pois entendendo como este mecanismo ocorre, pode-se criar alternativas
que facilitem o tratamento e remissão desses usuários (FERREIRA et al., 2017).
Considerando um indivíduo dependente, não é possível levar em consideração

observados nos diversos campos da vida do indivíduo, sendo assim desenvolvidos estímulos
que modulam o mecanismo de dependência do mesmo. Estes mecanismos podem reforçar
a necessidade do indivíduo de consumir tais substâncias, podendo ser observado nas
atividades e relações cotidianas do mesmo. É importante salientar que esse mecanismo
de dependência pode ser instaurado após uma série de fatores que colocam o indivíduo
em condições de risco, onde o ponto culminante é o início do abuso de substâncias ilícitas
(CAPISTRANO et al., 2013).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 43


3 | FISIOLOGIA DO VÍCIO DAS PRINCIPAIS DROGAS DE ABUSO UTILIZADAS
EM TERRITÓRIO BRASILEIRO
Além do aspecto social, a adição às drogas provoca uma desordem a nível

pode-se criar alternativas que facilitem o tratamento desses usuários (FERREIRA, 2017).
Alguns estudos apontam que o comportamento aditivo é mais complexo que as teorias

mas ainda assim algumas lacunas carecem de preenchimento. Uma dessas lacunas é
a necessidade de explicação acerca dos motivos que leva uma pessoa, mesmo após
reconhecer os malefícios da droga, continuar a fazer uso da mesma (PEUKER, 2013).
Outras pesquisas apontam que o mecanismo de dependência e drogadição pode ter
um viés genético. Esta carga genética pode estar relacionada tanto na causa motivacional
de iniciar o uso de drogas como no mecanismo de dependência. Alguns estudos, utilizando
pesquisa com gêmeos univitelinos também sugerem que o vício está diretamente
relacionado ao meio em que o indivíduo está inserido (PUPULIM et al., 2015).
O mecanismo de vício mais conhecido é o que está relacionado ao sistema
recompensa, de modo que já é considerada a hipótese de que a via mesolímbica não seja
a única moduladora desse processo. Também são considerados os fatores psicológicos e
químicos do vício. Os fatores psicológicos incluem os desejos profundos em se utilizar de
artifícios exógenos para a melhoria ou manutenção de um estado intrínseco do indivíduo
(seja um estado de humor, um estado depressivo ou até mesmo problemas pessoais),

Alguns estudos apontam que o uso de drogas tem o crescente início precoce, sendo
considerado que quanto mais cedo se dá o primeiro uso, maior as chances de adição, bem
como pior o prognóstico de tratamento e remissão do usuário. Sendo possível estabelecer
que estes usuários possuam intimo envolvimento com acidentes e mortes, podendo incluir
neste último, mortes acidentais, violentas e suicídio, além de uma maior predisposição à
violência de modo geral e à violência sexual. Esses indivíduos podem ainda desenvolver

Considerando que o processo de adição pode ocorrer em qualquer faixa etária,


convém salientar que quanto mais jovem ocorrer o uso, maior a chance de esse uso
culminar em vício. Os mecanismos anatômicos mais diretamente envolvidos no processo
de dependência estão associados aos neurônios dopaminérgicos, ao córtex pré-frontal e
ao núcleo de accubens. Considerando os neurônios dopaminérgicos os maiores envolvidos
no processo de dependência química e também diretamente ligados aos processos de

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 44


Considerando que diversos fatores ativam o sistema de recompensa do cérebro, é
possível traçar um paralelo entre o uso de drogas e a produção do hormônio dopamina.
A Dopamina é produzida de forma aumentada no núcleo de accumbens quando no uso
de drogas, porém convém ressaltar que este sistema pode ser alimentado por diversos
estímulos associados à sensação de prazer, como praticar esportes, comer, ou prática
sexual. As drogas podem agir em diversas vias do sistema nervoso, porém as estruturas
mais efetivas são o sistema mesolímbico, que atua diretamente na ação condicionante de
uso e reuso da substância e o sistema mesocortical que responde diretamente ao efeito da

2017).
No cérebro humano as principais áreas envolvidas no sistema recompensam
são: sistema dopaminérgico mesocortical que regula as funções nervosas e cognitivas
superiores e a capacidade de planejamento e execução de ações, sistema dopaminérgico
(mesolímbico) que se origina na área tegumentar ventral e culminam no núcleo de
accumbens. Ambos os núcleos (mesolímbico e mesocortical) funcionam de forma isolada
e se comunicam entre si, dando origem assim ao sistema recompensa cerebral, tendo a
dopamina, serotonina, noradrenalina, glutamato e ácido gama-aminobutírico (GABA) como
neurotransmissores atuantes desse sistema (BRASIL, 2017).

3.1 Maconha

mundo, porém poucas pesquisas procuraram elucidar as consequências neuronais a longo


prazo pelo uso dessa substância. Os efeitos da substância ativa da Cannabis sativa, mais
conhecida como cannabis ou maconha, podem incluir agitação, inquietação, perda da
capacidade sensorial (ou diminuição da mesma), letargia, prejuízo da memória, perda da
acuidade motriz, aumento do ritmo cardíaco, astenia, além de provocar uma sensibilização
do sistema neurológico, podendo gerar efeitos psicóticos (CRIPPA et al., 2005).
A Cannabis apresenta diversos compostos, porém os canabinóides são os

psicoativo. A substância psicoativa conhecida como tetrahidrocanabinol, ou ainda THC


(delta-9-tetrahidrocanabinol), possui fórmula C21H30O2 é a principal substância ativa da
planta. Este composto confere ao usuário as propriedades conhecidas como alucinógenas
da planta, provoca ainda letargia, aumenta o apetite e altera o estado psicológico do usuário
(VANJURA et al., 2018).
Após a descoberta do THC, foi possível detectar que o cérebro possui receptores
próprios para os canabinóides, e que quando esses receptores são sensibilizados pela
presença do componente supracitado, alguns neurotransmissores deixam de receber
estímulos, ou seja, quando os receptores canabinóides são ligados à molécula de THC,
outros estímulos são descontinuados, impedindo a expressão desses neurotransmissores

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 45


canabinóides (VANJURA et al., 2018).

3.2 Cocaína
Extraída das folhas de Erythroxylum coca, mais conhecida como coca, é uma
substância com poder altamente viciante, pois a sua ação está diretamente ligada ao
sistema modulador da dopamina, ou seja, um potente estimulante do sistema nervoso
central. Suas primeiras utilizações foram empregadas na medicina, em decorrência da
observação da atividade anestésica do extrato da folha de coca. Em decorrência de seu
efeito anestésico, foi amplamente utilizada no século XIX, porém seu uso foi descontinuado
posteriormente tendo em vista que sua utilização havia ultrapassado a barreira médica e que

viciante, pelos efeitos alucinógenos e pelo estado de euforia que a droga provoca (LUFT;
MENDES, 2007). O mecanismo de ação desta droga é caracterizado pelo alto poder de
penetração nas membranas celulares, atingindo rapidamente a barreira hematoencefálica,
sendo posteriormente distribuída por todo o organismo. A hidrólise enzimática induz a
produção de benzoilecgonina, metil-éster ecgonina e resulta na produção de ecgonina, e
são rapidamente metabolizadas pelo organismo. Possui ainda comportamento de amina
e sua ação é indireta, ou seja, não atua nos receptores adrenérgicos ou dopaminérgicos,
desta maneira, a biodisponibilidade dos neurotransmissores são aumentadas na fenda
sináptica. A recaptura de noradrenalina e dopamina é inibida, facilitando o acúmulo de
noradrenalina ou dopamina nas fendas sinápticas. Este processo de recaptura é o principal
indutor de euforia e pode estar empregada no mecanismo viciante da droga (LIZASOAIN
et al., 2002).

3.3 Crack

se na forma de uma pasta-base, que é o resultado da conversão do cloridrato (pó) em uma


pasta de teor alcalino. Seu uso atualmente é considerado um problema de saúde pública
e sua utilização é difundida majoritariamente nas classes menos abastadas da sociedade
(PULCHERIO et al., 2010).

pasta-base. É um produto de elevada toxicidade, pois contém impurezas em demasia,


estas impurezas são muitas vezes, metanol, éter, acetona, ácido benzoico, querosene,

indivíduo, estas substâncias também são responsáveis pelo mecanismo viciante do uso
desta droga (CASTRO et al., 2015).

subproduto da cocaína, porém a utilização da pasta-base dá-se por meio de inalação da

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 46


fumaça. Ao fumar a droga, os capilares do pulmão facilitam a entrada da substância no
organismo, e atuam diretamente nos neurotransmissores de dopamina de modo que a
neurotransmissão dopaminérgica ativa o sistema de recompensa cerebral, sendo observada
que ocorre de modo direto sobre os neurônios que modulam a atividade de glutamato,
GABA, adrenalina, serotonina e receptores opióides. Desta maneira, os efeitos visíveis

mais rápido e sua duração no organismo é de menor duração (PULCHERIO et al., 2010).

3.4 LSD
Considerado um poderoso alucinógeno, o LSD (dietilamida do ácido lisérgico),
foi descoberto em meados do século XX, após o cientista suíço Albert Hofmann obter
dietilamida após inserir ácido lisérgico a uma experiência que o mesmo estava estudando.
Ao inalar o produto de sua reação, Hofmann sentiu-se entorpecido, alucinação, delírio,
após a experiência, Hofmann concluiu que aquele seria um potente alucinógeno. Com
o movimento hippie o então conhecido como LSD (uma abreviação de sua substância

artístico e cultural (ROBIN et al., 2016).

3.5 Anfetaminas
Obtida a partir da obtenção de efedrina, substância contida na planta Ephedra
vulgaris, encontrada em regiões da Europa, Ásia e África foi utilizada primeiramente
como medicamento e posteriormente descoberto um isômero denominado de anfetamina
mesclado com diversos outros compostos. Começou a ser utilizado como antidepressivo
e redutor de apetite, sendo capaz de diminuir os efeitos do cansaço e pela sensação e
revigoramento, o composto foi amplamente difundido como medicamento e utilizado por
soldados da II Guerra Mundial (LÓPEZ-MUÑOZ, et al., 2011).

4 | DROGAS E CRIMINALIDADE
Conhecida como “lei de drogas”, a lei 11.343 de 2006 tem o objetivo de prevenir o
uso de ilícitos, discorrendo também sobre a reinserção do indivíduo que foi detido sob pena
de reclusão por uso de drogas. Este artigo discorre ainda dos termos que se enquadram
drogas, produção independente delimitando os termos dos mesmos
(BRASIL, 2006).
Atualmente a política de drogas do Brasil, tem sido grandemente discutida e estudada,
dada a subjetividade de como o Código Penal Brasileiro encara o indivíduo usuário de

segundo os estudiosos sociais encaram como “racismo institucionalizado” o fato de ser

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 47


sempre os menos abastados sociais, os moradores de regiões periféricas e os indivíduos
negros os mais duramente penalizados, com sentenças maiores e uma menor possibilidade
de reinserção social; quadro este que é denominado como “ação seletiva do sistema penal”
(GUADANHIN; GOMES, 2017).
O ponto crucial é a consequência do sistema proibicionista brasileiro, pois o mesmo
busca a manutenção da ordem social e não a construção da referida ordem, sobretudo
utilizando de estratégias repreensão destinadas a execução da polícia. A militarização por
sua vez anula a identidade do indivíduo, e tem como objetivo exterminar o alvo, atitude

negociação dos interesses dos cidadãos, mesmo que divergentes, de modo a apaziguar as
diferenças entre as partes policiais, jurídicas e sociais (LIMA, 2004).
Sabendo que a criminalidade é um problema estrutural de grandes proporções, que

drogas, bem como o uso indiscriminado de


substâncias ilícitas. Porém ainda é difícil estabelecer uma relação direta entre a criminalidade
e os efeitos das drogas no organismo, de fato. Isto pode ocorrer por diversos fatores, mas

Sendo assim, é possível estabelecer que ainda faltem estudos de casos e aplicabilidade
drogas e criminalidade (SANTOS;
KASSOUF, 2007).
Considerando o cenário dos indivíduos encarcerados, é possível relacionar
diretamente as causas das detenções ao envolvimento direto ou indireto, em sua maioria,
ao uso, porte ou transporte de drogas. Porém diferentemente do que se imagina, não é o
uso da droga que leva o indivíduo a cometer atos criminosos e sim a situação onde esse
indivíduo se encontrava antes mesmo do vício ser instalado (TORRES; GOMES, 2005).
A relação entre drogas e criminalidade é intimamente relacionada, considerando que
a ocorrência de crimes cometidos por indivíduos que utilizam drogas é consideravelmente

com à pratica de delitos. Alterando o quadro geral de organização e funcionamento do


indivíduo, este se torna mais propenso à criminalidade. O adito possui um panorama geral

assim sua tolerância em suportar descargas emocionais menores que pessoas que não
fazem uso de substâncias ilícitas (CAPISTRANO et al., 2013).

relacionados às drogas, a necessidade de manter o uso da substância em questão


e aumentar o uso ou frequência do uso da droga são as mais recorrentes. Também é
encontrada a argumentação sobre cometer o delito em decorrência do uso, visto que uma

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 48


atitude do usuário (MANITA, 2000).

completamente atualizado, carecendo de estudos, dados e levantamentos empíricos mais


concretos. Sendo os dados utilizados para embasamento nacional espelhados em estudos
e pesquisas ocorridas no exterior (WELLAUSEN, 2009).
Os dados nacionais acerca da incidência do uso de drogas e o cenário de agressão
e crimes violentos provenientes de laudos ou levantamentos dos Institutos médico-legais

levantamentos, sobretudo levantamentos de uso ou abuso de drogas em exames de


necropsia poderiam ajudar nas determinações do consumo de substâncias ilícitas e os
crimes contra o indivíduo, estes por sua vez poderiam ser cruciais para a formulação e
melhoria das políticas cíveis (DRUMOND; SOUZA; HANG-COSTA, 2015).
O teste da toxicologia do indivíduo vitimado por homicídio não é considerado um
elemento fundamental no exame necroscópico e este não faz parte dos elementos de
cômputo criminal, sendo empregado mais frequentemente em pesquisas de saúde do
que em pesquisas de óbito. Os métodos utilizados para a detecção de drogas em âmbito

espectrometria, e estes são considerados testes de elevado valor e complexo funcionamento


sendo inviáveis seus usos para averiguação de causa mortis. Deste modo, as pesquisas
de

sejam rotineiramente empregados, estes, caso fossem realizados, produziriam provas com
verossimilhança ímpar, implicando a presunção de veracidade da prova pericial (DAYRELL;
CAIAFFA, 2012).
Uma das etapas cruciais para a sustentação das provas obtidas por meios periciais

sustentar as evidências encontradas no exame pericial. Estas evidências podem ser


comprovadas por meio de testes e análises forenses, que possuem um rigoroso critério
de coleta e pesquisa do material coletado. Desta forma, o trabalho do perito criminal deve

de forma correta para que tais provas sejam utilizadas de forma circunstancial no processo
(CAIAFFA, 2012)

qualitativa de substâncias, o mesmo utiliza-se de amostras biológicas para a detecção


da interação entre antígenos e anticorpos no organismo. Utilizando técnicas analíticas
para a detecção de drogas no organismo, as mesmas podem possuir uma aplicabilidade
efetiva no âmbito forense. Por se tratar de uma técnica simples, de fácil execução e baixo
custo, seu emprego pode gerar resultados satisfatórios em pesquisa de drogas de abuso.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 49


por respostas rápidas para a detecção destas substâncias no organismo, estes testes
poderiam ter sua implementação inclusa nas análises preliminares na detecção de ilícitos,
teste que poderia ser empregado efetivamente na análise pericial e compor a cadeia de
custódia de forma circunstancial. Este exame por exibir uma alta taxa de sensibilidade e
baixa frequência de resultados falso-positivos, conforme testes realizados em laboratório
pode ser uma aposta promissora para o futuro da pericial criminal no Brasil (PINTO et al.,
2015).

5 | CONSIDERAÇÕES FINAIS
O consumo de drogas no mundo atual vem sendo grande cenário de discussão,
em parte pelo crescente aumento do número de usuários e também pelo aumento das
substâncias utilizadas pelos mesmos, caracterizando assim um problema de saúde pública.

que já existem acerca das principais drogas de abuso consumidas no Brasil e as técnicas
de detecção das mesmas em caso de prisão.
Dentre a população, os indivíduos que se enquadram como usuários de drogas
são considerados os indivíduos que mais cometem crimes, sobretudo crimes de caráter
violento. Considerando as drogas mais utilizadas em território nacional, torna-se possível
estabelecer como essas drogas agem no organismo e se as mesmas são capazes de
alterar o comportamento do indivíduo, seja para adquirir mais droga ou no comportamento
geral do usuário, partindo da premissa que estas substâncias possuem efeito direto no
sistema nervoso central.
Tendo conhecimento da lei intitulada “lei de drogas” atualmente em vigor no Brasil e
considerando a subjetividade do código penal brasileiro, é possível estabelecer que somente

que o sistema prisional permite que um indivíduo adicto receba uma pena alternativa, em
centros de tratamentos para usuários de drogas por poder considerá-lo inimputável legal,

vício, ou ainda o estado em que o mesmo cometeu tal ato delituoso torna-se imprescindível
para o desdobramento legal com efetividade na punição do delinquente.
Atualmente, com base nas pesquisas realizadas para execução deste trabalho, não

do indivíduo, tornando ainda mais difícil a determinação sobre o estado de lucidez do


mesmo no ato da prisão. Deste modo, são cabíveis maiores estudos sobre um possível

forma de um teste rápido, visando direcionar ainda melhor a ação policial, pericial e jurídica
nos trâmites punitivos legais do celerado.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 50


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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 4 53


CAPÍTULO 5
IMPLICAÇÕES DA VACINAÇÃO CONTRA A
COVID-19 EM GESTANTES E PUÉRPERAS EM
CONTEXTO PANDÊMICO: UMA REVISÃO DE
LITERATURA

Data de aceite: 10/01/2022


Data de submissão: 08/11/2021 objetivos. Para a realização desse trabalho foram

e periódicos, delimitados entre o período de


janeiro de 2020 a julho de 2021. Este rastreio
Ana Luíza Moraes Oliveira
foi executado nas bases de dados: Google
Universidade Iguaçu Campus V
Itaperuna – Rio de Janeiro
http://lattes.cnpq.br/5713134308334474 (Scielo), National Library of Medicine (PubMed),
Biblioteca Virtual da Saúde (BVS), Observatório
Jéssica de Moutta Gomes Obstétrico Brasileiro COVID-19 (OOBr
Universidade Iguaçu Campus V Covid-19). Apesar de os estudos ainda serem
Itaperuna – Rio de Janeiro
http://lattes.cnpq.br/2293222853552044 de pesquisas sobre a temática no campo

os artigos pré-selecionados defendem de forma


enfática a vacinação de mulheres grávidas e
RESUMO: O atual cenário de crise sanitária e
puérperas contra o vírus Sars-Cov-2 devido à
humanitária de repercussão mundial ocasionada
vulnerabilidade desses indivíduos no que se
pelo novo coronavírus tem gerado uma exaustiva
refere ao contexto pandêmico.
PALAVRAS-CHAVE: COVID-19; Gestantes;
Puérperas; Vacinação.
massa a população, sobretudo, os indivíduos
pertencentes aos grupos prioritários. Embora
gestantes e puérperas estejam incluídos neste IMPLICATIONS OF VACCINATION
grupo, os meios de comunicação reverberam e AGAINST COVID-19 IN PREGNANT AND
enfatizam a todo instante que estudos acerca PUERPERAL WOMEN IN A PANDEMIC
da vacinação de mulheres nessas condições CONTEXT: A LITERATURE REVIEW
ainda não foram conclusivos, em função de elas ABSTRACT: The current scenery of sanitary and
terem sido excluídas de todas as pesquisas, até
então publicadas, que envolviam vacinas contra
a COVID-19. Esse fato repercute na pulverização
de dúvidas na atmosfera social acerca da in favor of the production of vaccines, in order
vacinação nesse to immunize the population in masse, especially
individuals belonging to priority groups. Although
implicações da vacinação contra a COVID-19 em
gestantes e puérperas na contemporaneidade. this group, the media reverberate and emphasize
O presente estudo alicerçou-se na pesquisa de at all times that studies on the vaccination of

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 54


COVID-19. This

vaccination in this group. This study aims to identify and analyze the implications of vaccination
against

(PubMed), Virtual Health Library (BVS) and the Brazilian Obstetric Observatory COVID-19
(OOBr Covid-19). Although the studies are still inconclusive and there is a negligible amount

context.
KEYWORDS: COVID-19; Pregnant Women; Postpartum Women; Vaccination.

1 | INTRODUÇÃO

informações sobre o desenrolar da catástrofe mundial gerada pelo vírus Sars-Cov-2.


Esse atual cenário de crise sanitária e humanitária de repercussão mundial

sobretudo, os indivíduos pertencentes aos grupos prioritários.


De acordo com os dados do Observatório Obstétrico Brasileiro Covid-19 (OOBr
Covid-19) houve uma elevação de mortes de grávidas e puérperas em 2021, em relação

de mulheres nessas condições, adotou-se a inclusão dessas mulheres no grupo prioritário


nas campanhas de vacinação do novo coronavírus (MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2020; OOBr
Covid-19, 2021).
Embora gestantes e puérperas estejam incluídos neste grupo, os meios de
comunicação reverberam e enfatizam a todo instante que estudos acerca da vacinação de
mulheres nessas condições ainda não foram conclusivos, em função de elas terem sido
excluídas de todas as pesquisas, até então publicadas, que envolviam vacinas contra a
COVID-19. Esse fato repercute na pulverização de dúvidas na atmosfera social acerca da
vacinação nesse grupo.
Diante do exposto, a questão-norteadora que encaminhou o estudo está relacionada

Sars-CoV-2.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 55


da vacinação contra a COVID-19 em gestantes e puérperas na contemporaneidade.
Desse modo, entende-se que a
de enfrentar o novo coronavírus, mesmo ainda perdurando na atmosfera social o dilema
quanto à promoção de forma segura desses imunizantes as gestantes e puérperas no
Brasil.

2 | METODOLOGIA
Na perspectiva metodológica, o presente estudo alicerçou-se na pesquisa de

período de janeiro de 2020 a novembro de 2021. Este rastreio foi executado nas bases de

Medicine (PubMed), Biblioteca Virtual da Saúde (BVS) e o Observatório Obstétrico Brasileiro


COVID-19 (OOBr Covid-19). Após a leitura prévia dos resumos dos artigos rastreados, 19

artigos foram selecionados para compor o artigo de revisão por serem mais adequados aos
objetivos propostos. Logo em seguida, estes estudos alvos da seleção foram lidos na íntegra,
assim como agrupados conforme o modelo clássico de categorização do conhecimento,
baseado nas ideias aristotélicas. Esse modelo consiste em uma organização em que “as

desta forma, nenhum membro pode ser considerado melhor exemplo da categoria que os
demais” (ÂNGELA, 2010, p. 112 e 113). Nesse panorama, as seguintes categorias foram
formuladas para a análise:
a) A vulnerabilidade de gestantes e puérperas em contexto pandêmico;

b) Implicações da vacinação contra o novo coronavírus em grávidas e puérperas;

c) Relação médico-paciente na pandemia da COVID-19

3 | RESULTADOS E DISCUSSÃO

3.1 A vulnerabilidade de gestantes e puérperas em contexto pandêmico


Tanto a gestação, quanto o período puerperal são fases únicas e ímpares da vida de
uma mulher sendo marcadas por um novo dimensionamento de vida, uma vez que nesses
momentos ocorrem diversas rupturas e construções, sejam nos papéis sociais, sejam nos
âmbitos emocionais e biológicos. Portanto, em função dessa mudança intrapessoal somado

como as puérperas são caracterizadas como um grupo vulnerável no contexto pandêmico


da COVID-19 (ABDEL; CAPEL, 2015; APARECIDO et al., 2021; MAMBER et al., 2020).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 56


Vindo de encontro a esse pensamento, Liu et al., (2020) sugerem que se comparado
a mulheres não gestantes, as mulheres gestantes possuem elevado risco de adquirir a forma
mais grave da infecção do vírus SARS-CoV-2. Logo, a fragilidade relacionada às condições

demasiadamente a susceptibilidade desse grupo à aquisição do vírus (APARECIDO et al.,


2021; MAMBER et al., 2020; ELLINGTON MMWR, 2020; PANAGIOTAKOPOULOS MMWR,
2020; MASCARENHAS VHA, et al., 2020).
Em contrapartida, pelo estudo elaborado por Breslin et al., (2020), na qual foi
realizada uma coorte retrospectiva com 43 gestantes positivas para SARS-CoV-2 em 3

as 14 pacientes eram assintomáticos e rastreados de rotina antes do parto. De uma forma


geral, 86% apresentaram nenhum sintoma ou manifestações clínicas leves, 9,3%, por sua
vez, sintomas moderados e 4,7% sintomas graves.

às manifestações mais comuns nesse grupo de estudo, de acordo com as informações


obtidas pelo levantamento realizado pelo Observatório Obstétrico Brasileiro Covid-19
(OOBr Covid-19), notou-se que uma média de aproximadamente 10 gestantes e puérperas
faleceram por semana em 2020, correspondendo a um total de 453 mortes no ano passado
em 43 semanas epidemiológicas. Quando referente ao ano de 2021 esse cenário agravou-
se ainda mais, porque a média de óbitos por semana alcançou o quantitativo de cerca de
25 gestantes e puérperas, sendo esses dados obtidos até 10 de abril de 2021, de modo a
totalizar 362 mortes neste ano durante 14 semanas epidemiológicas.
Conforme os dados que passaram pela análise da ONU, medidas visando a
promoção de cuidados na gravidez assim como administradas aos recém-nascidos tiveram
sua interrupção em cerca de metade dos países das Américas ao longo da pandemia.
Esse cenário alarmante só ampliou a condição de vulnerabilidade desse grupo em questão
no tocante à aquisição de infecções respiratórias como a COVID-19 e possuindo maior
probabilidade de desenvolver sintomas mais graves que podem acarretar em risco de vida,
seja da criança, seja da mãe (OPAS, 2021; FERLA et al., 2021).
Outrossim, mergulhando-se no cenário socioeconômico do Brasil e colocando em
foco as mulheres do país durante esse panorama pandêmico, pode-se extrair da literatura
que a pandemia tem sido vivenciada de forma distinta e de acordo com o gênero e as

feminino no decorrer da pandemia tem sido vítima da sobrecarga de trabalho e cuidados,


ora domésticos, ora da própria saúde e de familiares. Esse fardo pesado lançado sobre os
ombros das mulheres também se faz presente no grupo de mulheres grávidas e mães de
recém-nascidos de modo que favorecem à susceptibilidade desse grupo a doenças como
a COVID-19, mas também as psicopatologias. Logo, comprometem a saúde das mulheres
de diversas maneiras e aumentam a demanda de cuidados por esse gênero acarretando no

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 57


crescimento da frequência de procura por sistemas de saúde. Entretanto, o acesso à saúde
de qualidade e que satisfaça as necessidades dessas mulheres ainda está restrito aquelas
que são detentoras de poder aquisitivo, uma vez que o SUS ainda não é capaz de suprir
dignamente a população (FERLA et al., 2021; WERMELINGER et al., 2010).
Embora houvesse diversos fatores que priorizassem as grávidas e as mães que
amamentam no que tange à vacinação, em primeiro momento dos estudos e de campanha
de vacinação para a COVID-19 esse grupo se viu excluído. Isso aconteceu em função

tocante aos efeitos colaterais dessas vacinas na saúde materno-fetal (VAN SPALL, 2021).
Já em um segundo momento pandêmico, a
decisão compartilhada entre elas e seus médicos.

3.2 Implicações da vacinação contra o novo coronavírus em grávidas e


puérperas
A COVID-19 é um surto ativo (CRAIG et al., 2020). Pesquisas mostram que devido
a suas condições, mulheres no ciclo gravídico puerperal apresentam um risco elevado
de apresentar formas graves da doença, resultando em internação, cuidados intensivos,
ventilação mecânica, parto prematuro, além de abortamento e morte (SÁ et al., 2021).

desenvolvimento da patologia causada pelo novo Coronavírus tem por base o conhecimento
prévio acerca de doenças infecciosas surgidas ao longo do período gestacional, como

(RODRIGUES et al., 2021).


Considerando a relação do vírus SARS-CoV-10 com o aumento da morbidade
materna, mortalidade na gravidez e riscos ao bebê. A Sociedade para Medicina Materno-
Fetal (SMFM), National Institutes of Health (NIH) e a National Academy of Medicine têm
defendido que a melhor abordagem para proteção de grávidas e lactantes é por meio da
vacina (CRAIG et al., 2020).
Embora as mulheres desse grupo não tenham participado das pesquisas iniciais
das vacinas, testes posteriores que foram realizados, demonstraram, aparentemente, a

transferência de anticorpos para fetos e recém-nascidos (RODRIGUES et al., 2021).


Normalmente, a vacinação de mulheres grávidas é baseada no aumento dos riscos
que essas infecções representam para a mãe e/ou bebê. Outras vacinas são aprovadas
em todo o mundo para circunstâncias especiais quando o risco de exposição a uma grave
doença é alto, como no caso da meningocócica A e febre amarela (CRAIG et al., 2020).
Sob essa ótica e tendo como base o histórico de outras experiências de administração
de vacinas durante a gravidez, sugere-se e depreende-se que podemos esperar uma

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 58


COVID-19 em mulheres grávidas em comparação com
mulheres não grávidas (SOCIETY FOR MATERNAL-FETAL MEDICINE, 2020).
As vacinas são imunogênicas e os efeitos colaterais esperados pós-vacinação
são geralmente leves a moderados e, geralmente, ocorrem nos primeiros 3 dias de
vacinação e se resolvem em 1 a 2 dias, com presença de dores no corpo e na cabeça.
Pacientes grávidas que apresentam febre após a vacinação deve ser aconselhada a tomar
paracetamol (SOCIETY FOR MATERNAL-FETAL MEDICINE, 2020).
O aconselhamento da vacinação deve incluir o risco teórico de danos ao feto. As
vacinas de mRNA são consideradas de baixo risco, porém, a tomada de decisão individual
precisa ser equilibrada com os riscos associados à vacinação e a possibilidade de infecção
materna por SARS-CoV-2 (SOCIETY FOR MATERNAL-FETAL MEDICINE, 2020).
A proteção do recém-nascido contra a infecção depende principalmente da imunidade
inata neonatal, além das respostas e anticorpos adquiridos por via transplacentária materna.
Estudos já evidenciaram a presença de anticorpos gerados, tanto pela vacina, quanto pela
doença, no cordão umbilical e leite materno (FLANNERY et al., 2020).

em Israel, encontrou nas amostras dos respectivos leites maternos uma secreção robusta
de SARS-CoV-2 anticorpos IgA e IgG, 2 semanas após recebida a dose. Esse achado
sugere potencial efeito protetor contra infecção da criança. Alguns outros estudos também
evidenciaram achados semelhantes em mulheres infectadas por COVID-19 (PEARL et al.,
2021). Portanto, a imunização materna é de suma importância, sendo capaz de proteger
tanto a mãe, quanto o seu bebê.
Em contrapartida, em maio de 2021, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária
(Anvisa) emitiu nota suspendendo o uso da vacina desenvolvida pela AstraZeneca em
gestantes tendo em vista a investigação da morte de uma gestante vacinada. Porém, esse
é um caso isolado e que ainda não tem comprovações da relação direta entre o óbito e
a vacina. Detalhes sobre a transferência transplacentária da vacina não foram descritos
(ANVISA, 2021).

vacina COVID-19 administrada durante a gravidez, dados igualmente tranquilizadores


quando se trata de bebês nascidos de indivíduos vacinados, além de não possuir impacto
na fertilidade, mulheres grávidas e aquelas que planejam engravidar devem se sentir
vacinação para proteger a si mesmas, seus bebês, suas famílias
e suas comunidades (RODRIGUES et al., 2021).
O desenvolvimento e a aprovação regulatória da vacina COVID-19 estão progredindo
rapidamente. Assim, as informações e recomendações irão evoluir à medida que mais

os estudos sobre a segurança dos imunizantes para a gestante e o feto não serem
conclusivos, a preocupação com a vacinação considerando o mero risco teórico de dano

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 59


uma pandemia (SOCIETY FOR MATERNAL-FETAL MEDICINE, 2020).
Logo, depreende-se da literatura que ainda que haja poucos estudos a respeito da
temática e que ao menos que haja contraindicação, as grávidas e puérperas podem receber
a vacina COVID-19, pois os efeitos colaterais são aceitáveis e não são ameaçadores à vida,
portanto, os riscos teóricos relativos à segurança da vacinação de lactantes não superam
os seus benefícios (SOCIETY FOR MATERNAL -FETAL MEDICINE, 2020; CRAIG et al.,
2020).

3.3 Relação médico-paciente na pandemia da COVID-19


Em consonância a todos os aspectos abordados com relação à vacinação de
grávidas e puérperas, destaca-se como sendo primordial na abordagem desse assunto
a existência de uma relação médico-paciente harmoniosa, pois esse relacionamento é
essencial para o sucesso da promoção e prevenção da saúde desse grupo, sobretudo, em
tempos de pandemia da COVID-19 (FRANCO et al., 2020).

olhar mais humanizado por parte do médico. Quando essa relação está bem fundamentada,

maior aceitação, satisfação e continuidade do cuidado pelo paciente.

necessidades, bem como os contextos socioeconômicos de cada paciente, uma vez que

essencial adequação das devidas orientações sobre a vacinação de acordo com o quadro
clínico e social da paciente. Somado a isso, o médico não pode deixar de comunicar a

grupo de análise tratar-se de uma população de risco no que concerne às complicações


graves da infecção pelo coronavírus. Desse modo, essa atitude de vacinação deve ser feita

mulheres (RUBIN, 2021; MASCARENHAS VHA, et al., 2020; SÁ et al., 2021).


Na contemporaneidade a estratégia mais relevante de prevenção contra a infecção,
seguida pela vacinação, é preserva-se da exposição ao vírus. Tendo isso em vista, o
papel do médico no que tange a informar esse grupo vulnerável é imperativo. Por isso,

lavagem frequentemente das mãos com água e sabão, realização da assepsia com álcool
70% assim como que evite tocar em objetos e em seguida levar as mãos à face, bem como
sempre que possível faça o distanciamento social e o isolamento em caso de suspeitas de
COVID-19 (BRASIL, 2020).
Cabe destacar também que, muito embora haja o reconhecimento da importância

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 60


desse relacionamento médico-paciente, é necessário que as autoridades públicas
governamentais invistam e realizem capacitações, sobre cuidados relacionados à
COVID-19 assim como orientações quanto à administração de vacinas em gestantes e

atuam na atenção primária, secundária e terciária. Com o intuito de romper com os entraves
que ainda prejudicam, tanto o relacionamento, quanto o diálogo de qualidade entre esses
vacinação contra o vírus
Sars-Cov-2.
Ainda nessa linha de raciocínio, depreende-se da literatura e do contexto social
que lançar a responsabilidade para uma decisão compartilhada entre médicos e pacientes
grávidas no que tange optar ou não pela vacinação é um ato de injustiça, visto que o medo
e a insegurança são coletivos, inclusive na tomada de uma decisão de tamanha seriedade
(FERLA et al., 2020).

em relação à autonomia da paciente. Visto que após as devidas orientações e explicações


sobre os riscos e os benefícios, bem como o funcionamento desses imunobiológicos no
organismo das gestantes e puérperas, essas mulheres possuam a autonomia de decisão,
ora pela ocorrência da imunização ativa, ora pela não ocorrência da imunização ativa. Já
que esse princípio da bioética preza pelo indivíduo ter o direito de decisão sobre quaisquer
questões que envolva o seu corpo e sua vida. Por isso, salienta-se a necessidade de mais
estudos envoltos sobre a ação dos imunizantes nesse grupo para que todo o processo
vacinal seja realizado com segurança e sem hesitação (SKJEFTE et al., 2021; RIMMER,
2021; CREMESP, 2004).

4 | CONCLUSÃO

artigos pré-selecionados defendem de forma enfática a vacinação de mulheres grávidas e


puérperas contra o vírus Sars-Cov-2 devido à vulnerabilidade desses indivíduos no que se
refere ao contexto pandêmico.
Entende-se, portanto, que com esse cenário atroz e pandêmico de COVID-19 não é

prazo, ora pela imunização, ora pela não imunização, de gestantes e puérperas. Todavia,
através deste estudo, observou-se que os benefícios da vacinação transcendem aos
possíveis riscos oferecidos por esses imunógenos ao grupo de análise. Destarte, espera-

bem como pesquisas sobre a atuação desses diversos imunobiológicos no organismo de


gestantes e puérperas para que assim a imunização dessas mulheres aconteça de maneira

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 61


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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 5 65


CAPÍTULO 6
EFEITO DO BIOFILME DE Arthrographis kalrae NA
RESPOSTA IMUNE DE MACRÓFAGOS INFECTADOS

Data de aceite: 10/01/2022 Luciene Airy Nagashima


Data de submissão: 08/10/2021 Instituto de Tecnologia do Paraná
Curitiba - Paraná
http://lattes.cnpq.br/5818873020876025

Bianca Dorana de Oliveira Souza Adriane Lenhard-Vidal


Universidade Estadual de Londrina, Centro Universitário Campo Real
Departamento de Ciências Patológicas Guarapuava - Paraná
Londrina - Paraná http://lattes.cnpq.br/3529713931981829
http://lattes.cnpq.br/2433694369223422
Franciele Ayumi Semêncio Chiyoda-Rodini
Janneth Josefina Escobar Arcos Universidade Estadual de Londrina,
Universidade Estadual de Londrina, Departamento de Ciências Patológicas
Departamento de Microbiologia Londrina - Paraná
Londrina - Paraná http://lattes.cnpq.br/2374286387972536
http://lattes.cnpq.br/5495339793287381
Eiko Nakagawa Itano
Bruno Fernando Cruz Lucchetti Universidade Estadual de Londrina,
Centro Universitário do Vale do Araguaia Departamento de Ciências Patológicas
Barra do Garças - Mato Grosso Londrina - Paraná
http://lattes.cnpq.br/7357564854018221 http://lattes.cnpq.br/0678087604864219

Phileno Pinge Filho


Universidade Estadual de Londrina,
Departamento de Ciências Patológicas RESUMO: Arthrographis kalrae é um fungo
Londrina - Paraná
http://lattes.cnpq.br/1339724757657824 neurológica complexa e lesões em diferentes
Mario Augusto Ono órgãos em camundongos. É um fungo considerado
Universidade Estadual de Londrina, raro em humanos, porém em diferentes países já
Departamento de Ciências Patológicas foi descrito em diversas manifestações clínicas
Londrina - Paraná humanas, como ceratites, sinusites, meningites,
http://lattes.cnpq.br/2409390685316192 eumicetoma e onicomicoses. Considerando que
na literatura há poucos estudos sobre os fatores
Ayako Sano
de virulência e a patogenicidade de A. kalrae,
o objetivo deste estudo foi analisar a resposta
Ciências Animais
imunopatológica de macrófagos infectados com
A. kalrae.
https://orcid.org/0000-0001-5240-4750

placas de poliestireno em diferentes tempos

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 6 66


coloração de cristal violeta. Para avaliação da resposta imunopatológica, macrófagos RAW
264.7 foram tratados e/ou infectados de acordo com os seguintes grupos: sem tratamento
e/ou infecção, infectados com
tratados com LPS, tratados com LPS e infectados com células planctônicas e tratados com

de

resultados: a formação in vitro A. kalrae aumenta com o decorrer do


tempo; ocorre inibição na produção de ON pelos macrófagos infectados por A. kalrae na sua

relação a sua forma planctônica (p<0,0001). Concluímos pelo estudo que o fungo A. kalrae
induz supressão na produção de ON pelos macrófagos infectados por A. kalrae, e que essa

seus mecanismos de patogenicidade.


PALAVRAS-CHAVE: Células planctônicas, Fatores de virulência, Óxido Nítrico.

EFFECT OF BIOFILM IN THE IMMUNE RESPONSE OF


INFECTED MACROPHAGES
ABSTRACT: Arthrographis kalrae is a thermodimorphic fungus that causes a complex
neurological syndrome and damage to different organs in mice. It is a fungus considered
rare in humans, but in different countries it has been described in several human clinical

pathogenicity of A. kalrae
A. kalrae

results: in vitro A. kalrae increases over time; there is inhibition of


NO production by macrophages infected by A. kalrae

We conclude from the study that the fungus A. kalrae induces NO production suppression by
macrophages infected by A. kalrae
form, thus evidencing one of its pathogenicity mechanisms.
KEYWORDS

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 6 67


1 | INTRODUÇÃO
O fungo Arthrographis kalrae foi descrito primeiramente em 1939 por Cochet como
Arthrographis langeroni Oidiodendron kalrai.

a espécie como Arthrographis kalrae (SIGLER; CARMICHAEL, 1983; TEWARI;

ordem Eurotiales e família Eremomycetaceae (SIGLER; CARMICHAEL, 1983).


A. kalrae
a 25°C. Esta fase é caracterizada por hifas septadas com artroconídios ovais a redondos
em cadeia na extremidade dos conidióforos. A 37°C este fungo se apresenta na fase
leveduriforme caracterizada por células ovais ou elípticas podendo estar misturadas com
blastoconídios, artroconídios e até hifas septadas (PICHON et al., 2008). A fase micelial
predomina no tecido infectado (TEWARI; MACPHERSON, 1971).
Foi demonstrado que camundongos infectados com a fase leveduriforme de A.
kalrae apresentam síndrome neurológica complexa, com hiperirritabilidade, ataxia, giros e

nos rins, cérebro e baço. Nestes órgãos, e também no fígado e pulmões foram encontrados
artroconídios, blastoconídios e/ou fungos na fase leveduriforme (TEWARI; MACPHERSON,
1968).
A. kalrae é considerado um patógeno raro em humanos, porém este fungo já foi
descrito em diferentes manifestações clínicas em humanos, como ceratite (PERLMAN;
BINNS, 1997; TING et al., 2020), eumicetoma (DEGAVRE et al., 1997), sinusite (PONIKAU
et al., 1999), meningite (CHIN-HONG et al., 2001) e onicomicose (VOLLEKOVÁ; LISALOVÁ;
POCZOVÁ, 2008; SUGIURA; HIRONAGA, 2010). Também há relatos de endocardite (DE
DIEGO CANDELA et al., 2010), infecção de córnea em paciente em uso de lentes de
contato (THOMAS et al., 2011) e infecção pulmonar (VOS et al., 2012) envolvendo este
patógeno, podendo ser fatal.
Nagashima et al. (2016) investigaram a resposta imune celular a A. kalrae no decorrer

cérebro de camundongos. Os resultados do estudo sugerem que a resposta imune a A.


kalrae modula para o padrão Th2 da resposta imune celular.

de produzir sua própria matriz extracelular e apresenta fenótipo distinto das suas células
em suspensão (células planctônicas) (DESAI; MITCHELL; ANDES, 2014). O principal

crescem em dispositivos implantados para o acompanhamento médico do paciente, como


os cateteres, são a principal causa de infecções recorrentes em hospitais. As infecções

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 6 68


MITCHELL; ANDES, 2014).
Em relação à resposta imune, há estudos mostrando que a resposta contra células

de Candida albicans podem resistir à fagocitose por células mononucleares do sangue

C. albicans

Considerando que existem poucos estudos sobre os fatores de virulência do fungo


A. kalrae na literatura, este estudo teve como objetivo contribuir para o conhecimento sobre
a patogenicidade de A. kalrae, avaliando-se efeito deste fungo na resposta imunológica de
macrófagos.

2 | MATERIAL E MÉTODOS
Neste estudo foi utilizado o isolado de A. kalrae IFM55165 cedido pelo Centro de
Pesquisa de Fungos Patogênicos e Toxicoses Microbianas da Universidade de Chiba,
Japão, proveniente de lesão cutânea de gato. O fungo foi mantido a 37°C em ágar
Sabouraud dextrose 4%, com repiques a cada cinco dias.

A. kalrae crescidas em ágar Sabouraud dextrose


4% a 37°C por cinco dias foram coletadas e suspendidas em tampão fosfato-salino (PBS)
0.15 M a pH 7.2 estéril. A suspensão foi centrifugada a 1512 x g por cinco minutos a
temperatura ambiente e o pellet de fungo foi suspendido em 2 mL de PBS. As células
fúngicas foram contadas em câmara de Neubauer e a concentração foi ajustada para 1 x
108 células/mL em RPMI 1640 suplementado com 2% de glicose. Foram acrescentados 200

2% de glicose também em triplicata. Cada microplaca foi correspondente a um tempo de


avaliação, sendo que os tempos avaliados foram: 4h (pré-adesão), 12h, 24h, 36h e 48h. As
microplacas foram incubadas por 4 horas a 37ºC e 5% de CO2
Após a pré-adesão por 4 horas, o sobrenadante foi removido de cada poço, a biomassa

foram novamente incubadas. Foram feitos dois experimentos independentes nas mesmas
condições.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 6 69


0,1% foi acrescentada e mantida em cada poço por 15 minutos, depois disso a solução
de cristal violeta foi removida e os poços foram lavados 3 vezes com PBS para retirar o

e esta solução foi transferida para outra microplaca para leitura espectrofotométrica a 550
nm, os valores foram expressos em densidade óptica (D.O.).
Para avaliação da resposta imunopatológica, macrófagos RAW 264.7 foram
semeados em placas de cultura de 48 poços a 1 x 105 células/mL em RPMI suplementado
2
por 24
horas para adesão.
Leveduras de A. kalrae crescidas em ágar Sabouraud dextrose 4% a 37°C por cinco
A.
kalrae crescidas por 48 horas foram coletadas e suspendidas em PBS 0.15 M a pH 7.2. As
suspensões foram centrifugadas a 1512 x g por cinco minutos a temperatura ambiente e
o pellet de fungo foi suspendido em 2 mL de PBS. As células fúngicas foram contadas em
câmara de Neubauer e a concentração de cada suspensão foi ajustada em 1 x 106 células/
mL.
Depois de 24 horas de adesão, os sobrenadantes de cultura dos macrófagos

macrófagos. Os grupos de macrófagos (n=4) foram os seguintes: Grupo 1, macrófagos em


RPMI (controle negativo); Grupo 2, macrófagos infectados com células planctônicas de A.
kalrae A. kalrae (B); Grupo
Escherichia coli 055:B5,

com células planctônicas de A. kalrae


A. kalrae (LPS+B). Estes grupos foram
organizados em três placas e cada placa foi incubada por 15, 24 ou 48 horas. Atingido o
tempo de infecção, os sobrenadantes foram coletados e mantidos a -80°C até o seu uso.
A produção de

de sobrenadante de cultura de macrófagos de cada grupo descrito acima, foram colocadas


em placas de 96 poços em duplicata para determinação de nitrito e, adicionados a elas, o
mesmo volume de reagente de Griess (reagente 1: 50 mg de N-naphthylethylenediamina
em 250 mL de água destilada; reagente 2: 5 g de ácido sulfanílico em 500 mL de HCl 3

Griess. A absorbância foi determinada pela leitura da microplaca a 540 nm em uma leitora
de microplacas. A quantidade de nitrito presente nos sobrenadantes foi determinada em

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 6 70


3 | RESULTADOS
As leveduras de A. kalrae aderiram à superfície de poliestireno depois de 4 horas,
ocorrendo aumento da biomassa total no decorrer do tempo de incubação por 12, 24,

anteriormente por microscopia eletrônica (SOUZA et al., 2021, artigo submetido à Journal
of Microbiology, Immunology and Infection).

A. kalrae em microplacas de poliestireno determinada


por coloração de cristal violeta. Os valores representam a média de dois experimentos independentes.

análise estatística mostrou que em 15 horas de infecção só houve diferença entre os grupos
LPS e P, ou seja, o grupo de macrófagos infectados com LPS produziu maior quantidade
de ON que o grupo infectado com células planctônicas. Em 24 e 48 horas de infecção, os
grupos de macrófagos LPS+P, LPS+B, P e B produziram uma quantidade menor de ON
que o grupo LPS (p<0,0001) e os grupos LPS+B, P e B produziram uma quantidade ainda
menor de ON que o grupo LPS+P (p<0,0001).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 6 71


Figura 2. Produção de Óxido Nítrico por macrófagos RAW 264.7. P: macrófagos infectados com células

LPS+P: macrófagos tratados com LPS e infectados com células planctônicas; LPS+B: macrófagos

entre os grupos (p<0,0001).

4 | DISCUSSÃO

são a principal causa de infecções recorrentes em hospitais (DESAI; MITCHELL; ANDES,


2014). Um caso de endocardite recorrente por A. kalrae foi relatado por De Diego Candela
et al. (2010) em que a paciente precisou passar por vários procedimentos cirúrgicos devido
a recorrência da infecção por A. kalrae e foi a óbito. O uso de uma prótese mecânica
A. kalrae pode ter sido a causa da gravidade e
recorrência da infecção.
Assim como diversas espécies de bactérias, espécies de fungos também são

são Candida spp. (KOJIC; DAROUICHE, 2004), Aspergillus spp. (BEAUVAIS et al., 2007),
Criptococcus neoformans (ASLANYAN et al., 2017) e Fusarium spp. (IMAMURA et al.,
Histoplasma
capsulatum (BRILHANTE et al., 2015), Paracoccidioides brasiliensis (SARDI et al., 2015)
e mais recentemente por A. kalrae (SOUZA et al., 2021, artigo submetido à Journal of
Microbiology, Immunology and Infection).

fungos (BROWN, 2011) e estas são ativadas quando seus receptores de reconhecimento
de padrões (PRRs) reconhecem os diferentes componentes da parede celular dos fungos

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 6 72


(NETEA et al., 2006). No presente estudo, uma linhagem de macrófagos murinos (RAW
264.7) foi utilizada para estudar os efeitos da infecção por A. kalrae e diferenciar a resposta
inata dessas células à infecção por
tais respostas, os níveis de ON no sobrenadante de cultura destes macrófagos, foram

com LPS.
Neste estudo, demonstramos que A. kalrae é capaz de inibir a produção de ON
dos macrófagos. Os macrófagos infectados com o fungo, seja por células planctônicas

A. kalrae apresentou
maior capacidade de inibição durante infecção por 24 e 48 horas, pois o grupo tratado com

com LPS e infectado com células planctônicas. Os grupos infectados apenas com células

níveis baixos de produção de ON. O mecanismo pelo qual este fungo inibe a produção de
ON pelos macrófagos ativados serão pesquisados posteriormente.

5 | CONCLUSÃO
Em conclusão, o fungo A. kalrae induz supressão na produção de ON pelos
macrófagos infectados por A. kalrae

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 6 75


CAPÍTULO 7
POTENTIAL OF Saccharomyces cerevisiae
IN Fusarium graminearum ANTIBIOSIS AND
ZEARALENONE DETOXIFICATION

Data de aceite: 10/01/2022 ABSTRACT: Considering the serious economic


Data de submissão: 08/10/2021 losses and human and animal health hazards
caused by the natural occurrence of zearalenone
(ZEA), a toxic secondary metabolite produced by
Fusarium graminearum, the objective of this study
Andressa Jacqueline de Oliveira
Saccharomyces
State University of Londrina, Department of
cerevisiae
Biochemistry and Biotechnology
Londrina – Paraná in vitro.
http://lattes.cnpq.br/5816751074597566 The antifungal activity of the Saccharomyces
cerevisiae
Mario Augusto Ono strains of F. graminearum (FRS 26 and FSP
State University of Londrina, Department of F.
Pathological Sciences graminearum
Londrina – Paraná from 48.2 ± 1.6 to 73.2 ± 4.0 % (FRS 26) and from
http://lattes.cnpq.br/2409390685316192
44.2 ± 2, 5 to 63.1 ± 1.5 % (FSP 27). Yeast volatile
Melissa Tiemi Hirozawa F. graminearum
State University of Londrina, Department of
Biochemistry and Biotechnology
Londrina – Paraná F. graminearum
http://lattes.cnpq.br/9371346593025432 by diffusible compounds compared to the control.
Furthermore, the ScE strain reduced the mycelial
Jaqueline Gozzi Bordini
of F. graminearum in corn
State University of Londrina, Department of
seeds and caused morphological changes in F.
Biochemistry and Biotechnology
Londrina – Paraná graminearum FSP 27, such as thinner hyphae.
http://lattes.cnpq.br/5793406523469122 Saccharomyces cerevisiae
to remove ZEA in vitro, and the highest reduction
Claudemir Zucareli
State University of Londrina, Department of cells of the ScC (84.8 ± 0.0%) and ScD (86.3
Agronomy ± 2.0 %) strains. S. cerevisiae strains inhibited
Londrina – Paraná F. graminearum
http://lattes.cnpq.br/7421945211824275
for ZEA removal in vitro. It can be included in a
Elisabete Yurie Sataque Ono
State University of Londrina, Department of
Biochemistry and Biotechnology to human food.
Londrina – Paraná KEYWORDS: Adsorption; yeast; antifungal
http://lattes.cnpq.br/9080149399359784 activity; decontamination.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 76


POTENCIAL DE Saccharomyces cerevisiae NA ANTIBIOSE DE Fusarium
graminearum E NA DETOXIFICAÇÃO DE ZEARALENONA
RESUMO: Considerando as grandes perdas econômicas e os riscos à saúde humana e
animal causados pela ocorrência natural de zearalenona (ZEA), um metabólito secundário
tóxico produzido por Fusarium graminearum, o objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade
de cinco cepas de Saccharomyces cerevisiae isoladas de fermento de pão em inibir o
crescimento fúngico e remover ZEA in vitro. A atividade antifúngica de Saccharomyces
cerevisiae foi avaliada contra duas cepas de F. graminearum (FRS 26 e FSP 27). Todas as
cepas de leveduras foram capazes de inibir o crescimento de F. graminearum, com taxas de
inibição variando de 48,2 ± 1,6 a 73,2 ± 4,0 % (FRS 26) e de 44,2 ± 2,5 a 63,1 ± 1,5 % (FSP
F.
graminearum
na redução do crescimento de ambas as cepas de F. graminearum por compostos difusíveis
em comparação ao controle. Além disso, a cepa ScE reduziu o crescimento micelial de ambas
as cepas de F. graminearum em sementes de milho e causou alterações morfológicas de F.
graminearum Saccharomyces cerevisiae
foram capazes de remover a ZEA in vitro, sendo que a maior redução da concentração de
ZEA foi apresentada por células não viáveis das cepas ScC (84,8 ± 0.0%) e ScD (86,3 ± 2,0
%). As cepas de Saccharomyces cerevisiae inibiram o crescimento de F. graminearum e
apresentaram potencial para a remoção de ZEA in vitro, podendo ser incluídas em um novo
produto na alimentação animal, reduzindo as perdas econômicas e minimizando o risco de
transferência de ZEA para a alimentação humana.
PALAVRAS-CHAVE: Adsorção, levedura, atividade antifúngica, descontaminação.

1 | INTRODUCTION

million tons in the 2019/20 harvest season. Paraná State is the second largest national corn
producer, representing 17% of national production in the 2018/19 harvest season (USDA,
2020).

feed production (ABIMILHO, 2018).


Because of its nutritional quality, corn becomes a good substratum for toxigenic fungi

et al mycotoxin produced
mainly by Fusarium graminearum

properties such as infertility, vulvovaginitis and rectal and vaginal prolapse (KUIPER et al.,
1998; MARIN et al., 2013).
The main control strategy to minimize pre-harvest mycotoxin contamination is
fungicide application, but its use can be hazardous to human and animal health and to
the environment. The increasing demand for pesticide-free agricultural products requires

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 77


cleaner and safer technologies (LIU et al., 2011). Biological control of pre- and post-harvest
diseases is an effective and safe alternative for minimizing mycotoxins in the food production
chain (CHANCHAICHAOVIVAT et al., 2007).

toxins (CHANCHAICHAOVIVAT et al., 2007), but the most probable mechanism involved in

et al
as Fusarium graminearum (ARMANDO et al., 2013) and F. fujikuroi et al., 2014),
Geotrichum citri-aurantii (KLEIN and KUPPER, 2018) and Penicillium italicum (CUNHA et
al., 2018).
A post-harvest approach to minimize
contaminated cereals (ZINEDINE et al., 2007). The use of adsorbents as additives in animal
mycotoxin carry-over in products of
et al., 2007).
1

et al., 2014; FRUHAUF et al., 2012; JOANNIS-CASSAN


et al Saccharomyces cerevisiae has an inner layer constituted of

connection mechanisms, such as hydrogen bonds, hydrophobic or ionic interactions


(YIANNIKOURIS et al., 2004; HUWIG et al., 2001).

about the ability of yeasts to inhibit F. graminearum

S. cerevisiae application
in Fusarium graminearum antibiosis and ZEA removal.

2 | MATERIALS AND METHODS

2.1 Yeast and fungal strains


Saccharomyces cerevisiae

and denominated ScA, ScB, ScC, ScD and ScE.


Fusarium graminearum
provided by the Mycological collection of the Toxigenic Fungi and Mycotoxins Laboratory
of the Department of Microbiology, Biomedical Sciences Institute, University of São Paulo
(São Paulo-Brazil).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 78


2.2 Antifungal activity evaluation
et al. (2014), Velluti et al. (2004)
et al
peptone, dextrose) agar, incubated at 25 ± 1 °C for 24 h. Then an aliquot of the inoculum

5
,
106 and 107
F. graminearum
FRS 26 and F. graminearum

F. graminearum mycelium

Where:
C = control colony diameter
T = treatment colony diameter

2.3 Evaluation of the antifungal activity of volatile compounds


The
according to the mouth-to-mouth method (Medina-Córdova et al., 2016). An 8 mm disc of

100 mL suspension containing 108

F.
graminearum
2.2.

2.4 Evaluation of diffusible compound effect on F. graminearum growth


et al. (2016).
F. graminearum
8

of F. graminearum
item 2.2.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 79


2.5 F. graminearum mycelium preparation for ultrastructural study
antifungal activity
et al. (2014) and
Miguel et al

standardized at 105 cells/mL. An 8 mm potato dextrose agar (PDA) plug of F. graminearum

by centrifugation (9620 xg for 15 min at 0 °C). F. graminearum


scanning electron microscopy analysis.

2.6 Scanning electron microscopy (SEM)


Samples of F. graminearum

gradual dehydration in ethanol concentrations (70 %, 80 %, 90 % and 100 %) for 15 min each
and dried to the critical point (CPD 030 Critical Point BALTEC Dryer, Leica Microsystems,

2.7 Evaluation of the antifungal activity on corn seeds

2.7.1 F. graminearum inoculum preparation

Three 8 mm discs of F. graminearum

2.7.2 Yeast inoculum preparation

by centrifugation at 9620 x
containing 1 % carboxymethylcellulose and standardized at 1 x 108 cells/mL concentration.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 80


2.7.3 Yeast and F. graminearum inoculation on corn seeds

fungus and yeast application.


8
yeast cells/mL

F. graminearum

5 days.

Where:

2.8
et al. (2012) and
Bordini et al

xg

standardized at 108

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 81


by centrifugation (9620 xg
ZEA adsorbed.

Adsorption ratio (%) = [(Z - Zt


Where:
Z = ZEA concentration detected in the control (ng/mL)
Zt = ZEA concentration detected in the supernatant of adsorption tests (ng/mL)

2.9 Zearalenone determination

stored at - 20 °C.
et al

phase high performance liquid chromatography system (Shimadzu LC-10 AD pump and RF-

column (250 x 4.6 mm, 5 mm, Scharlau, Barcelona, Spain). The excitation and emission

(INMETRO, 2007).

2.10 Statistical analysis


Differences in the mean inhibition ratio of yeast strains against F. graminearum

3 | RESULTS AND DISCUSSION


Several researchers have studied the antagonistic effect of yeast on Fusarium
fujikuroi, F. graminearum and Fusarium guttiforme (ARMANDO et al., 2013; KORRES et al.,
et al., 2014; SCHISLER et al., 2015).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 82


et al

for nutrients (ARMANDO et al., 2013). The mechanisms of antimicrobial activity include
antibiosis, competition, parasitism, and extracellular production of substances (KÖHL et al.,
2015; SCHISLER et al., 2015).
The antifungal activity of yeast strains against F. graminearum FRS 26 and FSP 27 is

against F. graminearum FRS 26 (from 48.2 ± 1.6 to 73.2 ± 4.0 %) and F. graminearum FSP
27 (from 44.2 ± 2.5 to 63.1 ± 1.5 %). Regarding F. graminearum FRS 26, all the yeast strains
7
cells /mL. For the ScA, ScB and ScD strains, the

5
and 106 cells/mL. Regarding F.
7
graminearum cells/

et al
demonstrated that Candida krusei BT0701 inhibited 75.8 % of Fusarium guttiforme E-261
Kloeckera apis F. guttiforme E-261
et al. (2013) reported that F. graminearum was
completely inhibited by S. cerevisiae RC016.

Cell concentration (cells/ mL)


Yeast strains 105 106 107
Inhibition ratio (%)
ScA 52.4 ± 2.4 b C 58.9 ± 2.5 b B
71.4 ± 3.0 b A
ScB 51.5 ± 3.3 c b C 64.0 ±1.3 a B
69.9 ± 1.3 a b A
b B
ScC 52.1 ± 0.7 53.9 ± 1.7 c B 69.3 ± 7.0 a b A
ScD 48.2 ± 1.6 c C 51.8 ± 1.6 c B 65.5 ± 1.5 a b A
ScE 56.0 ± 0.9 a B 57.7 ± 0.9 b B 73.2 ± 4.0 a A

test (p < 0.05) for each yeast strain.

test (p < 0.05) among the three cell concentrations of the same yeast strain.
Table 1. Inhibition ratio (%) of yeast strains at different cell concentrations against F. graminearum FRS
26.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 83


Cell concentration (cells/ mL)

Yeast strain 105 106 107

Inhibition ratio (%)

ScA 54.3 ± 0.6 a B


56.3 ± 3.1 a B 60.1 ± 1.8a A

ScB 44.2 ± 2.5 c C 56.3 ± 4.6 a B 62.1 ± 2.5 a A

ScC 49.2 ± 3.1 b B


53.3 ± 1.1 a A 56.1 ± 1.5 b A

ScD 46.7 ± 2.6 b c C 53.5 ± 2.3 a A B 61.1 ± 3.1a A

ScE 56.8 ± 1.2 a B


58.1 ± 3.4 a B 63.1 ± 1.5a A

test (p < 0.05) for each yeast strain.

test (p < 0.05) among the three cell concentrations of the same yeast strain.
Table 2. Inhibition ratio (%) of yeast strains at different cell concentrations against F. graminearum FSP
27.

The antifungal activity of volatile compounds produced by yeast strains against F.


graminearum
reduced F. graminearum

that reported by Ferraz et al et al.


et al. (2017). Ferraz et al. (2016) evaluated 95 yeasts and only one
inhibited less than 10.0 % Geotrichum citri-aurantii
Medina-Córdova et al. (2016) demonstrated that the volatile compounds produced by
Debaryomyces hansenii inhibited Fusarium proliferatum and Fusarium subglutinans

et al. (2017) reported that Wickerhamomyces anomalus inhibited 47.3 % and 98.0 % of
Monilinia fructigena and Monilinia fructicola

F. graminearum FRS 26 F. graminearum FSP 27


Yeast strain
Inhibition ratio (%) Inhibition ratio (%)
(mm) (mm)

ScA 56 ± 3 B 32.4 ± 3.7 a 53 ± 5 A 26.5 ± 6.3 a

ScB 55 ± 4 B 34.6 ± 5.5 a 65 ± 6 A 10.1 ± 9.3 a

ScC 57 ± 3 B 31.6 ± 4.6 a 57 ± 6 A 22.1 ± 8.8 a

ScD 57 ± 5 B 31.8 ± 3.5 a 70 ± 4 A 3.4 ± 4.8 a

ScE 58 ± 6 B
30.4 ± 6.4 a 58 ±8 A 19.8 ± 13.0 a

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 84


A A
Control 81 ± 6 - 73 ± 2 -

< 0.05)

test (p < 0.05) for each yeast strain.

The antifungal activity of diffusible compounds from yeast strains against F.


graminearum

et al
stated that diffusible compounds of Debaryomyces hansenii inhibited Aspergillus sp., F.
proliferatum and F. subglutinans

S. cerevisiae
antibiosis on corn seeds because it
antibiosis by the agar diffusion method.

F. graminearum FRS26 F. graminearum FSP 27


Yeast strain
Inhibition ratio (%) Inhibition ratio (%)
(mm)
ScA 63 ± 6 A - 61 ± 7 A 10.6 ± 8.3 a

ScB 67 ± 4 A - 60 ± 3 A 12.8 ± 9.3 a

ScC 62 ± 8 A - 65 ± 6 A 5.0 ± 8.8 a

ScD 63 ± 11 A - 65 ± 7 A 5.5 ± 20.0 a

ScE 63 ± 6 A - 61 ± 7 A 10.1 ± 13.0 a

Control 62 ± 11 A - 69 ± 11 A -

(p < 0.05)

test (p < 0.05) for each yeast strain

- no inhibition

Evaluation of morphological changes can be applied to the study of the antagonistic

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 85


(JANISIEWICZ and KORSTEN, 2002). The scanning electron microscopy (SEM) analysis
Saccharomyces cerevisiae ScE caused defects on hyphae morphology of
F. graminearum FSP 27 (Figure 1 C) such as thinner hyphae (Figure 1 A). The mycelial

Fusarium graminearum
FRS 26 mycelia in the presence of the ScE strain. The results of the mycelial ultrastructural

suggest that the main antagonistic mechanism involved in F. graminearum antibiosis by S.


cerevisiae ScE is competition for nutrients. On the other hand, Korres et al. (2011) reported
that Kloeckera apis BT0703 and Candida krusei BT0701 caused changes in Fusarium
guttiforme

Figure 1. Electron micrographs of F. graminearum mycelia FSP 27 and FRS 26 on 5 th day incubation
at 25 °C on the absence (control) - A (F. graminearum FSP 27) and B (F. graminearum FRS 26), and
presence (treatment) - C (F. graminearum FSP 27) and D (F. graminearum FRS 26) of ScE yeast strain.

Corn is susceptible to several soil-borne diseases. F. graminearum is an important


et al., 2014;
PAL et al., 2001). Prolonged use of agrochemicals may harm the ecological environment
of soil; therefore, it is necessary to develop biological control methods that minimize the
incidence of seed diseases (HE et al et al., 2014). The S. cerevisiae ScE
F. graminearum on corn seeds (Figure 2)

et al. (2014).
Pichia guilliermondii R9, Metschnikowia pulcherrima R23 and R26 reduced the infection

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 86


rate of F. fujikuroi et al., 2014). These
results indicate that S. cerevisiae
diseases.

of the control score difference and the treatment score, divided by the control score multiplied by 100.

mycotoxin adsorption (BORDINI et al., 2014; FREIMUND et al., 2003; FRUHAUF et al.,
Saccharomyces cerevisiae

SHETTY et al mycotoxin adsorption is


assigned to glucans present in its structure (HUWIG et al.,

glucan (YIANNIKOURIS et al., 2004; YIANNIKOURIS et al., 2003).


In this study, in vitro ZEA removal by viable yeast cells ranged from 67.1 ± 4.1 % (ScE)

78.0 ± 0.6 (ScE) to 86.3 ± 2.0 % (ScD) (Table 5). Comparing the ZEA removal (%) by the
same S. cerevisiae

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 87


removal from the medium does not occur by enzymatic degradation but by adsorption to the

et al.,
2004).

% ZEA removal
Yeast strains
Viable cells Unviable cells

ScA 76.0 ± 0.0 a A 82.0 ± 2.6 a b A


ScB 75.71 ± 0.8 a A 80.2 ± 2.3 a b A
ScC 75.6 ± 1.7 a B 84.8 ± 0.0 a b A
ScD 71.1 ± 4.7 a B 86.3 ± 2.0 a A
ScE 67.1 ± 4.1 a A 78.0 ± 0.6 b A

< 0.05)
Unviable cells: heat treatment (121 °C for 15 min)
Table 5. In vitro ZEA removal (%) by viable and unviable yeast cells (108 cells/mL) at 500 ng/ mL ZEA
concentration.

et al. (2014), but


higher than that obtained by Armando et al. (2012) and Bordini et al. (2014) (pure yeast cell
et al. (2014) reported maximum values of 75 % ZEA adsorption using
et al.
(2012) evaluated the potential of S. cerevisiae
binding percentage ranging from 56.7 to 74.2 % at 0.5 mg/mL ZEA concentration. Bordini et
al

Fusarium graminearum
by S. cerevisiae
All the Saccharomyces cerevisiae in vitro ZEA removal.
Saccharomyces cerevisiae is Generally Recognized as Safe (GRAS), therefore there is

F. graminearum

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 88


CONFLICTS OF INTEREST

ACKNOWLEDGEMENTS

the Araucária Foundation (Project announcement 09/2016, Research project agreement


001/2017) and Coordination for the Improvement of Higher Education Personnel (CAPES)

by E.Y.S. Ono (grant number 311116/2020-5), M.A. Ono (grant number 311922/2018-0),

authors are grateful to the Laboratory of Electronic Microscopy and Microanalysis (LMEM-

Fungi and Mycotoxins Laboratory of the Department of Microbiology, Biomedical Sciences


Institute, University of São Paulo (São Paulo-Brazil) for providing Fusarium graminearum
strains (FSP 27 and FRS 26).

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 7 92


CAPÍTULO 8
BIOLOGICAL EVALUATION OF A THERAPEUTIC
DEVICE THAT IS BASED IN PULSED-
ELECTROMAGNETIC FIELDS AND STATIC
MAGNETIC FIELDS ON A MURINE MODEL

Data de aceite: 10/01/2022 Angel Zavala-Pompa


Data de submissão: 07/10/2021 Centro de Investigación Biomédica del Noreste,
Instituto Mexicano del Seguro Social
Monterrey, Nuevo León, México

Abraham O. Rodríguez-De la Fuente angelzavalapompa/?originalSubdomain=mx


Universidad Autónoma de Nuevo León,
Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento Pedro Antonio Noguera-Díaz
de Ciencias Exactas y Desarrollo Humano Universidad Autónoma de Nuevo León,
San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento
https://orcid.org/0000-0001-5665-7819 de Ciencias Exactas y Desarrollo Humano
San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México.
José Antonio Heredia-Rojas
Universidad Autónoma de Nuevo León, Noguera-2
Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento
José Alberto Valadez-Lira
de Ciencias Exactas y Desarrollo Humano
San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México Universidad Autónoma de Nuevo León,
https://orcid.org/0000-0001-7453-8573 Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento
de Microbiología e Inmunología
Pilar Carranza-Rosales San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México
Centro de Investigación Biomédica del Noreste, https://orcid.org/0000-0003-4378-7221
Instituto Mexicano del Seguro Social
Ricardo Gómez-Flores
Monterrey, Nuevo León, México
https://orcid.org/0000-0002-1890-4468 Universidad Autónoma de Nuevo León,
Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento
Omar Heredia-Rodríguez de Microbiología e Inmunología
Universidad Autónoma de Nuevo León, San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México
Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento https://orcid.org/0000-0002-9518-4433
de Ciencias Exactas y Desarrollo Humano Pedro César Cantú-Martínez
San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México
Universidad Autónoma de Nuevo León,
Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento
25-25/profesores-en-el-sni/details/39/998-omar- de Ciencias Exactas y Desarrollo Humano
heredia-rodriguez San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México
https://orcid.org/0000-0001-8924-5343
Gerardo Lozano-Garza
Centro de Investigación Biomédica del Noreste, María Porfiria Barrón-González
Instituto Mexicano del Seguro Social Universidad Autónoma de Nuevo León,
Monterrey, Nuevo León, México Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento
de Biología Celular y Genética
contributions/Gerardo-H-Lozano- San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México
Garza-2001458984 https://orcid.org/0000-0002-8386-444X

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 93


ABSTRACT

exposure to electromagnetic devices may cause deleterious health effects. The current study

micronuclei frequency, on scored polychromatic erythrocytes


percentage, and on sperm counts and morphological characteristics of male germ cells in

reports in the literature, it is necessary to carry out more research to help to clarify the

KEYWORDS
micronuclei, sperm abnormalities.

RESUMEN
tratamientos con campos magnéticos en el área médica. Las tecnologías que usan campos
electromagnéticos pulsados (PEMF, por sus siglas en inglés) y campos magnéticos estáticos
(SMF, por sus siglas en inglés) han sido utilizadas en varias condiciones patológicas con
resultados prometedores. Más recientemente, los tratamientos magnéticos también se han
utilizado para tratar varios tipos de cáncer. Sin embargo, hay resultados contradictorios

de que la exposición a dispositivos electromagnéticos pueda causar efectos nocivos para


la salud. El presente estudio, tuvo por objeto evaluar los posibles efectos cito-genotóxicos
inducidos en ratas expuestas en un dispositivo terapéutico que utiliza PEMF en combinación
con SMF, originalmente diseñado para el tratamiento de diversos tipos de cáncer en humanos.

semanas de edad se distribuyeron en tres grupos de estudio: (a) 5 machos y 5 hembras


expuestas de forma independiente a PEMF combinados con SMF, (b) animales tratados solo
con SMF y (c) animales no expuestos. Se realizaron pruebas citogenéticas; como la prueba
de micronúcleos en médula ósea, y el análisis de células germinales masculinas siguiendo
protocolos previamente estandarizados. Los resultados observados, mostraron ausencia de
alteraciones en la frecuencia de micronúcleos, en el porcentaje de eritrocitos policromáticos,
en el recuento de espermatozoides y las características morfológicas de las células germinales
masculinas en animales expuestos al dispositivo terapéutico, en comparación con los
animales no expuestos. Estos resultados sugieren que los campos magnéticos generados en
esta máquina de uso médico no tuvieron ningún efecto citotóxico o genotóxico detectable en

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 94


las ratas expuestas. En vista de estos hallazgos, y de los informes contradictorios publicados
en la literatura, se hace pertinente y necesario llevar a cabo más estudios sobre la inocuidad
de estos dispositivos utilizando otros tipos celulares y una variedad de pruebas citogenéticas.
PALABRAS CLAVE: Campos magnéticos, genotoxicidad, micronúcleos, espermatozoide,
mutación.

1 | INTRODUCTION
Several techniques that involve

effects. The bio-effects of exposure to

chromosomal abnormalities, congenital deformities, and several other health conditions


(Ahlbom et al., 2001; Pearce et al., 2007; Hug et al., 2010). Based in these studies and

et al., 2011).

of cancer (Haro et al., 2005; Grosel et al., 2006).

to further evaluate the cytological effects induced in rats exposed in a patented medical
device (Davidson, 2001), originally designed to treat several types of cancer in human

our in vivo experimental investigation to single parameters, i.e., the analysis of micronuclei

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 95


2 | MATERIALS AND METHODS

Animals

distributed into experimental and control groups. At the time of experiments the animals

of Health for issues regarding Health Research, Ministry of Health, Mexico City.

Magnetic Field Machine and Measurements

quantity of permanent neodymium magnets arranged in a side-by-side relationship. Each


permanent magnet being adjacent to the magnetic north pole and magnetic south pole of an
adjacent permanent magnet, respectively. Thus, the plurality of these magnets forms a ring

and a DC component. According to the manufacturer, the frequency of the AC component

originally designed to treat several types of cancer in humans (Davidson, 2001).

by using an axial high sensitivity Hall probe (Integrity Design IDR-321 geomagnetometer,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 96


t-test).

Experimental Protocol
a) 5 male and 5

exposures, (b
current in the coil, and (c
any magnetic exposure. During the no-exposure intervals, the cages containing the animals

the case of

Micronucleus Test

g for

microscopic analysis.

Male Germ Cells and Sperm Morphology Analysis

tunica vaginalis

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 97


epididymis according to a previously described procedure of Oyeyemi and Ubiogoro (2005).

scored by using an improved Neubauer chamber as described by Pant and Srivastava


(2003).

Statistical Analysis

for normal distributions. In the case of the percentage of sperm morphology abnormalities,

determined by the Kolmogorov-Smirnov test (p

3 | RESULTS
The current in vivo

micronuclei frequency and PCE percentages, and on male

the frequency of

among groups, for both male and female animals (p

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 98


4

3.5

2.5
MN/2000 cells

Males
2
Females

1.5

0.5

0
A (PEMF+SMF) B (SMF) C (Non-exposed)

S.D.

60

50

40
% PCE´s

Males
30
Females

20

10

0
A (PEMF+SMF) B (SMF) C (Non-exposed)

rats. (a
b) rats exposed to
c
p
S.D.

in either the sperm counts (Figure 3), and morphological characteristics of spermatic cells
p

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 99


18000
16000
14000
Cells/ml 12000
10000
8000
6000
4000
2000
0
A (PEMF+SMF) B (SMF) C (Non-exposed)

a) animals

b
the coil, and (c
(p

5
% SMA

0
A (PEMF+SMF) B (SMF) C (Non-exposed)

rats. (a
b) rats exposed to
c
p

4 | DISCUSSION

originate genetic damage or other biological disfunctions. On the other hand, since the early
part of the 20 th

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 100


cytotoxic effect induced in mature rats by an in vivo exposure to a therapeutic machine that

Results presented here, indicated no alterations in micronuclei frequency and in PCE

previous reports that used the MN assay, indicating no genotoxic or cytotoxic effects induced

mT and 60 Hz did not increase the MN frequency by ionizing radiation in mouse embryonic

exposure, in comparison to non-exposed or acutely exposed animals.

the inconclusive nature of laboratory bioassays and the fact that there are no epidemiological
studies of patients exposed to such therapeutic devices turns this concern very complex.
In contrast, the International Agency for Research on Cancer (IARC, 2002) included and

electromagnetic radiation does not transmit enough energy to affect chemical bonds, then,

movement of electrons in DNA might be induced (Valberg et al., 1997). This could generate

proliferation, suggesting that DNA replication rather than the DNA itself may be altered.
On the other hand, the results obtained in the present research indicated that

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 101


On the contrary,

mT to 100 mT affected the proliferative and differentiative capacity of mouse spermatogonia.

Regarding the sperm morphology abnormalities, the outlined results presented here

from a magnetic resonance device. Similarly, the Spanish group of Tablado et al. (1998)

of alterations on morphological characteristics of male germ cells in mice exposed to a 60

et al. (2009) found alterations of spermatozoa and fertilization rates in rabbits exposed to 50

(De-Kun et al., 2010).

In conclusion, the current study suggested that an in vivo

types of cancer in humans, did not have any measurable effect on MN frequency and PCE

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 102


percentages of exposed rats and on sperm counts and morphological characteristics of
male germ cells. These results support, in part, the innocuity of this therapeutical machine in

cell types and cytological endpoints under different experimental conditions to add more
evidence of innocuity of the mentioned therapeutic device, and at the same time, help to

ACKNOWLEDGMENTS

supported by PAICYT CN1548-21 and CN1548-21.

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 8 106


CAPÍTULO 9
SÍNTESE, CARACTERIZAÇÃO E ATIVIDADE
BIOLÓGICA DO DERIVADO TIAZACRIDÍNICO LPSF/
AA-57

Data de aceite: 10/01/2022 Marina Galdino da Rocha Pitta


Data de submissão: 26/09/2021 Laboratório de Planejamento e Síntese
de Fármacos, Núcleo de Pesquisa em
Inovação Terapêutica Suely Galdino, Centro
de Biociências, Universidade Federal de
Marcel Lucas de Almeida Pernambuco
Laboratório de Planejamento e Síntese Recife-Pernambuco
de Fármacos, Núcleo de Pesquisa em http://lattes.cnpq.br/6491144323495041
Inovação Terapêutica Suely Galdino, Centro
de Biociências, Universidade Federal de
Pernambuco
Recife-Pernambuco RESUMO: Os derivados tiazacridínicos têm
https://orcid.org/0000-0002-1603-8391 sido bastante explorados no desenvolvimento
Valécia de Cassia Mendonça da Costa de novos fármacos, com objetivo de possuírem
funções terapêuticas como atividades anticâncer,
Laboratório de Imunomodulação e Novas
Abordagens Terapêuticas, Centro de antibacteriana e antiviral, devido principalmente,
Biociências, Universidade Federal de a suas capacidades de intercalação ao
Pernambuco DNA e inibição da enzima topoisomerase
Recife-Pernambuco II. Os derivados acridínicos podem possuir
http://lattes.cnpq.br/8587288704480001 substituintes estruturais diferenciados que lhes
conferem atividades citotóxicas singulares.
Michelly Cristiny Pereira
Com isso, este núcleo químico apresenta
Laboratório de Imunomodulação e Novas
potencial para a descoberta de novos fármacos
Abordagens Terapêuticas, Centro de
mais seletivos e menos tóxicos. Desta forma, o
Biociências, Universidade Federal de
Pernambuco presente estudo teve como objetivo sintetizar
Recife-Pernambuco tiazacridínico
http://lattes.cnpq.br/2732440502722790 LPSF/AA-57, uma junção da acridina com a
tiazolidina. A partir de uma reação de Adição
Ivan da Rocha Pitta de Michael, o composto foi sintetizado, também
Laboratório de Planejamento e Síntese foi realizado sua caracterização estrutural,
de Fármacos, Núcleo de Pesquisa em avaliação do seu grau de pureza e desvendado o
Inovação Terapêutica Suely Galdino, Centro
de Biociências, Universidade Federal de
Pernambuco
(CLAE), Espectroscopia de infravermelho (IV) e
Recife-Pernambuco
http://lattes.cnpq.br/0925726638062356 Espectrometria de massas (EM). Após esta etapa,
também foi feito testes biológicos em células
cancerígenas, com resultados interessantes em

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 9 107


algumas linhagens celulares tumorais, como as linhagens Hl-60,
PALAVRAS-CHAVE: Síntese Orgânica; Tiazacridinas; Anticâncer; Química Medicinal.

SYNTHESIS, CHARACTERIZATION AND BIOLOGICAL ACTIVITY OF THE LPSF/


AA-57 TIAZACRIDINIC DERIVATIVE
ABSTRACT

antiviral activities, mainly due to their DNA intercalation and inhibition of topoisomerase II
enzyme. Acridine derivatives may have differentiated structural substituents that give them

the thiazacridine derivative LPSF/AA-57, a junction of acridine and thiazolidine. From a

using the techniques of High Performance Liquid Chromatography (HPLC), Spectroscopy of

K562,

KEYWORDS: Organic Synthesis; Thiazacridines; Anticancer; Medicinal Chemistry.

1 | INTRODUÇÃO
O câncer é um conjunto de mais de 100 tipos diferentes de doenças que têm em
comum o crescimento desordenado de células anormais com potencial invasivo. De acordo
com o Ministério da Saúde, a incidência de câncer vem aumentando consideravelmente.
O Instituto Nacional de Câncer (INCA) estimou cerca de 600 mil casos novos da doença
em 2018 (MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2017). Atualmente, a principal forma de tratamento
desta doença é a quimioterapia, podendo ser auxiliada pela radioterapia e/ou cirurgia.
No entanto os quimioterápicos disponíveis no mercado trazem aos pacientes inúmeros

vida (MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2014). Graças às recentes descobertas de novos alvos


biológicos do câncer e pela possibilidade de desenvolver novos agentes anticâncer com

agentes inovadores é de extrema importância (RAZA et al., 2012).


Uma das classes de moléculas que tem sido estudada devido a sua baixa toxicidade

estrutura química um núcleo acridínico formado por três anéis aromáticos fundidos com
um nitrogênio no anel central e um núcleo tiazolídínico formado por um anel heterocíclico
pentagonal contendo um átomo de enxofre na posição 1, um de nitrogênio na posição 3, e
uma carbonila nas posições 2 e 4 (GALDINO-PITTA et al, 2013).
Alguns estudos já foram realizados com derivados tiazacridínicos, estes compostos

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 9 108


são agentes intercalantes de DNA e tem demonstrado ter uma vasta gama de atividades

(VICTORIA et al, 2013; GALDINO-PITTA et al, 2013; LANG et al, 2013).


Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo sintetizar de forma rápida e
tiazacridínico (LPSF/AA-57) e caracterizá-lo estruturalmente através

do produto. Bem como, também teve como objetivo analisar sua atividade biológica em
linhagens cancerígenas K562, Du 145 e Molt-4.

2 | MATERIAIS E MÉTODOS
A síntese do composto LPSF/AA-57 foi realizada através de uma reação de Adição
de Michael em que reagiu quantidades equimolares do reagente intermediário AA-1A
(3-Acridina-9-il-metil-tiazolidina-2,4-diona), sintetizado previamente, solubilizado em
etanol, junto com um outro reagente da série IP (Ésteres de Cope), também previamente
sintetizado. Por último é adicionado o catalisador morfolina. A solução foi mantida à 65°C por

et al., 2017).
Para caracterização do LPSF/AA-57 foi utilizada a técnica do Espectrômetro de
Massa (ESI-MS(n) HCTultra). A análise por MS transcorreu no modo positivo, utilizando-se
hélio como gás de arraste e voltagem do capilar de 4500v. A temperatura do gás de secagem
foi de 250°C e o scan utilizado foi de 100-500 m/z. O nitrogênio foi utilizado como gás
nebulizador a uma pressão de 10 psi. Na técnica de espectrofotometria de Infravermelho
(FTIR) as amostras foram preparadas em forma de pastilha de Brometo de Potássio (KBr)
na proporção de 1:100. Para a análise da pureza do composto foi utilizada a técnica de

acetonitrila (ACN) na proporção de 0,2 mg/mL, com os solventes Metanol (MeOH) e ACN
servindo de fase móvel.
As culturas celulares utilizadas para os testes com o composto AA-57 foram às
seguintes: Células de tumor hematopoiéticas leucemia de células T aguda) e MOLT-
4; RAJI (células de leucemia promielocítica aguda); K562 (leucemia
mielogênica crônica); DU-145 (câncer da próstata) e PBMC (células mononucleares de
sangue periférico primário). Os quais foram mantidas em meio RPMI 1640 (Sigma Chemical
Corporation) suplementado com 100 U/ml de penicilina, 100 ug/ml de estreptomicina, 0,25
mg /ml Fungizon e 10% de soro fetal de bovino (FBS) (Invitrogen Life Technologies) numa
2
.
Os testes biologicos foram realizados do seguinte modo: A viabilidade celular

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 9 109


seguindo as instruções do fabricante. Resumidamente, as células (1x104/poços) foram
semeadas em placas de 96 poços e tratadas com várias concentrações do derivado
tiazacridínico ao longo de um tempo de 72 horas. Utilizou-se o quimioterapêutico Amsacrina

foi lida a 570 nm. O estudo foi aprovado pelo cômite de ética da UFPE.

3 | RESULTADOS E DISCUSSÃO

benzilideno)tiazolidina-2,4-diona (LPSF/AA-57) é relativamente simples e apresentou

segura. O composto teve seu Ponto de Fusão (PF) e Índice de Retenção (RF) de 195.8°C e
0,45 (n-Hexano/AcOEt 7:3), respectivamente. Com a utilização da técnica de Espectrometria

m/z = 481, relativo a formação do aduto entre o íon molecular 480 e uma molécula de
Hidrogênio; o (M+H) m/z = 193, contendo a porção acridínica e um CH2; e o (M+H) m/z =
235, relacionado a porção acridínica e parte do anel tiazolidínico.

de m/z 180, 193, 235.

composto LPSF/AA-57 teve tempo de retenção (Tr) de 9,845 min.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 9 110


composto tiazacridínico AA-57

As bandas principais observadas no espectro de Infravermelho do composto LPSF/


AA-57 foram as das ligações entre C=C, C-H, C-N e C=O. Estes dados serviram como

Figura 3- Espectro de IV do LPSF AA- 57. Deformação axial normal de C=O, 1745 cm-1, 1691 cm-
1
. Deformação axial das ligações C=C do anel, 1614 cm-1. Deformação axial de C-N, 1375 cm-1.
Deformação angular fora do plano de C-H de aromático, 750 cm-1. Deformação angular de C=C, 673
cm-1

A citotoxicidade do derivado tiazacridínico foi avaliado em células mononucleares


do sangue periférico (PBMC) a partir de indivíduos saudáveis e em linhagens de células

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 9 111


tumorais de diferentes histotipos. O composto foi testado em concentrações de 1, 10 e
100 uM durante 72 horas. As concentrações de droga que inibiu o crescimento celular em
50% em comparação com células não tratadas (IC50) estão resumidos na Tabela 1. Assim,
ela mostrou atividade anticancer em 3 das linhagens testadas (HL 60,
especial o HL 60, e não apresentou citotoxicidade nas celulas saudáveis (PBMC).

Valores da IC50

Linhagens celulares

Composto HL 60 K562 Molt-4 Du-145 Raji PBMCs


AA-57 37,77±18,53 51,82±7,84 44,07±22,55
Tabela 1 – Concentrações do composto AA-57 que inibiram o crescimento celular em 50% (IC50) nas

4 | CONCLUSÕES
A metodologia de síntese empregada obteve um bom rendimento do composto

teve seu grau de pureza considerado satisfatório. Além disso, foi possível comprovar
sua estrutura química através do seu padrão de fragmentação no modo +MS2 gerado
pela Espectrometria de massa. Além disso, os testes antitumorais mostraram que estes
derivados podem ter resultados importantes na busca de compostos mais seletivos e menos
tóxicos para o tratamento do câncer. Sendo assim, podemos considerar que a metodologia
de síntese aqui descrita é uma excelente forma para se obter derivados tiazacridínicos de
forma simples, econômica e segura.

AGRADECIMENTOS
Ao NUPIT SG, UFPE, INCT-if, FACEPE, CNPq e CAPES pela infraestrutura e pelo

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 9 113


CAPÍTULO 10
CONCEPÇÃO DE CLÍNICA AMPLIADA E OS
DESAFIOS DAS PRÁTICAS EM SAÚDE MENTAL NA
ATUALIDADE

Data de aceite: 10/01/2022 Constatou-se que a proposta de Reforma


Data de submissão: 14/10/2021 Psiquiátrica trouxe uma nova roupagem para
tratar o sofrimento psíquico, indicando a adoção
de ações interdisciplinares desenvolvidas a

Celian Araújo da Nóbrega Souza


se para o estabelecimento de uma ampliação da
Centro Universitário UNIFIP Patos, Paraíba
clínica, superando a hierarquização dos saberes,
Curso de Bacharelado em Serviço Social
http://lattes.cnpq.br/8503395282861196 valorizando a participação do usuário e da família,
ao qual se direciona a clínica de saúde mental. A
Carmen Silva Alves partir da apreciação dos resultados, foi possível
Centro Universitário UNIFIP Patos, Paraíba observar que na instituição em questão, a clínica
Curso de Bacharelado em Serviço Social
http://lattes.cnpq.br/2344504320743036 A falta da constância de reuniões e diálogos
entre a equipe é um dos fatores que sinaliza
ações isoladas no cotidiano do serviço, inclusive
Artigo de pesquisa original apresentado ao Curso de na construção e reconstrução do PTS. Assim
Bacharelado em Serviço Social do Centro Universitário sendo, o trabalho multidisciplinar se sobressai
de Patos (UNIFIP), como requisito parcial à obtenção
em relação ao trabalho interdisciplinar e provoca
do título de bacharel em Serviço Social.
impasses na hora de tecer o cuidado. Observa-se
que, apesar de a instituição promover atividades
desenvolvidas pelas especialidades que compõe
RESUMO: O presente trabalho delineou a
em executar ações concernentes com a política
das práticas desenvolvidas na perspectiva
de clínica ampliada no Centro de Atenção postos na própria organização multidisciplinar,
Psicossocial - CAPS I – Dr. Fernando Antônio dentro da própria equipe.
de Araújo, localizado em Santa Luzia/PB. Para PALAVRAS-CHAVE: Clínica ampliada.
a obtenção dos resultados, foi utilizada como Interdisciplinaridade. Reforma Psiquiátrica.
metodologia à pesquisa de campo, descritiva,
explicativa com análise qualitativa dentre uma
CONCEPT OF EXPANDED CLINIC AND
método crítico dialético. Os dados dessa pesquisa THE CHALLENGES OF MENTAL HEALTH
foram coletados através de um questionário PRACTICE NOWADAYS
semiestruturado. Os resultados foram analisados ABSTRACT: This project outlined the perception
sobre a ótica de análise de conteúdo, a partir de of the multidisciplinary team regarding the
contribuições teóricas existentes na literatura. practices developed in the perspective of

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 114


expanded clinic at the Psychosocial Care Center - CAPS I - Dr. Fernando Antônio de Araújo,

of content analysis to analyse the results. From this perspective it can be noticed that the

the adoption of interdisciplinary actions developed from multiprofessional teams; it has aimed

in the daily life of the service and also in the construction and reconstruction of the PTS.

the mental health policy due to the fact that the challenges are placed in the multidisciplinary

KEYWORDS: Expanded clinic. Interdisciplinarity. Psychiatric Reform.

1 | INTRODUÇÃO
A temática “Concepção de
mental na atualidade” foi idealizada a partir das vivências no campo de estágio curricular
obrigatório I e II do Curso de Bacharelado em Serviço Social, do Centro Universitário
(UNIFIP) considerando as observações acerca da clínica ampliada no Centro de Atenção
Psicossocial (CAPS I) Dr Fernando Antônio de Araújo, localizado em Santa Luzia, município
do Estado da Paraíba.
clínica

respeito à Reforma Psiquiátrica. Nesse sentido, a avaliação do trabalho interdisciplinar na

desenvolvidas nos serviços ofertados pelo CAPS I, em Santa Luzia/PB.

os segmentos: físico, psíquico e social, não apenas associado à cura de doenças. Nesse

Consideramos que esse debate seja necessário, tendo em vista, que o tema
proposto apresenta relevância pelo fato de fomentar nas equipes que atuam na política
de saúde mental, uma consciência constante para promover a articulação dos saberes,
pautada na consolidação da proposta da Reforma Psiquiátrica, com contribuições para

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 115


a ruptura tradicional, marcadas por extensas internações nos hospitais psiquiátricos e
manicômios, caracterizados por isolamento, violências, abandonos, perda de vínculos
familiares, segregação e uso indiscriminado de medicamentos.

atua na perspectiva da Clínica Ampliada, a partir das práticas desenvolvidas no CAPS I, na

práticas em saúde mental da equipe do CAPS I, sob as prerrogativas da Reforma Psiquiátrica;

averiguar como a equipe multidisciplinar do CAPS I, buscam a superação do binômio


saúde-doença, a partir da perspectiva da Clínica Ampliada; e elencar as possibilidades e
Clínica Ampliada.

2 | METODOLOGIA

de abordar discursões da literatura, que implica no entendimento sobre a temática


apresentada. Trata-se de uma pesquisa qualitativa, utilizando-se da pesquisa de campo
descritiva e explicativa à luz do método crítico dialético, que com base em Minayo (2009, p.

dos motivos, das aspirações, das crenças, dos valores e das atitudes”. Nesse sentido,
considera a importância de descrever os dados, utilizando a interpretação dos fenômenos
de uma forma totalizante, considerando que os fatos sociais não são compreendidos de
forma isolada.
A pesquisa foi realizada no Centro de Atenção Psicossocial I - Dr. Fernando Antônio
de Araújo, localizado em Santa Luzia-PB. O público alvo foi composto pela equipe técnica

usado para a coleta de dados um questionário, contendo perguntas objetivas e subjetivas,

do trabalho da clínica ampliada na instituição. Os dados coletados da pesquisa foram


analisados utilizando o método de análise de conteúdo, conforme indicações de Bardin

de conhecimentos relativos às condições de produção/recepção (variáveis inferidas) destas


mensagens”.
Durante o procedimento da pesquisa, foi apresentado o Termo de Consentimento
Livre e Esclarecido (TCLE) revelando a natureza do trabalho e os aspectos éticos, no
que diz respeito à contribuição dos participantes. A proposta da pesquisa foi previamente
validada pelo Comitê de Ética em Pesquisa (CEP) do Centro Universitário d– UNIFIP, sendo
o parecer favorável para a realização da mesma.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 116


3 | RESULTADOS E DISCUSSÃO
O CAPS I é uma instituição pública municipal, que estar em consonância com a
Política Nacional de Saúde Mental. Sendo assim, a instituição atende em seu cotidiano

serviço, contemplando o que estar previsto na Reforma Psiquiátrica. Os atendimentos do


CAPS I – Dr. Fernando Antônio de Araújo ocorrem em sua área de abrangência, equivalente
ao vale do Sabugi, composto pelas cidades de Santa Luzia, São José do Sabugi, São
Mamede, Junco do Seridó e Várzea.
Nessa perspectiva, a presente pesquisa tratou de obter elementos que caracterize
a ampliação da clínica no CAPS I de Santa Luzia, seguindo os preceitos que materializa
a Reforma Psiquiátrica. Com isso, constatar por parte das especialidades que compõe

em permanecer amarradas no cotidiano dos serviços substitutivos..


Conforme os resultados apresentados, a equipe de nível superior é composta por
02 Psicólogos, 02 Assistentes Sociais, 01 Enfermeiro, 01 Educador Físico e o médico

I. Com isso, a instituição realiza atendimentos, promovendo a diversidade de saberes na


assistência aos seus usuários. Desta forma, em consonância com a portaria 224 instituída

instituição em questão (SILVA, OLIVEIRA, KAMIKURA, 2014). A respeito dessa organização


é possível sinalizar que:

equacionar problemas inesperados e outras questões que porventura

para além dos resultados obtidos com a pesquisa, observou-se que uma grande demanda
de atendimento dos usuários ao serviço, ocorre no dia de atendimento médico. Isso mostra a

a perspectiva do cuidar, medicar, curar, evidenciando assim, o status


detrimento aos demais saberes presentes no mesmo espaço. Deste modo, a medicalização
ou a presença do receituário médico é uma constância neste “novo” espaço psicossocial.
Sob o ponto de vista da nova política de saúde mental, essas práticas descaracterizam
os procedimentos voltados a uma reabilitação psicossocial, vinculada a ideia da
interdisciplinaridade das ações capsianas, mantendo-se a interpretação que garante um

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 117


mental, sob pena de manutenção da clínica fechada, conservadora, tradicionalista, no
interior desses espaços de reabilidades, que está para além do que é “doente” e “mal visto”

não é apenas psicopatologia, é uma complexa rede de saberes que se entrecruzam”.


A Reforma Psiquiátrica é um processo evolutivo que traz uma abordagem teórica,
capaz de propor na prática, ações, seja por meio dos atores que compõe essas estratégias

em serviços extras-hospitalares. Toda essa articulação possibilita uma Atenção Psicossocial


compartilhada, capaz de atender as demandas dos usuários, e contribuir para uma melhor
qualidade de vida, respeitando as diferenças através da condição de inclusão dessas
pessoas no convívio da sociedade,

Reforma Psiquiátrica
para os entrevistados. Ao passo em que respondem:
A

De modo geral, os trechos acima evidenciam um bom entendimento sobre a


Reforma Psiquiátrica, de acordo com a revisão de literatura. Na ocasião é possível sinalizar

clareza o intuito de romper com o modelo manicomial que usa o método de trancar para
tratar.
Por outra visão, é válido ressaltar a importância da Reforma Psiquiátrica em termos

mental. Porém, de acordo com a exposição da fala abaixo, há uma preocupação de não

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 118


existir de fato uma rede de cuidados, onde possa se efetivar a assistência ao indivíduo que
necessita de um atendimento em situação de crise. Vejamos as considerações abaixo,

não existia uma estrutura hospitalar para uma melhor conduta e acolhimento

Tal delineamento propõe um entendimento que traduz uma série de informações

expressa na fala, sobre realizar atendimentos sem o auxílio necessário dos dispositivos
que compõe a RAPS. Realizar o atendimento a nível só de CAPS, traduz uma falha na
rede, isso provoca um agudizamento do atendimento, sem ter outras possibilidades de
suporte. Por isso, a recorrência de defesa ao hospital psiquiátrico, mesmo que os pense
em outros moldes.
Os ideais reformistas representados pelos CAPS coloca em questão um acolhimento
humanizado, capaz de ouvir e dar voz aos problemas evidenciados por essas pessoas,
porém, em outros espaços as equipes não são capacitadas, desde a sua graduação para
lhe dar com situações de pessoas em crise. Na hipótese de necessitar de uma breve
internação, o hospital geral, é o mais propício a realizar esse atendimento, pois mantém
um cuidado clínico no território. Porém, como enfatizado pelo entrevistado, existe impasses
nessas instituições que impossibilitam um cuidado em rede, como aponta Echebarrena,

relacionado com estigmas e preconceitos. O desconhecimento sobre o

Ao tratarmos sobre integralidade das ações via CAPS, perguntamos: como você
avalia o processo de cuidados em saúde mental, a partir do CAPS I de Santa Luzia, tendo
em vista a integralidade da pessoa assistida? Os entrevistados apontaram as seguintes
falas. Vejamos,
O CAPS I de Santa Luzia apresenta-se como essencial no cuidado em saúde

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 119


É perceptível ações de cunho multidisciplinar apreciada na composição da primeira
citação, isso mostra a tendência na fragmentação do cuidado. O trabalho calcado apenas

de sua prática. Durante o decurso do estágio supervisionado pudemos observar a falta


de organização do próprio serviço, em priorizar uma dinâmica que consiga estabelecer

Outra questão que visualizamos durante o processo de estágio e que impossibilita

do suporte da RAPS, tendo em vista essa sobrecarga evidenciar o CAPS I como ponto
exclusivo para atendimentos em saúde mental. Nesse caso, o aumento excessivo das

durante o serviço para discutir de forma coletiva um melhor direcionamento sobre ações
que possibilite de fato práticas interdisciplinares, com intuito de eliminar a hierarquização
dos saberes e garantir a integridade da assistência.
A respeito da segunda fala, essas atividades desenvolvidas tem por intuito atender
as demandas dos usuários em sua totalidade, garantindo uma assistência que proporcione
um acompanhamento em todos os segmentos (físico, psíquico, social).

interdisciplinares, com propósito de considerar as particularidades expressas por cada


sujeito, e assim estabelecer um tratamento que potencialize atividades que lhes propiciem
autonomia, bem-estar, fortalecimento de vínculos familiares e comunitários e credibilidade
nas suas capacidades de produção e geração de renda..
Diante dessa articulação proposta, que impede intervenções unitárias no campo da
saúde mental, os sujeitos da pesquisa foram questionados sobre o desenvolvimento de
ações interdisciplinares no CAPS I. A pesquisa obteve resposta positivas em sua maioria,

integralmente transcritas,

ações são desenvolvidas pela equipe Psicossocial (Assistente Social e

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 120


no que diz respeito à última fala apresentada, apesar de evidenciar um discurso atrelado a
ações interdisciplinares desenvolvidas na instituição em questão, esta declara que não são
realizadas entre o quantitativo total que compõe a equipe técnica.
Com isso, podemos observar que a falta de clareza sobre a interdisciplinaridade e
suas contribuições na saúde mental, pode contribuir para que os serviços adotem práticas
tradicionais, envolvendo a hierarquização de especialidades. Como podemos observar na
sequência da fala abaixo,

Na literatura, podemos constatar as diversas especialidades que compõe a equipe

requer constantemente orientações conjuntas da equipe, a luz de uma organização que

sobre as ações realizadas, mas sim de propor momentos de falas entre a equipe,
respeitando seus saberes e seus lugares. Nesse contexto, incluir discursões sobre as
demandas apresentadas, potencializando um acompanhamento psicossocial, atentando
para a singularidade dos sujeitos. Nesse entendimento Vasconcellos expõe que:
Tal empreitada mostra sua relevância dado que a integração interdisciplinar

Como se pode notar diante das falas expostas acima, existe uma confusão no

entrevistadas considerou que no trabalho desenvolvido não existe a prática interdisciplinar.


Segue a colocação referente à fala,

ainda temos um percurso a seguir até conseguirmos desenvolver um trabalho

Constatamos diante de tal resposta, algumas impossibilidades de realizar ações


interdisciplinares no CAPS I, em decorrência dos fatos mencionados, é possível perceber
que a jornada dupla de trabalho ocasiona no cotidiano dos serviços impasses na hora de
tecer momentos de diálogos entre a equipe. Isso ocorre pela baixa remuneração salarial de

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 121


Vasconcelos (2002) aponta que essa defasagem salarial tem haver com os ajustes
das políticas neoliberais. Sendo assim, para favorecer a mudança de paradigma no que
diz respeito ao contexto de saúde pública, como a prática interdisciplinar no interior dos
serviços substitutivos é pertinente envolver uma reciprocidade em termos de salários,
condições de trabalho digna e uma carga horária que evite o vínculo excessivo laboral.
A proposta de clínica ampliada tem por base a articulação e inclusão de diversos
enfoques e disciplinas para a construção do Projeto Terapêutico Singular (PTS), tendo
por base a prerrogativa integrativa entre os saberes. Nesse sentido, perguntamos: você

entrevistados responderam da seguinte forma,

São considerações que provocam críticas relevantes de como a Reforma Psiquiátrica

substitutivos ações que despolitiza uma Atenção Psicossocial integral. Deste modo, Leal e
Antoni (2013) traz uma análise sobre o PTS,

clínica ampliada, traz evidências


que supera o modelo tradicional da clínica, na qual desresponsabiliza apenas uma
especialidade, com foco na integralidade das ações. Dessa forma, o envolvimento de todos

o sujeito acometido de sofrimento psíquico.


O paradigma Psicossocial estabelece rupturas com a clínica tradicional, ampliando

para a efetivação da Clínica Ampliada no CAPS I, na ocasião obtivemos as seguintes


respostas,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 122


na aplicabilidade o conceito de

deixando transparecer a falta de manejo em escassos momentos integrativos entre a equipe.


Esse procedimento prejudica de forma instantânea a ampliação da clínica, tendo em vista
o pouco rendimento em favor de uma assistência centrada no sujeito, na sua história e em
suas particularidades. A falta de discursões sólidas, em espaços democráticos, onde todos

em uma sobreposição de saberes.


A ampliação da clínica requer o envolvimento de atores que contribuam na efetividade
da cidadania dos sujeitos, com base em um novo modelo de assistência que atue na defesa
pela liberdade, ampliando possibilidades de intervir nos mais diversos complexos que
envolve a saúde mental. Sendo assim, vejamos as seguintes considerações:

JORGE et al

A Clínica Ampliada supera práticas tradicionais e possibilita uma reabilitação

para enfatizar uma assistência individual/grupal/familiar que apresente resultados positivos


frente a ações terapêuticas compartilhadas.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 123


Nota-se que as falas não se comunicam entre se, a primeira interlocução demonstra
a falta de conexão entre ambas as especialidades. Isso mostra lacunas entre a equipe.
Em decorrência de ser apontado um atendimento imediato, muitas vezes desencadeado
por uma situação de crise, na qual o tempo é uma condição necessária para realizar o
acolhimento humanizado, esse procedimento é de extrema importância para o usuário de
saúde mental.
Sobre os apontamentos que a segunda fala traz, estes são eminentemente
importantes para a ampliação da clínica, uma vez os familiares e usuários desenvolvem
um papel fundamental na formulação do PTS. São propostas concretas que traduz na
prática os pressupostos da Reforma Psiquiátrica, elencando um novo modelo que partilha
de atores sociais para efetivar uma Atenção Psicossocial ampla e integral.
Sobre a última interlocução, o entrevistado evidenciou a importância de aumentar os

as mais variadas atividades em grupo e os participantes escolhe evidenciando seu

credibilidade nas suas capacidades de produção (BRASIL, 2004).

Para construir uma Clínica Ampliada nos CAPS, é preciso considerar a necessidade
de realizar constantemente reuniões entre a equipe. Os entrevistados abordam essa
informação claramente, evidenciando a dicotomia entre prática e teoria. Com isso,
a pesquisa mostra que apesar da Reforma Psiquiátrica ser um movimento político, em
constante movimento, que busca mudanças para superar um modelo tradicional e suas
práticas, ainda é possível conviver nos CAPS, com uma realidade que apresenta entraves
na hora de tecer o cuidado a pessoa com sofrimento psíquico.
O PTS por ser um recurso da Clínica Ampliada, visa o apoio mútuo entre a equipe
técnica, ampliando o objeto de trabalho, considerando que a saúde mental estar associada
a vários condicionantes. Devido a isto, necessita de um cuidado que ampare toda essa
gama de necessidades para uma melhor qualidade de vida, preservando a cidadania dos
indivíduos. Desta forma, Lúcia Rosa expõe que “o sujeito acometido pelo transtorno mental
é recomposto em sua totalidade relacional com o corpo social. É percebido integralmente,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 124


4 | CONSIDERAÇÕES FINAIS

cotidiano dos CAPS uma dimensão sociocultural que expressa o protagonismo da clínica
voltada para o atendimento médico. Ou dito de outra forma, o modelo de clínica tradicional
ainda encontra espaço nos serviços substitutivos, apesar da oferta de especialidades, o
sofrimento psíquico ainda é arraigado no imaginário das pessoas como algo exclusivo
patológico.

calcado na multidisciplinaridade. Tal referência, não impossibilita o desenvolvimento de


ações voltadas ao público alvo do CAPS. No entanto, a falta de um trabalho de cunho
mais interdisciplinar, acaba por sobrecarregar determinadas especialidades que atuam no
interior do serviço, em detrimento de ações mais coletivas que valorizem o desenvolvimento
e a autonomia dos usuários e familiares. A manutenção de aspectos conservadores e

manter-se cada um em seu espaço de especialidade, sem avançar sob a perspectiva


reformista.
Outro fator que desfavorece a ampliação da clínica no CAPS e evidencia possíveis
hierarquias estar relacionado com a falta de organização multidisciplinar dentro da própria

trabalho.
Nesse sentido, podemos considerar como foi apontado pelos entrevistados, à
construção e reconstrução do PST não acontecer sob a ótica de discursões coletivas entre
a equipe. Também observamos sobre diferenças salariais, o que impulsiona a equipe o
favorecimento a fragmentação da carga horária. Com isso, evidenciamos mais um fator
agravante que desfavorece a construção de uma agenda para discutir os casos em sua
totalidade.

práticas em saúde mental ainda sinalizam a necessidade de ajustes para fomentar uma
ampliação da clínica a integralidade. Porém, o CAPS I de Santa Luzia apesar dos percalços
existentes no cotidiano do serviço, mesmo assim, consegue realizar um atendimento de
base comunitária, a luz de ideais que cogitam enaltecer o sujeito e sua singularidade.
Deste modo, os usuários tem a oportunidade de traçar novos capítulos de uma história
que evidencie uma qualidade de vida, associada a uma assistência que entrelace as mais
diversas variáveis dos complexos sociais.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 125


REFERÊNCIAS
AMARANTE, P. Saúde Mental e atenção psicossocial. Rio de Janeiro: Fiocruz, 2007.

BRASIL. Ministério da Saúde. Saúde mental no SUS: os Centros de Atenção Psicossocial. Brasília,

mar. 2020.

BARDIN, Laurence. Análise de conteúdo. Lisboa: Edições 70, 1977.

ECHEBARRENA, Rodrigo Cunha. Leitos de saúde mental em hospitais gerais: o caso do Rio de
Janeiro. 2018. 95 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Escola Nacional de Saúde Pública

LEAL, B. M; DE ANTONI, Clarissa. Os Centros de Atenção Psicossocial (CAPS): estruturação,


interdisciplinaridade e intersetorialidade. Aletheia, n.40, p.87-101, jan./abr. 2013. Disponível em:

MINAYO, M. C. S. (Org.). Pesquisa social: teoria, método e criatividade. 28 ed. Petrópolis: Vozes,
2009.

PINTO, Diego Muniz; JORGE, Maria Salete Bessa et al. Projeto terapêutico singular na produção do
cuidado integral: uma construção coletiva. Texto & Contexto-Enfermagem, Florianópolis, v. 20, n. 3, p.
493-502, 2011.

ROSA, Lúcia Cristina dos Santos. Transtorno mental e o cuidado na família. 2ª ed. – São Paulo,
Cortez, 2008.

SILVA, Solimar Pinheiro; OLIVEIRA, Adriana Leonidas; KAMIMURA, Quésia Postigo. Capacitação em
saúde mental: entre a realidade e as ofertas do Ministério da Saúde. Sistemas & Gestão, v. 9, n. 3,

em um CAPS. SMAD, Revista Eletrônica Saúde Mental Álcool e Drogas (Edição em Português), v.

maio 2020.

VASCONCELOS, Eduardo Mourão. Serviço Social e interdisciplinaridade: o exemplo da saúde


mental. In: ROSA, Lúcia Cristina dos Santos; PEREIRA, Ivana Carla Garcia; BIANETO, José Augusto;
VASCONCELO Eduardo Mourão (org.).
da interdisciplinaridade. 2ª ed. – São Paulo: Cortez, 2002, p. 35-68.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 10 126


CAPÍTULO 11
MADUREZ SEXUAL Y ESPECTRO TRÓFICO DE
Pterois volitans (Linnaeus, 1758) EN EL PARQUE
NACIONAL SISTEMA ARRECIFAL VERACRUZANO,
MÉXICO

Data de aceite: 10/01/2022 crustáceos conforman el 20% de su dieta y este


Data de submissão: 07/10/2021 porcentaje disminuye con el crecimiento del pez
con 14% para 20-29.9cm y 2% para 30-40.5cm,
en otras palabras, su dieta cambia a medida que
crece pasando de consumir peces y crustáceos
Emmanuel Velasco-Villalobos
a ser enteramente piscívoro. A partir de los
Universidad Veracruzana, Facultad de Biología
Xalapa – Veracruz
alimentación, se determinó que Lucania parva y
villalobos Apogon sp. son las principales presas de las que
se alimenta.
Elizabeth Valero-Pacheco PALABRAS CLAVE: Pterois volitans, Pez león,
http://orcid.org/0000-0002-5619-740X PNSAV, Madurez sexual.
Luis Gerardo Abarca-Arenas
https://orcid.org/0000-0001-6154-7788 SEXUAL MATURITY AND TROPHIC
SPECTRUM OF Pterois volitans (Linnaeus,
1758) IN THE SISTEMA ARRECIFAL
VERACRUZANO NATIONAL PARK,
RESUMEN: En este estudio se determinó la MEXICO
madurez sexual de 127 peces león de la especie ABSTRACT
Pterois volitans (Linnaeus, 1758) capturados
en el Parque Nacional Sistema Arrecifal Pterois volitans (Linnaeus, 1758) captured in
Veracruzano (PNSAV) en México, para esto se the Sistema Arrecifal Veracruzano National
tomaron los datos biométricos (longitud total,
longitud patrón y peso) y se realizó un análisis
histológico de las gónadas de cada ejemplar, performing histological analysis of the gonads of
para determinar sexo y fase de madurez. Se each specimen, to determine sex and maturity
observaron dos de las fases de madurez, se logró
diferenciar entre organismos juveniles y adultos;
hembras y machos. Los resultados obtenidos organisms: males and females. The observations
fueron 56 hembras de éstas 33 se encontraron resulted in 56 females, 33 of them at stage III and
en la fase III y 23 en la fase IV de madurez 23 at stage IV of sexual maturity and 71 males,
sexual y 71 machos de éstos 35 se encontraron 35 of them at the stage III and 36 at stage IV.
en la fase III y 36 en la fase IV. Todos los peces
capturados ya eran maduros sexualmente con
tallas de 10.2 cm a 40.5 cm. Se analizó su dieta
en tres intervalos de tallas, esto mostró que los crustaceans constitute the 20% of their diet and

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 127


concluding that Lucania parva and Apogon sp
KEYWORDS: Pterois volitans

1 | INTRODUCCIÓN
El establecimiento de Pterois volitans en las costas del Golfo de México representa
una grave amenaza para las especies de peces, crustáceos, y en general para el equilibrio
del ecosistema marino, por sus características biológicas, como su capacidad de desovar
hasta cada 2-3 días durante todo el año (Gardner et al., 2015) y una fecundidad anual media
de dos millones de huevecillos, un estado larval con duración de veinticinco a cuarenta
días, que permanece en el zooplancton y se dispersa por medio de las corrientes marinas

coral y cerca del fondo marino hasta los doscientos metros de profundidad (Ruiz-Carus et
al., 2006). En su distribución natural la talla máxima reportada es de treinta centímetros,
a diferencia del mar Caribe donde ya se reportan tallas de treinta y nueve centímetros
et al
que puedan controlar sus poblaciones en el océano Atlántico, este puede alimentarse con
total libertad en las costas y arrecifes veracruzanos.

2 | DESCRIPCIÓN DEL MÉTODO

Toma de muestras
Los peces fueron capturados con arpón en las partes sur del Parque Nacional
Sistema Arrecifal Veracruzano (PNSAV) por pescadores artesanales de Antón Lizardo,
Veracruz (Fig. 1). Las medidas biométricas que se tomaron en cada pez fueron: Longitud
total (LT) en centímetros, Longitud patrón (LP) en centímetros y Peso (W) en gramos,

hasta la base de las aletas pectorales para localizar y extraer las gónadas.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 128


Figura 1. Ubicación del área de estudio y polígono correspondiente al área del Parque Nacional
Sistema Arrecifal Veracruzano (PNSAV), México. (mapa realizado por Emmanuel Velasco Villalobos,
2020).

Determinación de Sexo y Madurez Sexual


Se analizó la gónada por individuo, tomando datos de tamaño, color e histología
de las células. Para analizar la histología de las células gonádicas se tomó una pequeña
porción de tejido gonádico, colocándolo entre un portaobjetos y cubreobjetos con solución
salina, entonces se comprime entre ambos objetos para lograr una extensión y disociación
de las células gonadales (ovocitos y espermatocitos) para su observación bajo el

las fases propuestas por Holden y Raitt (1975) y poder determinar el estado de madurez
gonádica.
Estructura de la dieta
En la separación y análisis de las estructuras duras de las presas, se empleó un
microscopio estereoscópico y para las partes blandas se utilizó el microscopio óptico.
Además, todas las presas (organismos completos o estructuras duras) se pesaron en una

dependiendo del estado de digestión en el que se encontraban estas, el cual fue

de los peces, se observó la morfología externa (piel, espinas, aletas y radios); con ayuda de

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 129


Trabajo de gabinete
Para el análisis de los datos obtenidos se realizó una matriz de datos con los siguientes

(cm), Peso (W) (g), sexo, peso estómago lleno/vacío, tipo de contenido estomacal. Con la

aplicaron los siguientes índices: Frecuencia de Ocurrencia (%FO), Porcentaje Numérico


(%N) y Gravimétrico (%P) (Hyslop, 1980), incorporados en el Índice de Importancia
et al
las presas como principales, secundarias u ocasionales (Hureau, 1970).
El porcentaje de Frecuencia de Ocurrencia (%FO), muestra la frecuencia de cada
presa en el número total de estómagos, y se expresa como el porcentaje del total de los
estómagos analizados (Hyslop, 1980), mediante la fórmula: %FO = N/ NE * 100, Donde:
N = número de estómagos en el cual apareció un tipo de presa, NE = número total de
estómagos.
Con el Porcentaje numérico (%PN), se registra el número de presas de cada especie,
expresado como el porcentaje del número total de presas presentes en todos los estómagos
(Hyslop, 1980). Las presas que se encontraron en un estado de digestión avanzado se
registraron con base a sus restos. Para peces se tomaron en cuenta, el número pareado
de ojos y otolitos; para los crustáceos el número pareado de ojos y quelas (Talent, 1976).
La fórmula empleada es la siguiente: %N = n /NT * 100 Donde: n = número total de cada
presa, NT = número total de presas de todas las especies.
Se aplicó el Porcentaje Gravimétrico (%P), para conocer la importancia en peso
de las presas. El peso total de una presa se expresa como porcentaje del peso total del
contenido de todos los estómagos (Hyslop, 1980). La fórmula es la siguiente: % P = P/ PT
* 100 Donde: P = peso (en gramos) de cada presa determinada, PT= peso total de todas
las especies presas.
El Índice de Importancia Relativa (IIR), conformado por los resultados de los índices
anteriores permite describir la importancia de cada una de las presas en la dieta de cada pez

se calculará por la siguiente fórmula: IIR= (%N + %P) * %FO Donde: % N = porcentaje del
número, % P = porcentaje del peso o gravimétrico, % FO = porcentaje de frecuencia de
ocurrencia.

y ocacionales: Q = % N * % W Donde: %N = porcentual numérico, %W = porcentual

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 130


200 = Presas secundarias, Si Q < 20 = Presas ocasionales.

3 | RESULTADOS
De 127 peces león analizados, se determinó que 56 de ellos fueron hembras y 71
machos (Fig. 2). En cuanto a la madurez sexual de los peces hembra: 33 se encontraron
en la fase III y 23 en la fase IV de madurez. La madurez sexual de los peces macho: 35 se
encontraron en la fase III y 36 en la fase IV (Tabla 1). No se encontraron peces en las fases
I y II (Fig. 3). Se determinó que la totalidad de los peces león capturados ya eran maduros
sexualmente.
Las hembras tuvieron una LT mínima de 11.5 cm con un W de 23 g. y una LT máxima
de 38.5 cm con un W de 1025 g. Los Machos tuvieron una LT mínima de 10.2 cm con un W
de 20 g y una LT máxima de 40.5 cm con un W de 1050 g (Fig. 4).

Figura 2. Número de hembras y machos del pez león P. volitans analizados procedentes del PNSAV,
México.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 131


Fase Sexo Gónada completa Estructura celular de Estructura celular de
gónadas (Fotos). gónadas (Esquemas).
III Hembra

III Macho

IV Hembra

IV Macho

Tabla 1. Determinación del sexo y fases de madurez gonádico por individuo del pez león P. volitans

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 132


Figura 3. Fases de madurez gonádica del pez león P. volitans procedente del PNSAV, México.

Figura 4. Longitud Total (cm) de hembras y machos del pez león P. volitans procedente del PNSAV,
México.

Para conocer cual grupo alimenticio predomina en su dieta, las presas que se
extrajeron de los estómagos se organizaron con relación al grupo taxonómico al que
pertenecen y se calculó el porcentaje de cada uno. En el caso de este estudio solo se
encontraron presas pertenecientes a peces y crustáceos. Los estómagos de las hembras de
Pterois volitans tuvieron a los peces como el 82% del contenido y solo el 18% corresponde
a crustáceos (Fig. 5a), de forma similar los machos tienen predominantemente a los peces
como parte de su dieta con 92% y a los crustáceos con un porcentaje del 8% (Fig. 5b), lo
cual es aún menor que en las hembras. Lo que a grandes rasgos indica una preferencia por
parte de esta especie a los peces como principal fuente de alimento.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 133


Figura 5. Porcentaje de los grupos de presas, que componen la dieta de a) Hembras y b) Macho de la
especie Pterois volitans en el PNSAV, México.

El análisis de la dieta por intervalos de tallas para conocer sus preferencias de


alimento a medida que crecen los peces, se apreció que el intervalo menor de 10-19.9 cm,
los crustáceos conforman el 20% de su dieta, este porcentaje disminuye con el crecimiento
del pez con 14% para 20-29.9 cm y 2% para 30-40.5 cm (Fig. 6). Este cambio en la dieta
a medida que el pez crece puede indicar un cambio en los nutrimentos que necesita y una
diferencia en las zonas de caza entre cada intervalo de tallas.

Figura 6. Porcentaje de los grupos de presas que se encontraron en tres intervalos de talla para la
especie Pterois volitans en el PNSAV, México.

El análisis estomacal de P. volitans evidenció la composición del régimen alimenticio,

taxonómica de las presas registró 20 especies pertenecientes a dos Phyla: Arthropoda,

familias: Portunidae con una especie Cronius tumidulus, Palaemonidae con una especie
Palaemon northropi y Rhynchocinetidae con una especie Rhynchocinetes rigens.
Para el Phylum Chordata con dos especies

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 134


Apogon sp. y Gobiidae con dos especies Bathygobius soporator y
Coryphopterus sp Centropomidae con una especie Centropomus sp Gerreidae con dos
especies Diapterus sp. y Chaenopsidae con una especie Emblemariopsis
sp Labrisomidae con una especie Gobioclinus sp Grammatidae con una especie
Blenniidae con dos especies Ophioblennius atlanticus y Parablennius
marmoreous; Chlorophthalmidae con una especie Chlorophthalmus sp.; Fundulidae con
una especie Lucania parva; Mugilidae con una especie Mugil sp.; Holocentridae con una
especie Myripristis jacobus; y un miembro de la familia Tetraodontidae cuyo genero no pudo

El IIR indicó que las presas con mayor importancia en la dieta del pez león presente
en el PNSAV son los peces Lucania parva, Apogon sp., Diapterus sp. y Eugerres plumieri
(Fig. 7). Los crustáceos encontrados no resultaron tener un alto índice de importancia, pero
de las tres especies registradas Palaemon northropi y Rhynchocinetes rigens son las de
mayor importancia.

Figura 7. El índice de importancia relativa (IIR) de las presas encontradas en P.volitans en el PNSAV,
México.

pez
león en tres niveles: Principales (Rojo), Secundarias (Amarillo) y Ocasionales (Verde). El
resultado es que Lucania parva y Apogon sp., son presas principales. Eguerres plumieri
y Diapterus sp., son presas secundarias, todas las otras presas encontradas entran en la
categoría de ocasionales (Fig. 8).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 135


Lucania parva y
Apogon sp. son las principales presas del pez león en el PNSAV, México.

4 | CONCLUSIÓN
De los 127 ejemplares de P. volitans utilizados en este proyecto, el 100% resultaron
maduros sexualmente de acuerdo con el análisis de las gónadas. Se determinaron 56
hembras y 71 machos de pez león con LT desde los 10.2 cm hasta los 40.5 cm. La especie
invasora P. volitans en el Golfo de México dentro del PNSAV es un pez con características
biológicas que le facilitan colonizar sitios ricos en diversidad como lo es este. El análisis
gonádico mostró que el pez león sin distinción de sexos alcanza la madurez gonádica a los
10.2 cm en el PNSAV, siendo la talla de madurez menor comparada con otros sitios del Golfo
de México (Morris, 2009) y Mar Caribe (Gardner et al. 2015; Sabido-Itzá et al. 2016). Esto
le permite una mayor dispersión en menor tiempo y en el acaparamiento de los recursos
que el ecosistema provee como: alimento, refugio y territorio lo que podría traer como

Respecto a su dieta, se registraron 16 familias de las cuales las más representativas que
forman parte de la dieta del pez león en el PNSAV son: Apogonidae, Blenniidae, Fundulidae,
P.volitans, lo que
las convierte en las más afectadas por esta invasión biológica, estas incluyen los peces:
Apogon sp., Bathygobius soporator, Centropomus sp, Chlorophthalmus sp, Coryphopterus
sp, Diapterus sp., Emblemariopsis sp, Eugerres plumieri, Gobioclinus sp., Gramma loreto,
Lucania parva, Mugil sp., Myripristis jacobus, Ophioblennius atlanticus, Parablennius
marmoreous, Phaeoptyx pigmentaria, Tetraodontidae y crustáceos decápodos: Palaemon
northropi, Rhynchocinetes rigens, Cronius tumidulus. Al analizar estos resultados se
apreció que, si bien hembras y machos de P. volitans consumen principalmente peces y

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 136


crustáceos y que el consumo de estos últimos disminuye a medida que crecen, su dieta

de caza. También se determinó que el pez león asentado en el PNSAV tiene el tipo de dieta
especialista, basada en las especies Lucania parva y Apogon sp como presas principales.

AGRADECIMIENTOS
Agradecemos a las autoridades de la CONANP del H Puerto de Veracruz por facilitar
los ejemplares que fueron analizados en este trabajo. Este trabajo forma parte del proyecto
“Ecología de la Costa Veracruzana” a cargo de la Dra. Elizabeth Valero Pacheco.

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 11 138


CAPÍTULO 12
POTENCIAL EVOCADO AUDITIVO DE LONGA
LATÊNCIA: MONITORAMENTO DE EFICÁCIA
DA INTERVENÇÃO FONOAUDIOLÓGICA EM
ESCOLARES COM DISLEXIA

Data de aceite: 10/01/2022 RESUMO: Introdução: A Dislexia é um


Data de submissão: 13/10/2021 distúrbio que afeta o aspecto da aprendizagem,
principalmente a leitura e a escrita e a discriminação
dos sons e que requer tratamento ao longo da
infância. O Potencial Evocado Auditivo de Longa
Ana Luiza de Faria Luiz
Latência é um dos métodos mais utilizados para
Departamento de Fonoaudiologia. Universidade
a pesquisa clínica de aspectos que incluem o
Estadual Paulista – UNESP
Marília-São Paulo processamento de informações linguísticas. O
http://lattes.cnpq.br/8255593946512682
relevantes na avaliação audiológica, por
Yara Bagali Alcântara oferecer dados objetivos e quantitativos quanto
Departamento de Fonoaudiologia. Universidade à funcionalidade das estruturas auditivas
Estadual Paulista – UNESP
Marília-São Paulo intervenção terapêutica. Objetivo: comparar as
http://lattes.cnpq.br/7869185631217646
intervenção
Brena Elisa Lucas fonoaudiológica de escolares com diagnostico de
Departamento de Fonoaudiologia. Universidade dislexia. Método: Participaram do estudo quinze
Estadual Paulista – UNESP escolares disléxicos com idade inicial de 7 anos e
Marília-São Paulo 11 meses. O potencial evocado auditivo de longa
http://lattes.cnpq.br/4288401742343204 latência foi pesquisado em duas varreduras,
com estímulo tone burst variando em frequência
Carolina Almeida Vieira
e duração entre os estímulos frequente e
Departamento de Fonoaudiologia. Universidade
infrequente apresentados aleatoriamente, num
Estadual Paulista – UNESP
Marília-São Paulo paradigma oddball. Procedimento realizado
http://lattes.cnpq.br/5386577956923698 antes a após a intervenção fonoaudiológica.
Na intervenção foi realizado treinamento das
Simone Aparecida Capellini habilidades fonológicas e metalinguísticas de
Departamento de Fonoaudiologia. Universidade consciência de palavras, de sílabas, de fonemas,
Estadual Paulista – UNESP de rima e aliteração durante quatro meses.
Marília-São Paulo Resultados: Houve diferença estatisticamente
http://lattes.cnpq.br/9057316530389548

Ana Cláudia Figueiredo Frizzo amplitudes dos componentes P1, N1, P2 e N2


Departamento de Fonoaudiologia. Universidade após a intervenção fonoaudiológica. Conclusão:
Estadual Paulista – UNESP A intervenção fonoaudiológica utilizada no estudo
Marília-São Paulo provocou diminuição nas latências e amplitudes
http://lattes.cnpq.br/2939620990280199

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 12 139


na avaliação pré e pós-intervenção.
PALAVRAS-CHAVE:
Longa Latência.

LONG LATENCY AUDITORY EVOKED POTENTIAL: MONITORING THE


EFFECTIVENESS OF SPEECH THERAPY INTERVENTION IN STUDENTS WITH
DYSLEXIA
ABSTRACT: Introduction: Dyslexia is a disorder that affects the aspect of learning, especially

the clinical research of aspects that include the processing of linguistic information. LLAEP
provides an electrophysiological response relevant to audiological assessment, as it delivers
objective and quantitative data regarding the functionality of central auditory structures
useful in monitoring the effectiveness of therapeutic intervention. Objective: to compare the
electrophysiological measurements before and after speech therapy intervention in students
Method

frequent and infrequent stimuli presented randomly, in an oddball paradigm. Procedure


performed before and after speech therapy intervention. In the intervention, training in

Results:
difference for decreased latencies and amplitudes of components P1, N1, P2 and N2 after
the speech therapy intervention. Conclusion: The speech therapy intervention used in the

instrument in the pre- and post-intervention assessment.


KEYWORDS:
Potential.

INTRODUÇÃO
O reconhecimento auditivo de estímulos sonoros está diretamente ligado aos
processos de percepção e cognição do indivíduo. A percepção e o processamento dos
sons exercem papel preditor na aquisição na leitura e da escrita. Para que estes processos

(ASHA, 2005).
Entre os distúrbios que afetam o aspecto da aprendizagem tem-se a dislexia, onde
são afetados diferentes aspectos, principalmente, a leitura e a escrita e também, outro
aspecto de suma importância, a discriminação dos sons.
Indivíduos com

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 12 140


memória e percepção auditiva, aspectos diretamente ligados ao processamento auditivo
(DALLY, 2006; KUJALA et al., 2006; OLIVARES-GARCÍA., COLS., 2005).
Dentre os distúrbios de aprendizagem encontram-se os transtornos do
neurodesenvolvimento, que segundo a DSM-V são caracterizados por alterações que se
exteriorizam na época do desenvolvimento, ou seja, antes da fase escolar, onde apresentam

A dislexia está entre estes transtornos, e é considerado um transtorno de


aprendizagem, onde o desempenho escolar está abaixo do esperado para a idade

que por sua vez é responsável pelo acionamento das estruturas sonoras das palavras

temporal (ALVARENGA et al, 2013).


Estudos recentes como CARDOSO, CAPELLINI (2009); CAPELLINI et al,

favorecer o desenvolvimento da leitura de crianças diagnosticadas com dislexia. Desta

desenvolvimento da habilidade de leitura, deste modo auxiliando a criança na associação


do som com a escrita (ALVARENGA et al, 2013).
Um dos métodos mais utilizados para estudar o sistema auditivo e seu funcionamento,
incluindo o aspecto do processamento de informações linguísticas é o Potencial Evocado
Auditivo de Longa Latência (PEALL). O PEALL faz o registro de atividades elétricas corticais
que ocorrem frente a estímulos acústicos durante esse processamento. Esses potenciais
estão diretamente ligados às funções corticais superiores como atenção do cérebro ao som,
discriminação auditiva, memória imediata e tomadas de decisão e raciocínio intrínsecos à
cognição. Esse tipo de potencial cortical depende da ativação de áreas neurais distintas,
tálamo e córtex (KRAUS; McGEE, 1999; HALL, 2006).
O Potencial Evocado Auditivo de Longa Latência (PEALL)
ocorre no sistema auditivo periférico e central (regiões do tálamo e córtex
auditivo), decorrente de um estímulo elétrico. Ele tem por objetivo ponderar as mudanças

auditiva. O PEALL apresenta um seguimento de onda positiva-negativa-positiva (P1, N1,


P2, N2 e P3) superior e inferior de modo respectivo (REIS; FRIZZO; 2012). Ele é indicado
para pacientes com alterações no processamento auditivo, distúrbios de aprendizagem,

das intervenções.
Desta forma o PEALL, de acordo com SOARES et al, (2011) é um importante

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 12 141


instrumento de avaliação do sujeito com dislexia, onde ele auxilia no encaminhamento
terapêutico, e ainda disponibiliza um maior detalhamento das alterações neurológicas
existentes.
A avaliação pré e pós-intervenção utilizando
importância, pois foi constatado na literatura progresso após a intervenção fonoaudiológica
nas crianças com dislexia (Kátia Alvarenga et al, 2013).
Apesar do grande número de estudos na literatura de âmbito nacional e internacional,
correlacionando processamento auditivo e dislexia, há poucos estudos no que se refere ao
monitoramento terapêutico empregando os PEALL, o que demonstra a importância deste

OBJETIVO
Comparar as intervenção fonoaudiológica em
indivíduos com dislexia.

MÉTODO
O presente estudo foi aprovado em 08/10/2015 pelo Comitê de Ética da Faculdade

49583615.4.0000.5406. Todos os responsáveis pelos sujeitos assinaram o Termo de


Consentimento Livre e Esclarecido antes do início das avaliações, e todos os sujeitos que
participaram da pesquisa assinaram termo de assentimento livre e esclarecido.
Participaram deste estudo, 15 escolares com diagnóstico de dislexia de ambos
os gêneros com idade inicial de 7 anos e 11 meses. Todas passaram pelo processo de
avaliação e intervenção pela equipe interdisciplinar do Centro de Estudos da Educação e
Saúde – CEES/UNESP – Marília.
Os responsáveis dos escolares foram inicialmente submetidos a uma anamnese
para a coleta de dados relativos a queixas auditivas, presença de fatores de risco para

as condições para realização da avaliação audiológica.


Estes escolares estavam regularmente matriculados em escola regular do município
de Marília-SP e de Botucatu – SP e foram submetidos à avaliação fonoaudiológica e à
avaliação interdisciplinar (neurologista, neuropsicológica, psicopedagoga) e tiveram seu
diagnóstico determinado em função de suas habilidades de leitura no Centro de Estudos
da Educação e Saúde – CEES/FFC/UNESP-Marília-SP no Laboratório de Investigação
dos Desvios da Aprendizagem – LIDA/FFC/UNESP e no Ambulatório de Neurologia Infantil
– Desvios da Aprendizagem do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina – FM/

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 12 142


UNESP – Botucatu – SP.
Para a realização do PEALL os sujeitos foram acomodados em sala acusticamente
tratada e temperatura controlada em 24ºC, posicionados em uma poltrona reclinável e

O equipamento utilizado foi o Biologic Navigator Pro e registrado mediante a utilização de


cinco eletrodos descartáveis posicionados em Fz e Cz em referência ao lóbulo direito (A2)
e esquerdo (A1), utilizando-se os 2 canais de registro do equipamento, o eletrodo terra foi

O P300 foi pesquisado em duas varreduras, o estímulo acústico tone burst a


70dB NA, diferindo quanto à frequência (1000Hz- estimulo frequente e 2000Hz- estímulo
raro), e diferindo quanto à duração (1000Hz -estímulo frequente e 1000Hz -estímulo raro)
apresentados aleatoriamente, num paradigma oddball, numa velocidade de 1.1 estímulos
por segundo, com uma probabilidade de ocorrência do estímulo raro de 20% do total de
200 estímulos e de platô 60.00 (ms) no raro e no frequente o platô de 30.00 (ms), com

Hz e sensibilidade de 50.000 uV e polaridade alternada. A apresentação dos estímulos

resultados.

(JUNQUEIRA; COLAFÊMINA, 2002, adaptado), que inclui a visualização de picos de ondas


com polaridades alternadas (negativa-positiva), considerando a replicação dos traçados.
Na pesquisa do PEALL, foram analisadas as latências e amplitudes das ondas P1, N1, P2,
N2 e P3 (POLICH; JOHN, 2007).
A intervenção fonoaudiológica foi realizada num período de quatro meses, em
sessões de 50 minutos, duas vezes por semana e foram utilizados os seguintes programas:
Programa de Remediação Fonológica Associado ao Treino de Leitura, Manipulação Silábica,

e Técnica da Janela de acordo com o protocolo de estimulação do pré-determinados pelo


Laboratório de Investigação dos Desvios da Aprendizagem – LIDA/FFC/UNESP.
O Potencial Evocado Auditivo de Longa Latência (P300) foi realizado antes do início
da intervenção fonoaudiológica e após o término das sessões.
Para a análise estatística foi realizado a média, desvio padrão e Test T de medidas
repetidas para a comparação dos valores de latência e amplitude pré e pós-intervenção.

(versão 24.0).

RESULTADOS
Foram avaliados 15 escolares com diagnóstico de dislexia, com idades entre sete

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 12 143


e 10 anos.
A Tabela 1 apresenta a distribuição da média e desvio padrão dos valores de latência
do complexo de ondas P1-N1-P2-N2-P3 aferidos à direita e esquerda quanto a estímulo
de frequência e duração dos escolares com dislexia avaliados antes e após a intervenção
fonoaudiológica.

Latência
Pré Pós
Complexos Média DP Média DP P
OD P1 133,86 23,61 111,35 24,62 0,04*

Frequência OD N1 166,86 20,66 140,01 24,81 0,02*


OD P2 237,75 1,52 222,95 42,17 0,24
OD N2 265,12 1,42 250,96 48,91 0,24
OD P3 350,91 30,12 341,31 38,89 0,28
OE P1 123,97 2,89 100,43 26,03 0,03*
OE N1 156,24 1,42 132,39 29,30 0,02*
OE P2 267,01 36,85 227,66 65,28 0,06*
OE N2 291,13 53,05 260,85 53,44 0,07*
OE P3 350,70 1,52 337,78 38,85 0,21
OD P1 133,70 24,40 127,66 26,77 0,30
OD N1 175,65 21,56 162,12 25,08 0,10
OD P2 251,44 33,97 241,86 52,47 0,31
Duração
OD N2 277,05 34,55 276,86 49,29 0,49
OD P3 355,87 36,44 347,00 35,98 0,29
OE P1 114,86 28,52 125,06 35,26 0,23
OE N1 148,07 27,09 155,06 38,93 0,32
OE P2 224,16 41,39 218,12 64,80 0,40
OE N2 263,26 32,49 258,72 56,75 0,41
OE P3 359,81 29,75 330,13 41,76 0,04

Tabela 1. Valores médios de latência pré e pós-intervenção para os estímulos acústicos de frequência
e duração.

Foi possível observar diminuição da latência com diferença estatisticamente

P2-N2 orelha esquerda com estímulo de frequência. Já para o estímulo de duração não

A Tabela 2 apresenta a distribuição da média e desvio padrão dos valores de


amplitude do complexo de ondas P1-N1-P2-N2-P3 aferidos à direita e esquerda quanto
a estímulo de frequência e duração dos escolares com dislexia avaliados antes e após a

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 12 144


intervenção fonoaudiológica.

Amplitude
Pré Pós P
Complexos Média DP Média DP
OD P1 1,49 1,61 1,45 1,00 0,47

Frequência OD N1 3,16 2,94 3,42 1,52 0,40


OD P2 1,53 1,41 0,97 0,49 0,12
OD N2 2,81 2,82 2,52 1,50 0,38
OD P3 5,01 1,53 4,80 3,36 0,42
OE P1 1,33 1,01 1,50 0,94 0,35
OE N1 4,09 3,08 2,14 1,32 0,04*
OE P2 1,52 1,29 2,58 2,18 0,10
OE N2 2,03 1,43 2,90 1,99 0,13
OE P3 5,05 2,55 5,30 2,45 0,41
OD P1 1,80 0,98 1,43 1,77 0,28
OD N1 2,45 1,04 2,10 1,35 0,26
OD P2 2,76 1,58 1,33 1,30 0,02*
Duração
OD N2 2,57 1,45 2,40 1,95 0,41
OD P3 3,54 2,43 2,63 1,91 0,18
OE P1 1,41 1,25 1,76 0,90 0,24
OE N1 3,14 2,32 2,61 1,81 0,29
OE P2 1,68 1,43 1,5 1,09 0,37
OE N2 3,18 2,74 2,02 1,24 0,11
OE P3 4,41 1,74 3,98 1,61 0,33

Tabela 2. Valores médios de amplitude pré e pós-intervenção para os estímulos acústicos de frequência
e duração.

N1 da orelha esquerda para o estímulo de frequência e para os componentes P2 da orelha


direita para o estímulo de duração.

DISCUSSÃO

que exige à discriminação auditiva consciente do estímulo raro ou infrequente na presença


do estímulo frequente e demanda funções cognitivas auditivas (DUARTE et al, 2009;
REIS & FRIZZO, 2013). A presença do complexo de ondas P1-N1-P2 está relacionada
ao processamento dos aspectos físicos do estímulo e diretamente dependente de

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 12 145


suas características. Já o P3 caracteriza-se por denotar aspectos da função cognitiva,
principalmente por pesquisar o nível de atenção empregado para a discriminação auditiva
e a discriminação propriamente dita (GUÇÃO, 2014).
Em crianças os valores do complexo N1- P1- N2 variam entre 60 a 300 ms pós-
estímulo, e o P3 deve estar entre 240 e 400 ms pós-estímulo (JUNQUEIRA & COLAFÊMINA,
2002). Neste estudo, na avaliação pré-intervenção foi observada latência alongada e a
amplitude diminuída das componentes de onda P1-N1-P2. Estudos comparativos realizados
em crianças com transtorno de aprendizagem e dislexia mostraram que os complexos

ROMERO et al, 2013; SOARES et al 2011).


A
que apresenta alterações no lobo temporal. Tais alterações têm sido descritas na literatura

alterações podem interferir e alterar o papel central do lobo temporal no processamento

deste estudo.
De acordo com os resultados obtidos após a intervenção foi possível observar
também a diminuição tanto das amplitudes como das latências do complexo de ondas

al, 2013). Além disso, a diminuição da latência dos componentes de onda das mesmas
medidas mostra que o trabalho com as habilidades fonológicas induziu às mudanças no
sistema nervoso auditivo central, mudanças estas monitoradas pelas medidas destes
potenciais (ALVARENGA et al, 2013).
Assim, O PEALL é um instrumento mostrou-se um instrumento diagnóstico
válido para avaliação da evolução dos escolares e fornece informações que auxiliam no
direcionamento do processo de intervenção de crianças com Dislexia.

CONCLUSÃO
A intervenção fonoaudiológica utilizada no estudo provocou diminuição nas latências
e amplitudes do PEALL, que mostrou ser um apropriado instrumento de avaliação pré e

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 12 148


CAPÍTULO 13
COMPARAÇÃO DE MÉTODOS DE EXTRAÇÃO DE
LIPÍDIOS DA MICROALGA Scenedesmus sp.

Data de aceite: 10/01/2022 que podem ser sintetizadas através desses


Data de submissão:08/10/2021 microrganismos e a imensa biodiversidade,
que pode ser aprimorada geneticamente. As
principais aplicações estão ligadas à produção
de alimentos funcionais, produtos naturais com
Alana Ramos Nobre
grande potencial nutricional e farmacêutico,
Universidade Federal de Sergipe,
bem como na produção de biocombustíveis,
Departamento de Engenharia Química
São Cristóvão – SE como o biodiesel, por meio dos lipídios contidos
ID LATTES: 1414255929882930 na biomassa. Desta forma, o presente estudo

Karollyna Menezes Silva no processo de lise celular e extração, etapas


Universidade Federal de Sergipe, ligadas à recuperação do lipídio, através da
Departamento de Engenharia Química microalga pertencente à espécie Clorophyta, a
São Cristóvão – SE Scenedesmus sp., comparando dois métodos
ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7824-3377
de extração (Bligh & Dyer com ultrassom e
Keilla Santos Cerqueira Soxhlet), dois sistemas de solventes (CEA –
Universidade Federal de Sergipe, Clorofórmio/etanol/agua e CMA – Clorofórmio/
Departamento de Engenharia Química metanol/água) e dois tipos de pré-tratamentos
São Cristóvão – SE (ultrassom e autoclave) para realizar a quebra da
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-1308-0754 célula. Foi observado que para ambos os sistemas
de solvente, o pré-tratamento com autoclave
Jacqueline Rego da Silva Rodrigues
Universidade Federal de Sergipe,
quase todo o lipídio contido na biomassa, com
Departamento de Engenharia Química
São Cristóvão – SE porcentagens médias de 19,24% para o metanol
ORCID: https://orcid.org/0000-0003-4033-5254 e 19,27% para o etanol, frente às porcentagens
de 10,78% e 17,31% respectivamente, com o
Roberto Rodrigues de Saouza uso da ultrassom. O método de Bligh & Dyer
Universidade Federal de Sergipe, com ultrassom teve melhor desempenho com
Departamento de Engenharia Química um menor tempo de operação, além de ser uma
São Cristóvão – SE extração a frio, que não desencadeia processos
ORCID: https://orcid.org/0000-0001-8919-2675
oxidativos nos lipídios. Quanto ao sistema de
solvente, o melhor resultado médio foi obtido
com o etanol, cuja a porcentagem total média
RESUMO: As microalgas têm sido o foco de foi correspondente a 18,29%, frente a 15,36%,
muitas pesquisas biotecnológicas devido à sua porcentagem média total do metanol.
rica composição, à quantidade de substâncias PALAVRAS-CHAVE: Microalga; extração; lipídio.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 149


COMPARISON OF LIPID EXTRACTION METHODS FROM MICROALGA
Scenedesmus sp.
ABSTRACT: Microalgae have been the focus of much biotechnology research because
of their rich composition, the amount of substances that can be synthesized through these
microorganisms, and the immense biodiversity that can be genetically improved. The main

biodiesel,

microalga belonging to the species Clorophyta,


Scenedesmus

average percentages of 19.24% for methanol and 19.27% for the ethanol, compared to the

corresponded to 18.29%, compared to 15.36%, mean total percentage of methanol.


KEYWORDS: Microalga; extraction; lipid.

1 | INTRODUÇÃO
As algas compreendem um grupo variado de organismos fotossintéticos divididos
em duas categorias principais com base no tamanho e morfologia das células: microalgas
e macroalgas . As macroalgas, como as algas, são feitas de células que formam estruturas
semelhantes a raízes, caules e folhas, já as microalgas, em vez disso, são organismos
unicelulares e microscópicos (Patel et al., 2019).
Indiretamente as microalgas auxiliam a manter os níveis de oxigênio adequados à vida
dos seres vivos na atmosfera. Conforme escrito por Ramirez (2013), esses microrganismos
CO2 presente na atmosfera com
apenas 1 quilograma de biomassa seca. O que demonstra o grau de relevância desses
microrganismos na sobrevivência do ser humano e do meio ambiente.
As microalgas apresentam grande potencial biotecnológico para a obtenção de
produtos de alto valor agregado às indústrias alimentícia, cosmética e farmacêutica, como
ingredientes alimentícios, rações e aquicultura, antioxidantes e substâncias bioativas,

produção de biodiesel, entre outros (Rodríguez-Torres et al., 2021).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 150


1.1 Microalga Scenedesmus sp.
A Scenedesmus sp. é uma espécie aquática pertencente ao grupo das algas verdes
(Chlorophyta), da família Scenedesmaceae. São algas de superfície que predominam em

ou com alto teor de minerais, essa espécie pode conferir à água o odor e sabor de capim
(Ramirez, 2013).

Figura 1 - Scenedesmus sp, imagens digitais obtidas em microscópio óptico (aumento: 400x). A.
Colônias com células fusiformes. B. Colônias com células ovaladas.
Fonte: Sousa (2007).

De acordo com Andrade (2014) a Scenedesmus sp possui um teor de lipídios entre


19,6% e 21,1% em peso de biomassa seca.Pereira et al.
ácidos graxo podem chegar até 65% e segundo Ramirez (2013), a espécie Scenedesmus
sp. possui até 56% de proteínas e 52% de carboidratos.

1.2 Composição química das microalgas


A composição química das microalgas varia a depender da sua espécie e das
condições de cultivo para cada espécie; além de outros fatores. Basicamente quatro
componentes estão presentes majoritariamente na biomassa microalgal, sendo estes as
proteínas, os lipídios, os pigmentos e os carboidratos (Andrade et al., 2014).
Vários são os fatores que contribuem para a variação nas composições da parede
celular, como a fase de crescimento, as condições de cultivo e a presença de fatores

rompimento e na liberação de biomoléculas intracelulares. No entanto, as paredes das


células microalgais são complexas, por isso, precisam de uma melhor investigação (Phong
et al., 2018).
As proteínas, compostos orgânicos de alto peso molecular, representam cerca de 50
a 80% da composição em peso da biomassa seca de microrganismos em geral e, de acordo
com Andrade et al. (2014), estudos com diversas espécies de microalgas demonstram um

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 151


O teor de lipídios em termo de biomassa seca pode variar de uma espécie para outra,
atingindo valores de 5 a 77% e níveis lipídicos entre 20 e 50% são fáceis de se obter
controlando a quantidade de nutrientes fornecidos (Zorn et al., 2017).

orgânicas e podem assumir cores variadas, como tons de amarelo, vermelho, marrom e
laranja. Usualmente cerca de 0,1 a 2,0% da biomassa das microalgas seca é composta de
carotenoides, sendo sua estrutura formada por 40 carbonos (Andrade et al., 2014).
Os carboidratos das microalgas são constituintes da parede celular e reserva de
polissacarídeo. Conforme mencionado por Andrade et al. (2014), aproximadamente 5 a
20% da composição na microalga seca é composta por carboidratos totais. De acordo com
Ramirez (2013) espécies Scenedesmus, Chlamydomonas, Chlorella, Dunaliella e Spirulina
possuem as maiores porcentagens de carboidratos, especialmente amido.

1.3 Fatores e condições fundamentais para o crescimento das Microalgas


Para um bom cultivo e produtividade da microalga é necessário entender a
composição das células e otimizar os processos através do controle das condições a
quais a microalga é exposta. Dessa forma, a limitação de nutrientes, luminosidade, pH,
temperatura, composição de nitrogênio, concentração de cloreto de sódio, por exemplo,
são fatores diretos para o crescimento da et al., 2020).

importantes ao seu desempenho celular e atividades metabólicas.


O carbono é o macronutriente mais importante no cultivo das microalgas, visto que
a sua contribuição para a biomassa é estimada em 50%, distribuído entre as proteínas,
vitaminas, carboidratos e lipídios (Andrade, 2014). Além do carbono, os principais
macronutrientes são o nitrogênio, fósforo e ferro. Meios de cultura pobres em nitrogênio
conduzem a microalga a usar o carbono disponível no cultivo para a produção de carboidratos
e lipídios, ou, em algumas espécies, favorece a produção de pigmentos ao invés da
produção de proteinas (Andrade, 2014). A Tabela 1 ilustra quais são os macronutrientes, a
forma usual na natureza e a forma química em meio de cultura.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 152


Tabela 1 - Macronutrientes e suas respectivas fontes na natureza
Fonte: Andrade (2014).

1.3.1 Intensidade Luminosa e Tempo de Iluminação

Intensidades luminosas baixas estimulam a formação de uma biomassa rica em

espectral da radiação absorvida pelas algas fotossintetizantes é de 400 nm a 700 nm e

(tempo de iluminação) e em cultivos de laboratório usualmente aplica-se 12 horas de luz,


et al., 2014).

1.3.2 Temperatura

A temperatura também é um fator crítico para o cultivo de microalgas. A temperatura

fotossíntese e a taxa de crescimento (Daneshvar et al., 2021). Conforme Andrade et al.


(2014), a temperatura de cultura das microalgas afeta a taxa metabólica e a sua composição
também pode variar de acordo com cada espécie e o seu valor ótimo para o cultivo depende
do local onde a espécie foi coletada. Dessa forma, como exemplo, microalgas provenientes
de ambientes temperados possuem temperatura ótima de cultivo na faixa de 10°C a 25°C,
já as oriundas de ambientes polares a temperatura ideal de cultivo é abaixo de 10°C.

1.3.3 pH

O potencial de hidrogênio (pH) é de grande importância no cultivo de microalgas,


pois é possível determinar a solubilidade dos minerais e do dióxido de carbono no meio,
et al., 2020).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 153


1.3.4 Agitação

A agitação é um fator importante pois, segundo Andrade (2014), ela evita a


sedimentação das microalgas, proporcionando desta forma uma exposição das células à
luz de forma mais homogênea. Além disso, a agitação mantém os nutrientes em suspensão,
aumentando a sua disponibilidade no meio. Baseado em estudos de Silva Cardoso, Vieira

em fotobiorreatores fechados, lagoas ou tanques abertos aerados.


Sistemas fechados é um método de cultivo por foto biorreactores (PBRS). A
principal vantagem dos PBRs é o controle do crescimento das algas, o que leva a uma
alta produtividade da biomassa algal . Além disso, por meio da otimização e controle das
condições do ambiente de cultivo, a contaminação com outras espécies de algas pode ser
et al. (2013), boa
parte do cultivo de microalgas em larga escala tem sido realizado em cultivo aberto, em
lagoas ou tanques que utilizam a luz solar e o CO2 atmosférico.

1.4 Aplicação de microalgas na indústria


As microalgas fornecem inúmeras vantagens para a produção de biocombustíveis:
alto crescimento e produtividade, potencial para altos teores de lipídios ou carboidratos,
capacidade de crescer em águas residuais, salinas ou água do mar. (Branco-Vieira et
al., 2020). Devido ao aumento do custo do petróleo, passou-se a investir em processos
termoquímicos e bioquímicos para converter a biomassa microalgal em biocombustíveis
(Almeida Lopes et al., 2015). Outro fator motivador é o teor de lipídios contidos na biomassa,
que pode variar de 1 a 77% da massa seca (Zorn et al., 2017).

microrganismos, visando a obtenção de bioprodutos, corresponde a uma porcentagem de


40% a 60% do custo total de produção. Desta forma, utilizam-se meios de cultura alternativos
como esgotos domésticos, desejos industriais, lodo digerido e vinhaça de cana-de-açúcar.
Dentre os produtos e processamentos mais importantes a serem realizados através
de microalgas estão: a produção de ácidos graxos (aplicado à produção de biodiesel),
tratamento de águas residuárias, produção de suplementos alimentares e biofertilizantes.
Pesquisas mais recentes começaram a ser desenvolvidas para direcionar o cultivo de
microalgas para a obtenção de combustíveis de aeronaves, como exemplo, a produção de
hidrogênio. Tal utilização é aplicada à grandes escalas de produção (Ramirez, 2013).

1.5 Processos para extração de lipídeos nas microalgas


Após o cultivo das microalgas é necessário realizar pré-etapas de separação sólido-
líquido dos cultivos. Essa etapa é conhecida como colheita de biomassa e serve para
concentrar e recuperar a biomassa a ser processada. Usualmente a etapa de colheita pode

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 154


uma menor quantidade de água na biomassa (Andrade et al., 2014).
De acordo com Pereira et al. (2012), o processo de extração requer várias etapas

pressão e aquecimento funciona como um solvente. Zorn et al. (2017) realizaram estudos
acerca do método de extração por solvente proposto por Bligh e Dyer (1959), o qual utiliza
uma constante mistura de clorofórmio, metanol e água. Nesse estudo realizou-se uma

umidade da biomassa, a proporção de solventes, o volume total de solventes e o tempo de


ultrassom utilizado.
Outro método muito estudado é de Soxhlet, no qual há uma constante renovação
do solvente em contato com a matriz graxa e suas principais vantagens consistem na
alta temperatura que o sistema pode atingir por conta da evaporação e não necessita

reações de peroxidação e hidrólise dos lipídios (Brum e Arruda, 2009).

solvente possui a desvantagem de extrair outros compostos da biomassa, especialmente


alguns pigmentos. Através desse estudo pôde-se concluir que a porcentagem de lipídios
extraídos é maior utilizando misturas de solventes, o tempo ideal de extração é 3 horas e
o sistema clorofórmio e etanol (1:1) apresentou melhores resultados e uma remoção de

Desta maneira, o estudo a seguir tem como objetivo estabelecer a melhor técnica de
extração de lipídios utilizando a biomassa da espécie Scenedesmus sp. fazendo o pré-
tratamento da biomassa seca utilizando os métodos de ultrassom e autoclave; comparando
dois sistemas de solvente através do método de extração Bligh e Dyer (1959) adaptado e

Bligh e Dyer (1959) utilizando o melhor sistema de solvente.

2 | MATERIAIS E MÉTODOS
Os métodos estudados nesse trabalho foram: o método proposto por Bligh e Dyer
(1959), que originalmente emprega a homogeneização da biomassa com os solventes de

de uma mistura de dois solventes para a extração no soxhlet. O sistema de solventes

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 155


escolhidos tem como fundamento os estudos de Bligh e Dyer (1959), que utiliza metanol e

melhores resultados com o clorofórmio e etanol. A homogeneização proposta pelo primeiro


método foi otimizada por (Zorn et al., 2017), através do emprego do ultrassom e essa
adaptação foi inserida nos experimentos a seguir. A biomassa utilizada foi centrifugada,
colocada em vidros relógio e seca em estufa conforme a Figura 2. Em seguida, a biomassa
seca foi macerada e armazenada no freezer.

Figura 2 - Biomassa seca da microalga Scenedesmus sp. em vidro relógio.

2.1 Pré-Tratamento
Para promover a quebra da estrutura da célula, conhecida como lise celular, dois
tipos de pré-tratamento foram utilizados: ultrassom - a amostra devidamente hidratada foi
colocada no banho à temperatura ambiente com ultrassom durante 30 minutos, baseado na
metodologia utilizada por Zorn et al. (2017); autoclave - o erlenmeyer contendo a amostra
hidratada foi colocado na autoclave sobre pressão de 1 atm e temperatura de 121°C

foram realizados em duplicata, desta forma, a Tabela 2 demonstra o planejamento de


experimentos.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 156


Ensaio nº Sistema de solvente Volume total Pré-tratamento

1
30 min ultrassom
2
CMA-
3 clorofórmio/metanol/água
15 min autoclave
4
20 mL
5
30 min ultrassom
6
CEA-
7 clorofórmio/etanol/água
15 min autoclave
8
9 CEA-
100 mL 15 min autoclave
10 clorofórmio/etanol/água

Tabela 2- Planejamento de experimentos.

2.2 Processo de Extração

2.2.1 Bligh & Dyer Adaptado.

Foram acrescidos à amostra hidratada, o clorofórmio e o metanol (ou etanol) nas


proporções e volumes totais pré-estabelecidas, com a ressalva de que apenas metade
do clorofórmio foi adicionada. Após a primeira adição de solventes agitou-se o sistema
manualmente por 2 minutos e em seguida colocou-se sob agitação em banho de ultrassom
à temperatura ambiente por 25 minutos. O Erlenmeyer foi retirado do ultrassom e repetiu-se
o procedimento I, adicionando somente a outra metade do clorofórmio ao sistema. Retirou-
se a mistura do banho e a água destilada foi adicionada conforme a quantidade estipulada
pelo experimento. Em seguida, agitou-se manualmente o sistema durante 2 minutos e com

funil o sistema foi colocado em repouso até que houvesse a completa separação de fases
(Figura 2).
Após separação, a fase inferior do funil foi removida e pesada em uma balança
devidamente tarada. A fase inferior, correspondente ao solvente, foi evaporada em estufa
a uma temperatura de 55 - 60°C durante 24 h. O conteúdo restante do recipiente foi
dessecado durante 15 minutos em um dessecador a vácuo e resfriado até a temperatura
ambiente. Após a etapa do dessecador o conteúdo foi pesado novamente.

2.2.2 Soxhlet

O procedimento de controle de quantidade e hidratação da amostra para o método

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 157


Soxhet foi o mesmo do método Bligh & Dyer adaptado. Após essa etapa adicionou-se ao
balão de 100 mL o sistema de solvente na proporção 2:2:1 previamente estabelecida. A
mistura de solventes foi colocado no sistema Soxhlet e o tempo de extração correspondeu

foi resfriado e colocado em repouso até que houvesse a completa separação de fases
(Figura 3). Após separação, a fase inferior do funil foi removida e pesada em uma balança
devidamente tarada. O conteúdo removido passou por evaporação, dessecamento,
resfriamento e pesagem de forma análoga ao método Bligh e Dyer (1959) adaptado.

Figura 3 - Funil de separação contendo o sistema de solventes em duas fases.

2.2.3 Cálculo da porcentagem de lipídios

Para calcular a porcentagem de lipidios em 1g de biomassa seca utiliza-se a seguinte


equação:

Sendo m2 a massa do frasco contendo os lipídios e m1 a massa do frasco vazio.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 158


3 | RESULTADOS E DISCUSSÃO
O procedimento experimental foi realizado em duplicata e as biomassas utilizadas
nos experimentos foram de um mesmo cultivo. Os dados da primeira etapa, correspondente
à extração baseada no método Bligh e Dyer (1959) com o uso do ultrassom, estão
apresentados na Tabela 3.

Lise celular Pré- % de lipídio na Média


nº Sistema de solvente
tratamento microalga (duplicata)
1 10,89
Ultrassom (30 min) 10,78±0,16
2 CMA* 10,66
3 (2:2:1) 19,73
Autoclave (15 min) 19,94±0,30
4 20,15
5 16,73
Ultrassom (30 min) 17,31±0,82
6 CEA* 17,89
7 (2:2:1) 18,86
Autoclave (15 min) 19,27±0,59
8 19,69
CMA*- Clorofórmio/Metanol/Água CEA* - Clorofórmio/Etanol/Água
Tabela 3 - Dados experimentais da etapa de extração baseada no método Bligh e Dyer (1959) com uso
do ultrassom.

Considerando os dados obtidos por Andrade (2014), acerca da porcentagem total


de lipídio da Scenedesmus sp. correspondente a uma faixa de 19,6% a 21,1% em peso de

destacando os experimentos 3,4,7 e 8 por uma retirada satisfatória e quase total da massa
de lipídio contido na microalga utilizada.
Fazendo-se a média e o desvio padrão das amostras 3, 4, 7 e 8, correspondentes às
amostras com o pré-tratamento em autoclave, tem-se o valor de 19,61±0,47, o que permite

estatisticamente iguais e o valor obtido pode ser considerado a porcentagem máxima da


biomassa usada no presente experimento.
Nota-se que para ambos os sistemas de solvente os melhores resultados deram-
se com a lise celular realizada com a autoclave. Esse resultado contraria os resultados
obtidos por Lee et al. (2010) em que as porcentagens de lipídios obtidas foram de
aproximadamente 5%, em biomassa seca, com a autoclave e dentre os dois tipos de pré-
tratamento comparados no presente experimento, constata o ultrassom como o melhor

encontra-se no tempo de autoclave utilizado, visto que a metodologia por Lee et al. (2010)
utiliza apenas 5 minutos e nesse experimento adotou-se 15 minutos.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 159


Conforme Lee et al. (2010), o efeito do ultrassom no pré-tratamento causa o
rompimento da membrana celular devido a um efeito de cavitação, que perturba as células
microbianas rompendo-as. No caso da autoclave, a alta pressão promovida por um maior
espaço de tempo garante uma desestabilização da membrana citoplasmática da célula,
permitindo a liberação de mais lipídios para serem extraídos por solvente. Além disso, esse
método coagula proteínas, reduzindo a sua solubilização no sistema de solventes, o que

O clorofórmio é um solvente que, por apresentar caráter polar-apolar, é capaz


de extrair os lipídios apolares, conhecidos como triacilgliceróis associados pelas forças
de Wan Der Walls, como também os ácidos graxos que possuem polaridades variadas.
Quanto ao etanol e ao metanol, ambos são solventes polares, capazes de extrair os
fosfolipídios e glicolipídios através do enfraquecimento das ligações de hidrogênio e forças
eletrostáticas que atuam sobre esses lipídios polares, ambos aliam-se tanto à água quando
ao clorofórmio, sendo que o lipídio está predominantemente contido na fase formada por
clorofórmio/metanol ou clorofórmio/etanol, garantindo uma maior recuperação dos mesmos
(lipídios polares e apolares).
O melhor percentual de lipídio extraído da microalga Scenedesmus sp. foi obtido

utilizando o etanol deve-se à menor polaridade do etanol comparado à polaridade do


metanol, fato observado através da menor constante dielétrica do etanol. Os lipídios
costumam ser fracamente polares com constantes dielétricas na faixa de 2 a 4, portanto,
solventes menos polares rendem maiores taxas de solubilização dos lipídios (Galvão et al.,
2013).
A segunda etapa do experimento, correspondente à comparação do método Bligh

calculou-se a média geral das porcentagens obtidas para ambos os sistemas de solvente

método Soxhlet. Os valores estão dispostos na Tabela 4.

nº Sistema de % de lipídio na Porcentagem


solvente microalga média geral
1 10,89
2 CMA (2:2:1) 10,66 15,36±4,58
3 19,73
4 20,15
5 16,73
6 CEA (2:2:1) 17,89 18,29±1,10
7 18,86

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 160


8 19,69
Nota-se que, de uma forma geral a melhor média de resultados foi obtida com o sistema CEA
(clorofórmio,
Moodley e Bux (2014), ele realiza extrações com diversos solventes e constata melhores resultados
com o etanol.
Tabela 4 - Média geral para ambos os sistemas de solvente.

O etanol teve resultados superiores ao metanol, com a vantagem de remover uma

na extração de lipídios, além de, segundo Galvão et al. (2013), ter uma toxicidade menor
que o metanol, facilitando, portanto, a sua implementação industrial.
A combinação do clorofórmio e etanol em proporções iguais, assim como utilizado

remoção (Figura 7).


As melhores condições da primeira etapa do experimento foram reproduzidas
utilizando o método Soxhlet e os resultados obtidos estão disposta na Tabela 4.

nº Sistema de Pré- tratamento % de lipídio na Média


solvente microalga
9 CEA Autoclave (15 min) 15,04 15,71±0,67
10 16,38
Tabela 5 - Dados da extração de lípidios pelo método soxhlet.

do lipídio da
e Bux (2014), correspondente a 3 horas. Um melhor resultado pode ser obtido com um

longo tempo de operação, pois embora a extração a quente seja vantajosa, pode causar a
oxidação lipídica e resultar num alto custo com energia térmica.

4 | CONCLUSÃO
Os experimentos mostraram que, para ambos os sistemas de solvente utilizados, o
pré- tratamento com autoclave aumentou o rendimento da extração, sendo esse aumento

mais no sistema CEA, que já apresentava resultados próximos do percentual ótimo com o
pré- tratamento em ultrassom.
Os dados obtidos permitem constatar que o melhor método de extração quanto ao
rendimento, tempo de operação e custo com energia térmica foi o método Bligh & Dyer
adaptado com o uso de ultrassom. Tendo como desvantagem apenas a toxicidade dos

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 161


solventes envolvidos.
Conclui-se por meio dos dados experimentais e em conformidade com estudos
etanol para substituir o
metanol é vantajoso, visto que para o sistema CEA removeu-se em média 18,29±1,10% e

etanol deve-se à menor polaridade desse composto que se solubiliza mais facilmente em
lipídios. Além disso, o etanol é uma substância de baixa toxicidade, reduzindo os riscos e
gastos com segurança operacional no caso de aplicações industriais.

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 13 163


CAPÍTULO 14
EFFECT OF LACTIC ACID BACTERIA ON Fusarium
verticillioides GROWTH AND FUMONISIN B1
DETOXIFICATION

Data de aceite: 10/01/2022 Elisabete Yurie Sataque Ono


Data de submissão: 06/10/2021 State University of Londrina, Department of
Biochemistry and Biotechnology
Londrina – Paraná
http://lattes.cnpq.br/9080149399359784
Melissa Tiemi Hirozawa
State University of Londrina, Department of
Biochemistry and Biotechnology
Londrina – Paraná ABSTRACT: Fusarium verticillioides is a primary
http://lattes.cnpq.br/9371346593025432

Mario Augusto Ono


and animal health due to fumonisin production.
State University of Londrina, Department of
Pathological Sciences This study aimed to evaluate the effect of lactic
Londrina – Paraná acid bacteria (LAB) strains on F. verticillioides
http://lattes.cnpq.br/2409390685316192 1
(FB1
The
Sandra Garcia F. verticillioides strains.
State University of Londrina, Department of Lactobacillus plantarum BG112 and Lactobacillus
Food Science and Technology
reuteri antifungal
Londrina – Paraná
activity against F. verticillioides 97L strain. L reuteri
http://lattes.cnpq.br/6040080684084312
LR-92 cells caused morphological alterations
Jaqueline Gozzi Bordini such as pore formation. Moreover, cell-free
State University of Londrina, Department of
Biochemistry and Biotechnology in reducing conidial germination and mycelial
Londrina – Paraná
http://lattes.cnpq.br/5793406523469122 changes in conidia. The supernatant possibly had
Andressa Jacqueline de Oliveira
State University of Londrina, Department of
Biochemistry and Biotechnology FB1 removal ability, and the greatest reductions
Londrina – Paraná L. reuteri LR-92
http://lattes.cnpq.br/5816751074597566 (88.0%) and viable cells of L. fermentum ATCC
antifungal
Elisa Yoko Hirooka activity and in vitro FB1
State University of Londrina, Department of These bacteria are promising for developing
Food Science and Technology
Londrina – Paraná
fumonisin contamination, thus contributing to
http://lattes.cnpq.br/8703225783188622
improved food safety.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 164


KEYWORDS: Antifungal activity; Lactobacillus reuteri; Lactobacillus plantarum; Mycotoxin
adsorption.

EFEITO DE BACTÉRIAS LÁTICAS NO CRESCIMENTO DE Fusarium


verticillioides E NA DETOXIFICAÇÃO DE FUMONINA B1
RESUMO: Fusarium verticillioides é um patógeno primário de milho de importância mundial,
pois causa prejuízos econômicos e riscos à saúde de seres humanos e animais devido à
produção de fumonisinas. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de cepas de bactérias
lácticas (BAL) no crescimento de F. verticillioides 1
(FB1). A
atividade antifúngica de sete cepas de BAL foi avaliada contra cinco cepas de F. verticillioides.
Lactobacillus plantarum BG112 e Lactobacillus reuteri LR-92 apresentaram a maior atividade
antifúngica contra a cepa F. verticillioides 97L. A cepa L. reuteri LR-92 causou alterações
morfológicas, como a formação de poros. Além disso, o sobrenadante livre de células (SLC)

além de induzir alterações morfológicas nos conídios. O SLC possivelmente teve efeito
fungicida, uma vez que não houve desenvolvimento micelial. Além disso, todas as cepas
apresentaram capacidade de remoção de FB1, sendo que a maior redução da concentração
de FB1 foi apresentada por células não viáveis de L. reuteri LR-92 (88,0%) e células viáveis
de L. fermentum ATCC 9339 (78,0%). As cepas de BAL apresentaram atividade antifúngica
1
in vitro. Essas bactérias são promissoras para o
desenvolvimento de novas formulações de controle biológico para minimizar a contaminação
por fumonisinas, contribuindo para a melhoria da segurança de alimentos.
PALAVRAS-CHAVE: Atividade antifúngica; Lactobacillus reuteri; Lactobacillus plantarum;
adsorção de micotoxinas.

1 | INTRODUCTION
Corn (Zea mays

NACIONAL DE ABASTECIMENTO, 2020). Corn is the staple food in several countries and

by Fusarium verticillioides et
al., 2016; COUNCIL FOR AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY, 2003). Corn

FOR AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY, 2003).


Ingestion of fumonisin-contaminated grains is related to the increased incidence of
esophageal (KHAN; PHULUKDAREE; CHUTURGOON, 2018) and liver cancer (ARUMUGAM
et al., 2019) and neural tube defects in humans (MARASAS et al., 2004). In animals,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 165


equines (VENDRUSCOLO et al., 2016), pulmonary edema in pigs (PÓSA et al., 2016) and

(TESSARI et al., 2006). Among the fumonisins, fumonisin B1 (FB1) is the most prevalent
and most toxic analog (COPPOCK; DZIWENKA, 2014). FB1
2B, meaning that it is possibly carcinogenic to humans (INTERNATIONAL AGENCY FOR
RESEARCH ON CANCER, 2002).
F. verticillioides

of the negative effects on the environment (RATHORE; NOLLET, 2012) and human health
(WORLD HEALTH ORGANIZATION, 1990). Biological control methods are an attractive
alternative to chemical agents, as they do not cause adverse effects on soil and are not
harmful to human health.
Lactic acid bacteria (LAB) are promising biocontrol agents due to their antifungal
activity against some fungal species (KHARAZIAN et al., 2017; SIEDLER et al., 2019) and
their ability to detoxify mycotoxins (JUODEIKIENE et al.
2019).

bioactive metabolites, including organic acids (acetic, lactic, propionic, succinic, formic and
butyric acid), phenyllactic acid, fatty acids, and peptides (cyclic dipeptides and bacteriocins)
(BLACK et al., 2013; KWAK; LIU; KANG, 2018; LUZ et al., 2017; SIEDLER et al., 2019).
Another important feature of LAB is the ability to reduce mycotoxin levels. Some
in vitro FB1 mycotoxin
et al., 2009; PIZZOLITTO; SALVANO;

enzymes that degrade mycotoxins to less toxic intermediate compounds (HEINL et al.,
2010; TUPPIA et al., 2016).
Considering the potential of LAB for
studies relating LAB to antifungal activity against F. verticillioides and FB1
in vitro effect of LAB on F. verticillioides and
FB1

2 | MATERIAL AND METHODS

2.1 Microorganisms and culture conditions


antifungal activity screening and FB1 removal
experiments: Lactobacillus plantarum ATCC 14917, L. plantarum ATCC 94917, and L.
fermentum ATCC 9339 (American Type Culture Collection); L. paracasei and L. gasseri,
belonging to the Culture Collection of the Department of Food Science and Technology—

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 166


State University of Londrina; and L. reuteri Lyofast LR-92 (Sacco) and L. plantarum Lyofast

Rogosa–Sharpe (MRS) broth at 37 °C for 24 h and subcultured at least three times. The

(v/v) glycerol.
F. verticillioides
Mycological Culture Collection of the Department of Food Science and Technology, State

°C for 7 days and stored at 4 °C.


All of the F. verticillioides strains produced fumonisins (FB1 + FB2
-1 -1 -1 -1 -1
), 97L (3230 ), 103F ), 113F (724 ) and 103G (225 ).

2.2 Screening of antifungal activity

et al F. verticillioides
strains (105 conidia mL-1) and 20 mL of PDA.

adjusted to 3.0 x 109 CFU mL-1


plate (AMMOR et al.

2.3 Effect of pH, acetic acid and lactic acid concentration on antifungal activity
et al

mmol L-1
5
conidia mL-1 F. verticillioides. All

2.4 Determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) of lactic acid


and acetic acid for fungal growth

F. verticillioides strains according to the Clinical and Laboratory Standards Institute

6
conidia mL-1 F.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 167


verticillioides.

2.5 Effect of cell-free supernatant on F. verticillioides mycelial growth and


morphology
L. plantarum BG112 and L. reuteri
results in the screening of
involved in the antifungal effect of the F. verticillioides
g for 10 min,

F.
5 6 7 -1
verticillioides 97L conidial suspensions (10 , 10 and 10 conidia mL
free supernatants in a 1:1 ratio and incubated at 25 ºC and 180 rpm for 24 h for microscopic
analysis of conidial germination percentage and for seven days for biomass estimation

F. verticillioides 97L and L. plantarum BG112 or L. reuteri LR-92 cultures


(108 CFU mL-1

triplicate.

2.6 Conidial germination inhibition assay

(germinated and nongerminated) using a light microscope at 400X (CHEN et al., 1999).

% conidial germination inhibition = (cc - ct) X100


cc

Where:
cc: number of germinated conidia in the control sample
ct: number of germinated conidia in the treatment sample

2.7 Biomass estimation

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 168


X100

2.8 Scanning electron microscopy assay (SEM)


F. verticillioides coinoculated with L. plantarum BG112 or L. reuteri LR-92 cells and
F. verticillioides
glutaraldehyde solution in 0.1 mol L-1 sodium phosphate buffer (pH 7.2) for 90 min. After the
-1
sodium phosphate
buffer, subjected to dehydration in a graded ethanol series (20, 30, 50, 70, 80, 90% and
100%) and additionally dehydrated at the critical point, mounted on a metallic support

electron microscope, model FEI Quanta 200.

2.9 Fumonisin B1
FB1 et al. (2009),

that the mechanism involved in the removal of FB 1 is a physical adsorption (physisorption),


9

CFU mL-1 after centrifugation (5000 g

1
standard (Sigma, St. Louis, MO, USA) (2.5 mg
mL-1 -1

Falcon tubes containing 2 mL of FB1 solution (2.5 mg mL-1


as the samples. After incubation, FB1
high-performance liquid chromatography (HPLC).
The percentage of FB1

FB1 1
in the supernatant)

2.10 1
by HPLC

Accell Plus QMA, Waters).


Fumonisin B1 et al
Ueno et al

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 169


mmol L-1 sodium tetraborate and 50 mL of 2-mercaptoethanol).

3
OH: 0.1 mol L-1
NaH2PO4
-1 -1
at 25 °C. The detection limit for FB1 .
-1
The average recovery rate of FB1

2.11 Statistical Analysis


Differences in the mean FB1 removal (%) among different LAB strains and viable

OK, USA, 2007).

3 | RESULTS

3.1 Evaluation of antifungal activity


The

from 1 to 15 mm), moderate inhibition (diameters from 16 to 30 mm), medium inhibition


(diameters from 31 to 45 mm) and strong inhibition (diameters greater than 45 mm) (Table 1).

Microorganism Fusarium verticillioides strains


97L 97K 103F 113F 103G
Inhibition zone diameter (mm)*
L. plantarum ATCC 14917 6.0 5.0 5.7 6.0 -
L. plantarum ATCC 94917 5.0 5.7 5.3 6.0 -
L. fermentum ATCC 9339 3.8 4.0 3.3 4.0 -
L. paracasei 10.7 6.3 7.3 7.0 -
L. gasseri 11.3 5.7 5.7 5.3 -
L. reuteri LR-92 30.0 - - - 4.0
L. plantarum BG112 23.7 - - 7.7 6.3

* Inhibition zone diameter correspond to the means of triplicate analysis

16 to 30 mm), medium inhibition (diameters from 31 to 45 mm) and strong inhibition (diameters greater
than 45 mm)
Table 1. Antifungal activity of F. verticillioides strains (97L, 97K, 103F,
113F and 103G).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 170


antifungal activity

(moderate inhibition).

3.2 Effect of pH, acetic acid and lactic acid concentration on antifungal activity
The antifungal activity of LAB against F. verticillioides strains
evaluating the effect of pH, different concentrations of lactic and acetic acid (Table 2) on

strains.
F. verticillioides
acid and lactic acid.

Parameters Fusarium verticillioides strains


97L 97K 103F 113F 103G
Inhibition zone diameter (mm) *

Acetic Acid 10 26 18 15 20 15
Concentration (%) 20 39 23 38 24 25
30 55 26 28 31 34
40 55 38 40 41 37
50 55 47 49 43 37

Lactic Acid 10 10 5 7 4 5
Concentration (%) 20 13 6 5 7 5
30 15 9 5 8 8
40 17 9 10 10 12
50 17 11 13 12 13

pH of culture medium 1 6 0 3 2 2
2 0 0 0 0 0
3 0 0 0 0 0
4 0 0 0 0 0
5 0 0 0 0 0
6 0 0 0 0 0

* Inhibition zone diameter correspond to the means of triplicate analysis


Table 2. Effect of different concentrations of acetic acid, lactic acid and pH on antifungal activity.

3.3 Minimal inhibitory concentrations (MIC) of acetic acid and lactic acid for F.
verticillioides strains
The MIC values of these acids against F. verticillioides (Table 3) indicate that the 97L

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 171


MIC % (m/v)

Strains Lactic acid Acetic acid

97L 0.4 0.2

97K 1.0 0.4

103F 2.0 1.0

113F 2.0 0.5

103G 2.0 0.4


Table 3. Minimum inhibitory concentrations of lactic and acetic acid against F. verticillioides strains (97L,
97K, 103F, 113F and 103G).

3.4 Effect of cell-free supernatant on F. verticillioides mycelial growth and


morphology
The antifungal effect of cell-free supernatants (CFSs) from L. plantarum BG112
and L. reuteri LR-92 against F. verticillioides

F. verticillioides 97L, as evidenced by the

of F. verticillioides

from L. plantarum BG112 (Fig. 1C) and L. reuteri

caused irreversible damage to conidia, resulting in cell mortality and inhibition of hyphal

L. reuteri LR-92 (Fig. 1B).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 172


Percentage of conidial
germination inhibition (%) inhibition (%)
5 6 7
F. verticillioides (conidia/mL) 10 10 10 105 106 107

Treatment

CFS L. plantarum BG112 96% 98% 98% 100% 100% 100%

CFS L reuteri 97% 99% 97% 100% 100% 100%


LR-92
Table 4. Effect of cell-free supernatant of L. plantarum BG112 and L. reuteri LR-92 on the conidial
F. verticillioides 97L.

Fig. 1. Scanning electron micrographs of F. verticillioides 97L after seven days of culture at 25ºC.
(108 CFU/mL) L. reuteri LR-92 cells (B);
L. plantarum BG112, 8000X (C); and conidia
L. reuteri LR-92, 8000x (D).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 173


3.5 Effect of LAB strains on fumonisin B1
The ability of LAB strains to remove FB1
percentage of FB1 removed by the viable cells ranged from 30.1% (L. gasseri) to 78.0%
(L. fermentum ATCC 9339). L. fermentum 1
removal
L. reuteri LR-
1
removal percentages ranging
from 49.5% (L. plantarum BG112, L. plantarum ATCC 94917) to 88.0% (L. reuteri LR-92).
L. reuteri LR-92 (88.0%), L. paracasei (80.7%), L. fermentum ATCC 9339 (80.7%) and
L. gasseri 1

(p<0.05) from that of other LAB strains.

% FB1 removal*

Microorganism Viable cells† Nonviable cells by heat


treatment†
L.plantarum ATCC 14917 35.6 ± 5.8deB 50.9 ± 1.6bB

L.plantarum ATCC 94917 46.2 ± 5.8cdB 49.5 ± 4.9bB

L.fermentum ATCC 9339 78.0 ± 1.9aA 80.7 ± 0.8aA

L.paracasei 57.2 ± 0.9bcB 80.7 ± 1.9aA

L.gasseri 30.1 ± 4.2eB 72.9 ± 4.7aA

L.reuteri LR-92 71.9 ± 3.1abB 88.0 ± 0.1aA

L.plantarum BG112 41.7 ± 5.2deB 49.5 ± 3.4bB

*Results correspond to the means and SD (standard deviation) from triplicate analysis

respectively.
Table 5. Fumonisin B1 removal (%) by viable and nonviable cells of LAB strains at 2.5 mg mL-1 FB1
concentration.

In the comparison of FB1 removal ability (%) by the same strain, heat-inactivated
cells of the L. reuteri LR-92, L. paracasei, and L. gasseri
1

4 | DISCUSSION
Interest in biological control as an alternative method to conventional fungicides

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 174


because they are generally regarded as safe (GRAS) and several studies on natural fungal
antagonists of lactic acid bacteria (LAB) have been reported (JUODEIKIENE et al., 2018;
TAROUB et al., 2019). In the present study the
evaluated against F. verticillioides strains. Among seven LAB strains, L. plantarum BG112
and L. reuteri antifungal activity (Table 1). These results are in
et al. (2002), Lavermicocca et al. (2000), Oliveira et al. (2015) and
Schmidt et al
some Fusarium species. Laitila et al L. plantarum
E76 against F. avenaceum, F. culmorum, F. oxysporum and F. graminearum. Lavermicocca
et al. (2000) evaluated the antifungal activity of L. plantarum 21B and reported inhibition
against Penicillium expansum IDM/FS2, FTDC3226, and Fusarium
graminearum IDM623. Oliveira et al. (2015) and Schmidt et al
inhibitory capacity of L. reuteri R29 against F. culmorum.

et al.
antifungal activity of L. reuteri

et al. (2001) evaluated the ability of L. rhamnosus


VT1 and L. reuteri Fusarium sp., Aspergillus sp. and
Penicillium Fusarium
inhibited by both bacteria. Moreover, L. reuteri
been previously characterized as a lactic acid-, acetic acid-, succinic acid- and reuterin-
producing strain (MAURO; GARCIA, 2019).
CFSs from L. plantarum BG112 and L. reuteri
caused morphological alteration of F. verticillioides 97L conidia (Fig. 1C and 1D), indicating
that antifungal activity is related to the production of bioactive compounds. Deepthi et al.,

morphology of Fusarium proliferatum Lactobacillus plantarum


MYS6. Similarly, CFS from L. plantarum MYS44 suppressed conidial germination and
Aspergillus parasiticus, in addition to inducing morphological changes
et al.
and hyphal deformation of Penicillium chrysogenum
Lactobacillus casei AST18 (LI et al., 2014). The results presented in this study (Fig. 1)
demonstrate that the antifungal compounds produced by the selected lactic acid bacteria
can alter F. verticillioides conidial and hyphal morphology. Conidial germination is a critical
phase in phytopathogen development; therefore, the action of antifungal compounds at
this stage can reduce fungal pathogenicity, because conidia are essential for asexual
reproduction and fungal development (BORAH et al.
that lactic acid bacteria can produce several antifungal compounds, including organic

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 175


acids such as lactic acid, acetic acid, phenyllactic acid and propionic acid (CROWLEY;
MAHONY; VAN SINDEREN, 2013; LE LAY et al., 2016), peptides (GUPTA; SRIVASTAVA,
2014), reuterin (SCHMIDT et al., 2018), fatty acids and hydroxy fatty acids (BLACK et al.,
2013). The antifungal activity of LAB is a complex phenomenon because these bacteria are
capable of producing different antifungal compounds that often act in synergy (LAITILA et
al., 2004).
Several researchers have reported the ability of LAB to detoxify mycotoxins,
including fumonisins (TUPPIA et al.
deoxynivalenol (DON) (FRANCO et al., 2011), ochratoxin A (LUZ et al., 2018), and patulin
(HATAB; YUE; MOHAMAD, 2012).
The FB1

(6.5 x 108 cell mL-1) and different LAB species. Pizzolitto, Salvano and Dalcero (2012)
evaluated the ability of Lactobacillus acidophilus 24 to remove FB1 from PBS solution.

B1 and B2

DON (55%), FB1 (82%) and FB2

bacteria.
et al
(LAB) and the functional groups of fumonisin (FB) involved in the LAB-FB interaction.
The authors suggested that the peptidoglycan (PG) and tricarboxylic acid in LAB and FB,

also indicated
et al.,
2001; FRANCO et al., 2011).
Heating of viable cells can cause protein denaturation or the formation of Maillard

mycotoxin binding to

process (EL-NEZAMI et al., 2002; NIDERKORN, BOUDRA, MORGAVI, 2006).

et al., 2009). In this study, the FB1


(p<0.05) among bacterial species, but strains of the same species (L. plantarum

mechanism involved in FB1 removal.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 14 176


5 | CONCLUSION
L. plantarum BG112 and L. reuteri antifungal activity against
toxigenic F. verticillioides. CFS from both bacteria inhibited conidial germination and

promising as biocontrol agents, since many commercial synthetic antifungals have similar
effects. In addition, some LAB strains reduced the FB1 concentration in vitro. These results
demonstrate the potential of LAB for biological control of F. verticillioides to minimize
fumonisin contamination, thus contributing to improved food safety.

ACKNOWLEDGEMENTS

Foundation (Project announcement 09/2016, Research project agreement 001/2017),

are also grateful to Laboratory of Electron Microscopy and Microanalysis (LMEM) – State
University of Londrina.

CONFLICT OF INTEREST

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CAPÍTULO 15
PARÂMETROS REPRODUTIVOS EM ESPÉCIES
NEOTROPICAIS DE Drosophila (DIPTERA;
DROSOPHILIDAE)

Data de aceite: 10/01/2022 Natana Maria Metinoski Bueno


Data de submissão: 20/10/2021 Universidade Estadual do Centro-Oeste –
UNICENTRO, Departamento de Ciências
Biológicas
Guarapuava – PR
Lorenna Tayrini de Oliveira da Silva http://lattes.cnpq.br/4573281078486654
Universidade Estadual do Centro-Oeste –
UNICENTRO, Programa de Pós-graduação em Rogério Pincela Mateus
Biologia Evolutiva, Departamento de Ciências Universidade Estadual do Centro-Oeste –
Biológicas UNICENTRO, Programa de Pós-graduação em
Guarapuava – PR Biologia Evolutiva, Departamento de Ciências
http://lattes.cnpq.br/7091486201211918 Biológicas
Guarapuava – PR
Silvana Aparecida Beira https://orcid.org/0000-0001-7874-1149
Universidade Estadual do Centro-Oeste –
UNICENTRO, Programa de Pós-graduação em Luciana Paes de Barros Machado
Biologia Evolutiva, Departamento de Ciências Universidade Estadual do Centro-Oeste –
Biológicas UNICENTRO, Programa de Pós-graduação em
Guarapuava – PR Biologia Evolutiva, Departamento de Ciências
http://lattes.cnpq.br/0232743142891514 Biológicas
Guarapuava – PR
Camila Heloise dos Santos https://orcid.org/0000-0002-3197-0187
Universidade Estadual do Centro-Oeste –
UNICENTRO, Programa de Pós-graduação em
Biologia Evolutiva, Departamento de Ciências
Biológicas RESUMO: Ajustes distintos da coevolução
Guarapuava – PR antagônica entre sexos podem resultar em
http://lattes.cnpq.br/2530803995320807 diferenciação interpopulacional e especiação.
Janaina Cosmedamiana Metinoski Bueno Existe uma lacuna muito grande de dados
Universidade Estadual do Centro-Oeste – reprodutivos sobre espécies de Drosophila
UNICENTRO, Departamento de Ciências que ocorrem nas matas brasileiras, onde, na
Biológicas
Guarapuava – PR distinguem. O objetivo deste trabalho foi realizar
http://lattes.cnpq.br/6847242771720540 a análise de características reprodutivas de duas
espécies de Drosophila, D. maculifrons e D.
mediostriata, provenientes de duas populações
simpátricas (PMA e SSF) de fragmentos de
mata da região Neotropical, as quais não
foram estudadas quanto a aspectos da biologia

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 183


reprodutiva até o momento. Foram analisados o tamanho do testículo (TT), duração da
cópula (DC), número de espermatozoides armazenados pelas fêmeas por cópula (EA), de
progênie produzida pelas fêmeas por cópula (P/F), e a produtividade de cruzamentos intra
e interpopulacionais (P/C). TT e EA em D. maculifrons
que em D. mediostriata
sendo maior em SSF para ambas espécies, e para DC, também maior em SSF para D.
maculifrons e em PMA para D. mediostriata. No entanto, diferenças em EA e DC entre
populações das duas espécies não resultou em diferenças na produtividade dos cruzamentos

testículo com maior número de espermatozoides armazenados em D. maculifrons do que


em D. mediostriata. No entanto, esta superioridade em D. maculifrons
número de progênie/cópula que em D. mediostriata, e o ajuste populacional diferencial no
armazenamento de espermatozoides e duração da cópula não resultaram em cruzamentos
improdutivos, sugerindo que o nível das diferenças interpopulacionais nos mecanismos pré-
zigóticos analisados não tiveram consequências nos parâmetros pós-zigóticos, apesar de
D. mediostriata, que
são destacadas neste trabalho.
PALAVRAS-CHAVE: espermatozoide, produtividade, testículo.

REPRODUCTIVE PARAMETERS IN NEOTROPICAL SPECIES OF Drosophila


(DIPTERA; DROSOPHILIDAE)
ABSTRACT:

Drosophila

Drosophila species, D. maculifrons and D. mediostriata

aspects of reproductive biology to date. Testis size (TT), duration of copulation (DC), number
of sperm stored by females per copulation (EA), progeny produced by females per copulation

in D. maculifrons D. mediostriata
interpopulation difference for EA, being higher in SSF for both species, and for DC, also
higher in SSF for D. maculifrons and in PMA for D. mediostriata

larger testis and larger number of sperm stored in D. maculifrons than in D. mediostriata.
D. maculifrons
copulation than in D. mediostriata, and the differential population adjustment in sperm storage
and copulation duration did not result in unproductive crosses, suggesting that the level of
interpopulation differences in the prezygotic mechanisms analyzed had no consequences on

D. mediostriata

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 184


KEYWORDS

1 | INTRODUÇÃO
Os espécimes de Drosophila da família Drosophilidae (Diptera; Insecta) são

de leveduras, que se desenvolvem em tecidos vegetais em decomposição. A utilização

antrópica (RAFAEL; VELA, 2003), explicam o sucesso do gênero e a sua ampla distribuição
(THROCKMORTON, 1975). As moscas deste gênero apresentam sensibilidade a alterações

a taxa de aumento e sobrevivência da população como fertilidade, viabilidade, tempo de


desenvolvimento, e resistência dessecação (SENE et al., 1980; TIDON-SKLORZ; SENE,
1992; BALANYA et al., 2006; TORRES; MADI-RAVAZZI, 2006; MATEUS et al., 2019).
As espécies representantes dos grupos irmãos guaramunu (ROBE; LORETO;
VALENTE, 2010; ROBE; VALENTE; LORETO, 2010) e tripunctata (THROCKMORTON,
1975), Drosophila maculifrons e D. mediostriata, respectivamente, são objeto deste
trabalho. Estas espécies são generalistas e endêmicas da região Neotropical, abundantes
especialmente nas áreas de mata do sul do Brasil (DOBZHANSKY; PAVAN, 1950; SALZANO,
1955; KLACZKO, 2006; TIDON, 2006; SCHMITZ; HOFMANN; VALENTE, 2010; CAVASINI
et al., 2014; OLIVEIRA et al. 2016), nunca foram estudadas quanto as características
reprodutivas que podem estar sob ação de seleção sexualmente antagônica, cujo “ajuste”
às condições ambientais de uma população pode resultar, ao longo do tempo evolutivo,
na gênese de novas espécies (MARKOW, 1996; KNOWLES; MARKOW, 2001), processo
chamado de especiação.

características reprodutivas da fêmea pelo macho para aumentar seu sucesso reprodutivo,
que é seguida pela evolução da resistência da fêmea a essa coerção (MOORE; PIZZARI,

de acasalamento e de muitas características reprodutivas (ARNQVIST; NILSSON, 2000),


desta maneira a análise integrada de diferentes caracteres reprodutivos, assim como a
história evolutiva da espécie, é essencial para a compreensão da evolução dos sistemas
reprodutivos. Os machos e as fêmeas são agentes atuantes na evolução dos caracteres
reprodutivos, e a dinâmica e consequências dessas atividades apenas começaram a ser
compreendidas em insetos: os machos apresentam diferentes características do esperma

a evolução destes caracteres (SNOOK; BACIGALUPE; MOORE, 2005).


Algumas características da morfologia do aparelho reprodutivo do macho podem
desempenhar um papel na seleção sexual pós-cópula (SNOOK; BACIGALUPE; MOORE,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 185


2005). A morfologia dos órgãos reprodutores e de armazenamento de espermatozoides, e
o processo de transferência e armazenamento de espermatozoides mostram uma extensa
variação no gênero Drosophila. O aparelho reprodutivo da fêmea também pode atuar na
competição pela fertilização: receptáculos seminais mais longos favorecem espermas
mais longos, os quais podem deslocar os gametas anteriores e aumentar a velocidade de
reacasalamento (MILLER; PITNICK, 2002; LÜPOLD et al., 2016).
O tamanho do testículo também apresenta grande variação entre os machos de
espécies de Drosophila (MARKOW, 1996, PITNICK; MARKOW, 1994a; PITNICK, 1996)
e, em algumas espécies, parece estar positivamente relacionado com o tamanho do
espermatozoide, ao invés do número de espermatozoides produzidos (PITNICK, 1996),
o que pode levar a um maior período para a maturação sexual do macho, devido ao
investimento relativamente maior na formação do tecido testicular (PITNICK; MARKOW,
1994a), e a grande variação no número de espermatozoides transferidos, quanto maior
o espermatozoide menor a quantidade transferida, para os órgãos de armazenamento da
fêmea (de 25.000 em D. obscura a 44 em D. pachea) (MARKOW, 1996). Em espécies
de Drosophila com maior tamanho corporal os machos investem proporcionalmente mais

na produção de gametas também é muito maior no macho do que nas fêmeas.


O padrão mencionado anteriormente em Drosophila de quanto maior o tamanho
menor o número de espermatozoides transferidos para as fêmeas, também tem relação com
menor a progênie, em comparação com espécies que produzem espermatozoides menores
(GILBERT, 1981; MARKOW, 1985; PITNICK, 1991; BRESSAC; FLEURY; LACHAISE, 1994;
PITNICK; MARKOW, 1994a,b; SNOOK; MARKOW; KARR, 1994; PITNICK, 1996). Esta
relação poderia trazer a falsa constatação de que os espermatozoides menores seriam
espermatozoide
transferido por zigoto em D. melanogaster, espécie que produz e transfere milhares
de espermatozoides, é de cerca de 2 espermatozoides por zigoto (GILBERT, 1981),
praticamente a mesma taxa de D. hydei, de 2,2 (PITNICK; MARKOW, 1994b), espécie de
espermatozoides “gigantes” e que produz e transfere um número de espermatozoides bem
inferior a D. melanogaster. Assim, o tamanho dos espermatozoides pode ter relação com
a quantidade transferida para as fêmeas, mas não com a sua qualidade na produção de
zigotos.
Outro importante caráter reprodutivo também sujeito à coevolução antagônica entre
os sexos é o tempo de duração da cópula (MOORE; PIZZARI, 2005), pois para as fêmeas,
cópulas mais curtas resultariam em mais oportunidades de acasalamento e escolha críptica
dos espermatozoides no seu trato reprodutivo (MARKOW; HOCUTT, 1998; KNOWLES;
MARKOW, 2001); enquanto para os machos, cópulas mais longas seriam vantajosas
por impedir que a fêmea se reacasale, e assegurar a paternidade da prole (MAZZI et al.,
2009). Os espermatozoides de dois machos armazenados em uma fêmea competem para

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 186


fertilizar os óvulos, esta competição, pode resultar no desenvolvimento de mecanismos que
asseguram a paternidade, sendo o aumento da duração da cópula um deles (PITINICK;
MARKOW; SPICER, 1995; MARKOW, 1996).
Em Drosophila melanogaster foi demonstrado que o tempo de cópula que
excede o período necessário para a transferência do esperma tem função de retardar
o reacasalamento da fêmea, ao invés de aumentar a prole descendente deste macho
(GILCHRIST; PARTRIDGE, 2000). Ainda, fatores diferentes da seleção sexual também
podem interferir no sucesso da cópula em Drosophila, por exemplo, a qualidade da dieta
na fase juvenil pode afetar mais fortemente a frequência de cópulas nas fêmeas do que nos
machos (GRANGETEAU et al., 2018).
Pode haver correlação entre o aparato reprodutivo de machos e fêmeas e a
qualidade do espermatozoide, por exemplo, em Drosophila melanogaster o tamanho do
espermatozoide, dos testículos e do receptáculo seminal das fêmeas é o mesmo, todos
medem cerca de 2 mm. Nesta espécie, apenas após 20 minutos da cópula os órgãos de
armazenamento de espermatozoides nas fêmeas (receptáculo seminal e espermatecas)
estão repletos de espermatozoides, os espermatozoides que permanecem no útero são
eliminados com a postura dos ovos (LEFEVRE; JONSSON, 1962). Assim, é esperado que
os machos saturem a capacidade dos órgãos de armazenamento de espermatozoides das

fertilizar seus ovos, e reabastecer rapidamente seu suprimento de espermatozoides após a


cópula (PARKER, 1970; TRIVERS, 1972; KNOWLTON; GREENWELL, 1984).
Em resumo, os modelos propostos para explicar a evolução das estratégias

características, que podem afetar a reprodução, como investimento na produção de gametas


e prole (PITINICK; MARKOW, 1994a; LÜPOLD; PITNICK, 2018). Apesar da fertilização

quantidade e qualidade do espermatozoide podem operar independentemente (PARKER


et al., 2010), não existindo uma dicotomia entre a competição de esperma e a escolha
críptica da fêmea (EBERHARD, 1996; LÜPOLD et al., 2016), e qualquer característica
do espermatozoide determinada pela seleção pós-cópula é tanto intra (competição com
espermatozoides de outros machos) como intersexual (escolha da fêmea). Assim, a duração
da cópula, a fertilização interna e o armazenamento de espermatozoide que ocorrem em

reprodutivo pré e pós-zigóticos.


Muitas das pesquisas sobre a biologia reprodutiva citadas acima foram realizadas
com espécies de Drosophila oriundas de áreas antropizadas, ou xerofíticas, ou ainda de

biologia reprodutiva de espécies de Drosophila que ocorrem em áreas de mata do Brasil.


O objetivo deste trabalho foi analisar alguns caracteres reprodutivos, tamanho do testículo,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 187


duração da cópula, número de espermatozoides armazenados na espermateca, número
de progênie por cópula, e a produtividade de cruzamentos intra e interpopulacionais de

no sul do Brasil, Drosophila maculifrons (grupo guaramunu) e D. mediostriata (grupo


tripunctata). Dessa forma, pretende-se contribuir com informações sobre a força e os alvos
da seleção sexual em espécies do Neotrópico, região com altas taxas de especiação.

2 | MATERIAL E MÉTODOS

• Locais de coleta
Para as análises de tamanho do testículo, duração da cópula, número de
espermatozoides armazenados na espermateca, e produtividade de cruzamentos massais,
foram utilizadas duas populações de Drosphila maculifrons e D. mediostriata, coletadas em

Para as análises de produção de descendentes por cópula, foram utilizados indivíduos de


D. maculifrons e D. mediostriata apenas da população SSF.

• Caracteres morfológicos dos testículos e espermatozoides


Foram removidos os testículos direito e esquerdo de cinco machos de cada uma das
duas populações de Drosophila maculifrons e D. mediostriata, PMA e SSF. Para as medidas
dos testículos, machos virgens com nove dias de idade foram eterizados e dissecados em

foram realizadas utilizando o Programa ImageJ 1.52a (ABRAMOFF; MAGALHÃES; RAM,


2004).
A análise dos espermatozoides dos testículos foi realizada em machos virgens com
sete dias de idade. Os testículos foram removidos e esmagados entre lâmina e lamínula.
As lâminas foram, então, congeladas em nitrogênio líquido para a posterior remoção da
etanol/ácido acético (3:1) durante três minutos. Em seguida, as
lâminas passaram por limpeza em álcool 70% e água destilada, para serem coradas com
4,6-diamino-2-phenyndole (DAPI), e fotografadas em microscópio composto (Olympus

• Duração da cópula
A observação da cópula de Drosophila maculifrons e D. mediostriata na natureza
não é possível, devido à ocorrência de espécies crípticas nas populações PMA e SSF (dos
SANTOS; MACHADO; MATEUS, 2010; CAVASINI et al., 2014), onde os espécimes foram
coletados. Desta maneira, foi realizada tentativa de replicar em laboratório (com moscas

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 188


recém-coletadas) importantes condições naturais para a ocorrência de cópula, como a
densidade de moscas e período do dia para esta atividade. As análises para estimativa
do número de espermatozoides armazenados por cópula e da progênie produzida pelas
fêmeas por cópula (descritas a seguir) revelaram baixa frequência de cópula quando
uma fêmea virgem com sete dias a nove dias de idade foi colocada com três machos
virgens com as mesmas idades. Desta maneira, considerando o número médio de moscas
capturadas por armadilha (dos SANTOS; MACHADO; MATEUS, 2010), e que a atividade
de cópula segue, geralmente, o ritmo de atividade locomotora em espécies Neotropicais de
Drosophila (PAVAN; DOBZHANSKY; BURLA, 1950; FUJII; KRISHNAN, 2007; dos SANTOS;
MACHADO; MATEUS, 2010), a observação da cópula foi realizada em cruzamentos
massais com 15 casais entre sete e nove dias de idade, em período de três horas entre as
8h e 11h.

• Estimativas do número de espermatozoides armazenados nas espermatecas das


fêmeas por cópula
Foram realizadas cinco réplicas de cruzamentos com uma fêmea e três machos
virgens com sete a nove dias de idade. Após alguns minutos do término da cópula, as
espermatecas das fêmeas foram removidas e esmagadas entre lâmina e lamínula. As
lâminas para a contagem dos espermatozoides armazenados nas espermatecas foram
realizadas e analisadas como descrito para a observação dos espermatozoides no testículo.
O número de espermatozoides armazenados foi estimado pela contagem dos

2004), para individualizar cada espermatozoide e impedir que um mesmo gameta fosse
considerado mais de uma vez. A motilidade dos espermatozoides armazenados também
foi avaliada. Após cópula, foram preparadas lâminas das espermatecas esmagadas entre

• Análise do número de descendentes produzidos por cópula


Em câmaras de oviposição, foram realizadas cinco réplicas de cruzamentos de
indivíduos de SSF para cada espécie, contendo uma fêmea e três machos virgens com sete
a nove dias de idade, após o término da cópula, os machos foram removidos da câmara.
Placas para oviposição, contendo ágar 0,5% (1,5% de ágar; 10% de sacarose; e 0,4% de
Nipagim), foram observadas e substituídas diariamente, até que as fêmeas deixassem de
postar ovos por ao menos dois dias consecutivos. De cada placa foi registrado o número
de ovos produzidos, as larvas de segundo estadio foram transferidas para tubos com meio
de cultura padrão (banana/ágar), e os adultos emergidos foram sexados e contados. A
realização deste experimento também possibilitou estimar a viabilidade dos ovos postos
pelas fêmeas (porcentagem de ovos que resultaram em larvas, de larvas em adultos, e de
ovos a adultos) de Drosophila maculifrons e D. mediostriata. Para averiguar se as fêmeas
destas espécies postam ovos não fertilizados, o mesmo experimento descrito anteriormente

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 189


foi realizado com cinco réplicas de fêmeas virgens recém eclodidas a idade em que a
ausência de ovos atingisse dois dias consecutivos.

• Produtividade de cruzamentos intra e interpopulacionais


Para Drosophila maculifrons, foram realizados cruzamentos massais em todas as
combinações possíveis entre duas isolinhagens de PMA (PMA142 e PMA164) e duas de
SSF (SSF008 e SSF033), totalizando 16 cruzamentos: quatro intracruzamentos (machos
e fêmeas da mesma linhagem); quatro cruzamentos interlinhagem e intrapopulacional; e
oito cruzamentos interlinhagem e interpopulacional. Para D. mediostriata, foram realizados
cruzamentos com apenas uma linhagem de cada população, totalizando quatro cruzamentos:
dois intra e dois interpopulacionais (Tabela 1). Os cruzamentos foram mantidas a 20oC±1oC
e fotoperíodo natural.
Cada cruzamento foi realizado em garrafas de 1/4 de L com meio de cultura padrão
e em triplicatas contendo em cada uma 15 fêmeas e 15 machos virgens com sete dias de
idade. Foram realizados três (para D. maculifrons) e quatro (para D. mediostriata) repiques,
um por semana, e após uma semana do terceiro/quarto repique, as moscas parentais forma
descartadas. A cada repique foi avaliado o número de indivíduos mortos para a estimativa
do número de descendentes por fêmeas vivas. Assim, foram estabelecidos quatro grupos
de idades para D. maculifrons: 1° grupo, moscas com 7 a 13 dias; 2° grupo, moscas com
14 a 20 dias; 3° grupo, moscas com 21 a 27 dias; e 4° grupo, moscas com 28 a 34 dias;
e cinco grupos para D. mediostriata: os mesmos quatro de D. maculifrons, mais 5° grupo,
moscas com 35 a 41 dias.

Drosophila maculifrons
PMA142 PMA164 SSF008 SSF033
PMA142 PMA142x PMA142 PMA164x PMA142 SSF008x PMA142 SSF033x PMA142
PMA164 PMA142x PMA164 PMA164x PMA164 SSF008x PMA164 SSF033x PMA164
SSF008 PMA142x SSF008 PMA164x SSF008 SSF008x SSF008 SSF033x SSF008
SSF033 PMA142x SSF033 PMA164x SSF033 SSF008x SSF033 SSF033x SSF033
Drosophila mediostriata
PMA SSF
PMA PMAx PMA SSFx PMA
SSF PMAx SSF SSFx SSF
Tabela 1 - Cruzamentos realizados entre linhagens de duas populações de Drosophila maculifrons
e D. mediostriata. PMA = Parque Natural Municipal das Araucárias, SSF = Parque Municipal Salto
São Francisco da Esperança. Em negrito cruzamentos intralinhagem; sublinhados os cruzamentos
interlinhagens; os demais são cruzamentos interpopulacionais.

e intercruzamentos. Esta análise foi realizada por meio da contagem de machos e fêmeas

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 190


F1 dos cruzamentos em cada um dos quatro e cinco grupos de idade. As contagens foram
realizadas a cada dois dias, após o início da emergência dos primeiros adultos, totalizando

tenham sido registrados. A comparação da produtividade entre os cruzamentos foi realizada


por meio do número total de indivíduos produzidos e também considerando o número de
fêmeas vivas em cada grupo de idade para produção por fêmea.

• Análises Estatísticas
Foram estimadas as médias e desvios padrões do tamanho dos testículos, duração
da cópula, número de espermatozoides armazenados nas espermatecas, número de ovos,
larvas e adultos produzidos por cópula, da viabilidade, do período de desenvolvimento,
e da produtividade no programa Past 3.16. (HAMMER; HARPER; RYAN, 2017). A

brutos, logaritimizados e extraída a raiz quadrada, e, assim, foram aplicados os testes de

Para os dados que apresentaram distribuição normal foi aplicada a análise de variância –

do período de observação, e do número de ovos, larvas e adultos produzidos por cópula.

3 | RESULTADOS

• Caracteres morfológicos dos testículos e espermatozoides


O aparelho reprodutor dos machos das espécies D. maculifrons e D. mediostriata
é constituído por glândulas acessórias translúcidas, um par de vesículas seminal e de

longo, com regiões esbranquiçadas homogêneas. De sua porção apical até a vesícula
seminal, o testículo apresenta forma espiral com três ou mais giros. A vesícula seminal

por uma região que se afunila na parte posterior do testículo, alargando-se novamente já
como vesícula seminal.
As medidas dos testículos apresentaram distribuição normal após os dados serem
logaritmizados. Não houve diferenças estatísticas no tamanho entre os testículos esquerdos
e direito em Drosophila maculifrons
D. mediostriata

no tamanho dos testículos nas duas espécies, no entanto os testículos dos machos de D.
maculifrons D. mediostriata (F = 5,072, p =
0,0317) (Tabela 2).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 191


Drosophila mediostriata Drosophila maculifrons
Tamanho Testículo PMA SSF PMA SSF
Direito 8,370± 0,637 8,242± 0,548 8,728± 1,080 9,023± 0,814
Esquerdo 8,378± 0,673 8,272± 0,487 8,809± 0,773 8,837± 0,782
Média da espécie 8,315 ± 0,585 8,849 ± 0,807
Tabela 2 - Tamanho médio dos testículos (mm) direitos e esquerdos de populações (PMA e SSF) de
Drosophila mediostriata e D. maculifrons. PMA = Parque Natural Municipal das Araucárias, SSF =
Parque Municipal Salto São Francisco da Esperança.

Os espermatozoides encontrados nos testículos de Drosophila maculifrons e D.


mediostriata
livres quando maduros (Figura 1).

Figura 1 - Espermatozoides corados (DAPI) dos testículos de Drosophila mediostriata (A) e D.


maculifrons (B).
Fonte: foto tirada por da Silva, L. T. O.

• Duração da cópula

ambas as espécies: DC em PMA foi mais curta (24,45 ± 8,7 min) do que em SSF (40,69
± 16,18 min) para D. maculifrons (F = 11,71, p < 0,01), e mais longa para D. mediostriata
(PMA = 33,84 ± 2,83 min, SS = 20,84 ± 8,02; F = 7,68, p < 0,05).

• Estimativas do número de espermatozoides armazenados nas espermatecas das


fêmeas por cópula
Os espermatozoides encontrados nas espermatecas das fêmeas de Drosophila
maculifrons e D. mediostriata apresentaram motilidade, e foram encontrados espacialmente

espermatozoides armazenados tanto para D. maculifrons (PMA: = 93 ± 10,1; SSF: = 150,8


± 30,43, F = 16,25, p = 0,004), como para D. mediostriata (PMA: = 63 ± 8,31; SSF: = 78,4

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 192


± 6,5, F = 10,65, p = 0,0115), com maior armazenamento nas espermatecas das fêmeas
provenientes de SSF. As fêmeas das duas populações de D. maculifrons armazenaram
D. mediostriata (PMA:
F = 26,32, p = 0,0009; SSF: F = 27,08, p = 0,0008).

Figura 2 - Espermatozoides corados (DAPI) nas espermatecas de Drosophila maculifrons (A) e D.


mediostriata (B).
Fonte: foto tirada por da Silva, L. T. O.

• Análise do número de descendentes produzidos por cópula


Apenas as fêmeas virgens de Drosophila maculifrons põem ovos não fertilizados a
partir do 5o até o 17o dia de vida, que não se desenvolvem. As fêmeas inseminadas por um
único macho de D. maculifrons e D. mediostriata começaram a oviposição no primeiro dia
pós-cópula e terminaram cerca de 21 dias depois. Ao longo deste período, o número de
ovos postos foi bastante irregular para as duas espécies (Figura 3). Apesar de uma maior
produção de ovos, larvas e adultos pelas fêmeas de D. maculifrons, não houve diferença

devido ao alto desvio padrão (Ovos: F = 2,376, p = 0,1618; Larvas: F = 1,439, p = 0,2646;
Adultos: F = 1,668, p = 0,2326). Ainda, se considerado que cerca de 21% dos ovos postos
pelas fêmeas inseminadas de D. maculifrons (X = 330,6 ± 255,79) pode representar ovos
não fertilizados (X = 69,4 ± 43,37), a ausência de diferença estatística entre o número de

A viabilidade de ovos-larvas de Drosophila maculifrons foi estimada em X = 34,08%


± 17,69 e X = 38,79% ± 18,6 para D. mediostriata, para larva-adulto de D. maculifrons
X = 57,43% ± 10,95, e X = 47,88% ± 21,06 para D. mediostriata, como consequência a
viabilidade média ovo-adulto foi de X = 20,41% ± 12,5 para D. maculifrons, e de X = 19,4%
± 10,99 para D. mediostriata

que a viabilidade ovo-adulto de D. maculifrons deve ser ainda inferior aos cerca de 20%

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 193


estimados, pois as fêmeas desta espécie postam ovos não fecundados.
• Produtividade de cruzamentos intra e interpopulacionais
A comparação dos intracruzamentos com os cruzamentos interlinhagem
intrapopulacional de Drosophila maculifrons
produtividade de machos e fêmeas, e na produtividade total. Assim, as análises estatísticas
foram realizadas agrupando os sexos e os cruzamentos nos mesmos dois tipos de D.
mediostriata, intrapopulacional ( PMAx PMA e SSFx SSF) e interpopulacional
( PMAx SSF e SSFx PMA).

longo do tempo pós-cópula para fêmeas de Drosophila maculifrons (azul) e D. mediostriata (vermelho).

das idades entre os cruzamentos de D. maculifrons. Desta maneira, a comparação da


produtividade nos quatro grupos de idade foi realizada considerando o número médio de
descendentes produzidos por fêmea viva em cada período. A produtividade foi uniforme
ao longo dos quatro grupos de idades avaliados, apenas em SSFx PMA a produtividade
no 3o grupo de idade foi superior aos demais (F = 11,35; p = 0,0030). Não houve diferença

demonstrando não haver isolamento pós-zigótico entre as populações analisadas, apesar


das diferenças na duração da cópula entre os cruzamentos intra e interpopulacionais.
Para Drosophila mediostriata
na proporção de descendentes fêmeas e machos em todos os cruzamentos realizados. Já
as comparações da produtividade total e por fêmea apresentaram o mesmo quadro geral,
desta forma, foram destacadas as análises da produtividade total dos cruzamentos. Quando
agrupando os cruzamentos como intra e interpopulacionais, não foi observada diferença

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 194


foram agrupados em PMAx PMA com PMAx SSF, e SSFx SSF com SSFx PMA,
ou seja intra com fêmea do cruzamento interpopulacional a mesma do intrapopulacional,

cruzamento interpopulacional foi de população diferente do cruzamento intrapopulacional,


não foi obtido o mesmo resultado (Tabela 3). Não houve diferença estatisticamente

cruzamentos realizados, apesar de poder ser destacada uma queda na produtividade dos
4o e 5o grupos de idade nos cruzamentos que envolveram fêmeas de PMA.

SQ GL MQ F P
1
Entre os grupos 448,532 1 448,532 0,3012 0,5952
Dentro dos grupos 14890,9 10 1489,09
Total 15339,4 11
2
Entre os grupos 78,1789 1 78,1789 40,18 0,0000
Dentro dos grupos 19,4589 10 1,94589
Total 97,6378 11
SQ = soma dos quadrados; GL = graus de liberdade; MQ = média dos quadrados
Tabela 3 - Análise de variância do total de descendentes produzidos nos cruzamentos intra
e interpopulacionais de Drosophila mediopunctata do município de Guarapuava-PR: (1) intra
( PMAx PMA e SSFx SSF) e interpopulacionais ( PMAx SSF e SSFx PMA); (2) agrupamento
dos cruzamentos PMAx PMA com PMAx SSF e SSFx SSF com SSFx PMA. PMA = Parque
Natural Municipal das Araucárias, SSF = Parque Municipal Salto São Francisco da Esperança.

Os cruzamentos SSFx SSF e SSFx PMA apresentaram produtividade


semelhante e foram cerca de seis vezes mais produtivos que os cruzamentos PMAx PMA
e PMAx SSF, os quais, por sua vez, também apresentaram produtividade semelhante.
Desta forma, pode ser destacado que a produtividade foi determinada pela fêmea envolvida
no cruzamento (Figura 4).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 195


Figura 4 - Número médio de descendentes total (± desvios padrão) produzidos em cruzamentos intra
e interpopulacionais de Drosophila mediopunctata do município de Guarapuava-PR. PMA = Parque
Natural Municipal das Araucárias, SSF = Parque Municipal Salto São Francisco da Esperança.

4 | DISCUSSÃO
Embora existam evidências de que a seleção intra e intersexual desempenham
papel central na evolução dos caracteres reprodutivos e nos sistemas de acasalamentos
de Drosophila, sua importância em espécies de mata da região Neotropical não está clara.
Neste trabalho foram utilizadas espécies de grupos irmãos e provenientes de mesmas
populações, ou seja, ocorrendo em simpatria em áreas da Mata Atlântica brasileira, com o

que possivelmente pudessem ser encontradas entre D. maculifrons e D. mediostriata com


relação aos caracteres reprodutivos analisados.
Em espécies de Drosophila
testículos, com uma relação positiva entre o tamanho do testículo e do espermatozoide,
e negativa entre o tamanho e o número de espermatozoides transferidos para as fêmeas
(MARKOW, 1996), o que pode ocasionar um período maior para a maturação sexual do
macho, devido ao investimento relativamente elevado na formação do tecido testicular
(PITNICK; MARKOW, 1994a).

classes de tamanho de testículo em Drosophila: 1) entre 1 e 7 mm; 2) maior que 7 e menor


que 20 mm; 3) maior que 20 e menor que 30 mm; e 4) maior que 30 mm. Dentre as espécies
analisadas até o momento, apenas D. bifurca apresenta tamanho de testículo compatível
com a classe 4 (PITNICK; MARKOW; SPICER, 1995). O tamanho médio do testículo de D.
maculifrons e D. mediostriata enquadra-se na segunda classe, de espécies com tamanho
intermediário de testículo, nem diminutos, como da primeira classe, nem grandes, como as
espécies que podem produzir espermas “gigantes” (terceira e quarta classes) (PITNICK;
MARKOW, 1994b; PITNICK; MARKOW; SPICER, 1995).
Neste trabalho foi observado que Drosophila maculifrons apresentou maior

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 196


tamanho de testículo e maior número de espermatozoides armazenados pelas fêmeas
que D. mediostriata. Ainda, o número de espermatozoides armazenados pelas fêmeas nas
espermatecas foi maior na população SSF, a qual também apresentou a maior duração
da cópula nesta espécie. A competição de esperma está amplamente associada com
esse aumento no tamanho dos testículos e no número de espermatozoides em diferentes
táxons, insetos (GAGE, 1994), peixes (STOCKLEY et al., 1997), pássaros (MØLLER, 1988),
mamíferos (MØLLER, 1989), inclusive humanos (SIMMONS et al., 2004). No entanto, o
maior tempo de cópula e armazenamento de espermatozoides não resultaram em maior
número de progênie, sugerindo que essa espécie possa apresentar um limiar energético
para a produção de descendentes, o qual é independente do número de espermatozoides
disponíveis.
A receptividade da fêmea para se reacasalar depende da queda no número de
espermatozoides armazenados da cópula anterior, o retorno da receptividade da fêmea pode
ocorrer após a produção de 90% dos descendentes que seriam esperados de uma única
cópula (GROMKO; NEWPORT; KORTIER, 1984). Por isso, estimar o número de progênie
por cópula é importante no entendimento dos sistemas de acasalamento em Drosophila.
A maioria das espécies de Drosophila apresenta dois órgãos para armazenamento
de espermatozoides, o receptáculo seminal (órgão primário de armazenamento) e a
espermateca (PITNICK; MARKOW; SPICER, 1999). Neste trabalho foi estimado o número
de espermatozoides nas espermatecas das fêmeas de D. maculifrons e D. mediostriata
para determinar por quanto tempo esta reserva extra, após o uso dos espermatozoides do
receptáculo seminal serem utilizados, permitiria a produção de zigotos.
O período de oviposição após a cópula foi amplo (cerca de 20 dias), porém bastante
irregular, indicando que o espermatozoide armazenado pode ser utilizado por vários dias.
Pode ser constatado que o número médio de espermatozoides na espermateca foi inferior

seminal são utilizados primeiro, e que este baixo número extra de espermatozoides favorece
o reacasalamento para a reposição do estoque, reforçando a competição de esperma e
seleção intersexual, com a escolha críptica da fêmea (LÜPOLD; PITNICK, 2018).
A viabilidade dos zigotos de Drosophila maculifrons e D. mediostriata foi baixa,
sendo mais afetada na transição ovo-larva do que larva-adulto. Este é um fato que reforça
a importância da escolha críptica da fêmea na seleção dos espermatozoides armazenados
para a formação de zigotos viáveis. O número médio de progênie por cópula produzido
para estas espécies está entre os menores para as espécies em que este caráter foi
avaliado, sendo equivalente ao número estimado para D. hydei, espécie que produz
espermatozoides “gigantes”, que são transferidos em baixo número (cerca de 100/cópula)
para as fêmeas (PITNICK; MARKOW, 1994a; MARKOW, 1996; PITNICK, 1996). Desta
maneira, pode existir relação do tamanho do testículo e/ou da duração da cópula com o
número de espermatozoides armazenados pelas fêmeas, porém não com a qualidade da

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 197


progênie gerada.
A maior duração da cópula e maior número de espermatozoides que podem ser
armazenados pelas fêmeas podem ser uma resposta à competição de esperma com outros
machos (seleção intrassexual). Em algumas espécies de Drosophila a duração da cópula
é determinada pela fêmea (MAZZI et al., 2009), enquanto em outras pode estar sujeita ao
controle do macho (BACIGALUPE et al., 2007). Além disso, a duração da cópula poderia ser
o resultado da interação de ambos os sexos (MARKOW 1981; HIRAI; SASAKI; KIMURA,
1999). A duração da cópula de Drosophila maculifrons e D. mediostriata, entre 20 e 40
minutos, está entre as mais longas observadas até o momento (GRANT, 1883; MARKOW,
1996). Em insetos, este caráter depende de processos de coevolução sexualmente
antagônica (PARKER, 1979; HOLLAND; RICE, 1998; MOORE; PIZZARI, 2005), devido aos
“interesses” reprodutivos distintos entre machos e fêmeas.
A duração da cópula mais curta resulta em oportunidades para reacasalamentos e
escolha críptica da fêmea em seu trato reprodutivo (MARKOW; HOCUTT, 1998; KNOWLES;

fêmeas de se reacasalarem, assegurando a paternidade da prole (CHEN et al., 1988;


ALCOOK, 1994; SCHOEFL; TABORSKY, 2002; CHAPMAN et al., 2003; LIU; KUBLI, 2003;

também poderia ser vantajosa para a fêmea, pois o ejaculado dos machos é responsável
pelo aumento na fecundidade (NEUBAUM; WOLFNER, 1999; SAVALLI; FOX, 1999;
WOLFNER, 2002; XUE; NOLL, 2002; EDVARDSSON; CANAL, 2006; WIGBY et al., 2009).
Recentemente, também foi demonstrado que sob risco de competição de esperma, as

de descendentes do último macho competidor, e aumentar o número de espermatozoides


liberados (NGUYEN; MOEHRING, 2018; IWATA et al., 2021).

como o número de descendentes produzidos nos cruzamentos, também pode ser afetada
em cruzamentos interpopulacionais de espécies em divergência. Cruzamentos entre
populações de uma mesma espécie em processo de diferenciação incipiente, e cruzamentos

descendentes devido à esterilidade do macho híbrido (MADI-RAVAZZI; BICUDO, 1992;


MADI-RAVAZZI; BICUDO; MANZATO, 1997; MACHADO; CASTRO; MADI-RAVAZZI, 2002;

neotrópico).
Apesar das diferenças observadas quanto aos caracteres reprodutivos pré-
zigóticos entre as populações de Drosophila maculifrons e D. mediopunctata, não houve
interferência na produtividade dos intercruzamentos. Contudo, algumas diferenças podem
ser destacadas na produtividade dos cruzamentos de D. mediostriata, a população SSF foi

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 198


mais produtiva que PMA e os cruzamentos interpopulacionais apresentaram produtividade
semelhante ao cruzamento intrapopulacional quando a fêmea envolvida no cruzamento
interpopulacional pertencia a mesma população do cruzamento intrapopulacional. Assim,
PMAx SSF apresentou produtividade semelhante ao cruzamento intrapopulacional
PMAx PMA, e SSFx PMA obteve produtividade similar a SSFx SSF.

isolamento reprodutivo é baseado na evolução arbitrária, ao acaso, como causa da seleção


sexual dirigindo o isolamento entre populações alopátricas (COBB; BURNET; CONNOLLY,
1988; PRICE et al., 2001; TANUJA; RAMACHANDRA; RANGANATH, 2001; COYNE et

os machos têm um número limitado de fêmeas para cruzar, e as fêmeas são capazes
de produzir um número limitado de descendentes (BATEMAN, 1948), pois os óvulos são
um recurso limitante devido ao alto custo energético de sua produção (ALEXANDER;
SHERMAN, 1977). Deste modo, baseado em experimentos que não demonstraram a

Bacigalupe e colaboradores (2007) propuseram que os custos para os machos e fêmeas no

das características reprodutivas poderiam ser os fatores responsáveis pela ausência desta
correlação.
Pode ser concluído que uma provável seleção de caracteres pré-zigóticos, resultado
da competição de esperma, pode levar a uma tendência de aumento no tamanho dos
testículos dos machos, o qual é seletivamente vantajoso por possibilitar maior produção de
espermatozoides, que pode, por sua vez, resultar em um maior número de espermatozoides
armazenados pela fêmea. Porém, o maior número de espermatozoides não determina um
incremento correspondente no número de descendentes produzidos pela fêmea, nem as
diferenças populacionais nestes parâmetros levou, ao menos neste momento evolutivo, a
divergência em caracteres pós-zigóticos. No entanto, vale aqui destacar que a diferença
na produtividade entre os cruzamentos interpopulacionais recíprocos de Drosophila
mediostriata sugerem certa assimetria da produtividade interpopulacional. O risco para
competição de esperma deve ser uma próxima etapa da avaliação do sistema reprodutivo
de D. maculifrons e D. mediostriata
e relação entre esses parâmetros em espécies polífagas do Neotrópico, em que esses
estudos são escassos.

AGRADECIMENTOS

bolsas de Mestrado de S. A. Beira e C. H. dos Santos. À Fundação Araucária pela bolsa


de Mestrado para L. T. O. da Silva. À UNICENTRO pela infraestrutura. E ao Laboratório

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 15 199


Multiusuário de Microscopia e Microanálise do Instituto de Biociências, Letras e Ciências
Exatas da Universidade Estadual Paulista (IBILCE/UNESP), por possibilitar o preparo para

também ao Prof. Dr. Vanderlei A. de Lima (UTFPR, Campus Pato Branco) por gentilmente

parte pela Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior – (CAPES) –


Código 001.

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CAPÍTULO 16
BENZOFENONA E OCTOCRILENO COMO
POLUENTES EMERGENTES: UMA PROBLEMÁTICA
AMBIENTAL E DE SAÚDE PÚBLICA

Data de aceite: 10/01/2022 Campus de Campo Mourão. Programa de Pós-


graduação em Engenharia Ambiental (PPGEA).
Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Diego Espirito Santo (UTFPR). Campus de Francisco Beltrão
Acadêmico. Curso de Engenharia Ambiental. Campo Mourão, Paraná, Brasil
Universidade Tecnológica Federal do Paraná http://lattes.cnpq.br/3605560420792065
(UTFPR). Campus de Campo Mourão
Campo Mourão, Paraná, Brasil
http://lattes.cnpq.br/4298214372751175
RESUMO: O objetivo do capítulo foi caracterizar
Andrielle Karine Ribeiro Mendes os poluentes emergentes quanto à estrutura,
Acadêmica. Curso de Engenharia Ambiental. degradação e regulamentação ambiental, com
Universidade Tecnológica Federal do Paraná enfoque em duas substâncias fotoprotetoras,
(UTFPR). Campus de Campo Mourão
benzofenona-3 (BP-3) e octocrileno (OC),
Campo Mourão, Paraná, Brasil
destacando circunstâncias em concentrações
http://lattes.cnpq.br/9289734963700278
em que foram encontradas no ambiente, danos
Débora Cristina de Souza associados e sua relação com as estações de
Docente. Departamento Acadêmico de tratamento de esgoto (ETEs). Os poluentes
Biodiversidade e Conservação da Natureza emergentes são compostos químicos sintéticos
(DABIC). Universidade Tecnológica Federal do de estrutura complexa e baixa biodegradabilidade
Paraná (UTFPR). Campus de Campo Mourão constantemente lançados no ambiente, onde
Campo Mourão, Paraná, Brasil
http://lattes.cnpq.br/9682347849778341
sem legislações de controle. A BP-3 foi
Flávia Vieira da Silva Medeiros
Docente. Departamento Acadêmico de todo o mundo, com toxicidade comparada à de
Ambiental (DAAMB). Programa de Pós- diversos metais e responsável pela morte de
Graduação em Inovações Tecnológicas corais nas zonas costeiras. Em peixes, afetou a
(PPGIT). Universidade Tecnológica Federal do produção de ovos, incubação e testosterona, e
Paraná (UTFPR). Campus de Campo Mourão em ratos, a densidade de esperma e ciclo estral,
Campo Mourão, Paraná, Brasil Enquanto que em humanos, foram encontrados
http://lattes.cnpq.br/8298141172237555 em amostras de urina, leite materno e plasma
Ana Paula Peron sanguíneo, e constatado seu potencial como
Docente. Departamento Acadêmico de desregulador endócrino ao interferir no período
Biodiversidade e Conservação da Natureza gestacional, crescimento fetal, células neuronais
(DABIC). Programa de Pós-Graduação em e doença de Hirschsprung, além de provocar
Inovações Tecnológicas (PPGIT). Universidade alterações de peso em recém-nascidos. O
Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR). OC, muito utilizado para estabilizar outros

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 207


fotoprotetores como a BP-3, também foi frequente em ambientes aquáticos e registrado em
sedimentos e peixes com valores superiores aos de poluentes orgânicos persistentes, além

na transcrição de genes do cérebro e fígado; e encontrado em leite materno humano. Os


métodos convencionais aplicados nas ETEs, como separação físico-química e lodo ativado,

sua eliminação. Dessa forma questiona-se a necessidade de um tratamento terciário, como


os processos oxidativos avançados. Cabe o alerta de que novos levantamentos sejam
realizados para que se obtenha dados sólidos dos níveis dos poluentes nos ecossistemas,
além de ensaios com diferentes organismos-testes buscando concentrações seguras a
serem emitidas no ambient.
PALAVRAS-CHAVE: Fotoprotetores, contaminantes de caráter emergencial, ecossistemas,
ser humano.

BENZOPHENONE AND OCTOCRYLENE AS EMERGING POLLUTANTS:


ENVIRONMENTAL AND PUBLIC HEALTH ISSUES
ABSTRACT

substances, benzophenone-3 (BP-3) and octocrilene (OC), highlighting circumstances in

toxicity compared to that of various metals and responsible for coral death in coastal areas.

than those of persistent organic pollutants, in addition to appearing in river, sea and treated

out in order to obtain solid data on the levels of pollutants in ecosystems, in addition to tests

KEYWORDS: Photoprotectors, emergency contaminants, ecosystems, human beings.

1 | INTRODUÇÃO
A proteção do meio ambiente não faz parte da cultura do homem – é dessa forma

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 208


que Souza e Souza (2016) abrem seu artigo sobre os perigos silenciosos da poluição; para
elas, o fato do ser humano estar inserido na era da informação deveria implicar em um

Porém, sob a ótica do Brasil, principalmente pós-2018, aos cuidados de um


governo que articula o desmonte da agenda ambiental (SCANTIMBURGO, 2018) e de uma
sociedade capitalista desigual (SILVA; FLAIN, 2017), o cenário é aterrador.
No tocante aos recursos hídricos, ao extrapolar a água para além da sua
importância como elemento vital e entendê-la como bem de valor econômico e matéria-
prima que tende a escassear em quantidade e qualidade (SOARES; LEÃO, 2015), suas
características químicas, físicas e biológicas são constantemente afetadas por atividades

urbanização e mudanças climáticas (BRASIL, 2014).


Através delas, uma série de compostos sintéticos tem o meio ambiente como destino,
dentre eles fármacos, drogas ilícitas, cosméticos de beleza e produtos de higiene pessoal,

esteroides, que juntos constituem os poluentes emergentes (DIAS et al., 2015; SOARES;
SOUZA, 2020).
Os poluentes emergentes são substâncias de estrutura complexa e difícil degradação,

para sua remoção (PETRIE; BARDEN; KASPRZYK-HORDERN, 2015). Dessa forma,


esses compostos são persistentes em água, solo e sedimentos, e são bioacumulativos em

como o Brasil, essa classe de poluentes não está inclusa em programas de monitoramento
ou legislações de controle (SOUZA; SOUZA, 2016).
A Portaria do Ministério da Saúde nº 2914/11, que trata da potabilidade da água, e

descarte desses poluentes (BRASIL, 2005; BRASIL, 2011).


Assim, o objetivo do capítulo foi caracterizar os poluentes emergentes quanto à
estrutura, degradação e regulamentação ambiental, com enfoque em duas substâncias
fotoprotetoras, benzofenona-3 e octocrileno, destacando circunstâncias e concentrações
em que foram encontradas, danos associados e sua relação com as estações de tratamento
de esgoto.

2 | DESENVOLVIMENTO

2.1 Histórico sobre a escassez e mal uso da água


A humanidade desempenha um papel importante sobre a ecologia e a geologia

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 209


do planeta, que Crutzen e Stoemer (2000) a descrevem de forma poética, ao colocá-la
como agente da transformação do equilíbrio biogeoquímico, em competição com as forças

Em 2021, a combinação de um governo negacionista que sequer mascara seu


desmonte da agenda ambiental (SCANTIMBURGO, 2018) com uma sociedade capitalista
e desigual, em que o consumismo é incentivado pela grande oferta de produtos e uma
publicidade apta em criar a necessidade na população de se adquirir novos bens, faz do
presente um cenário desastroso (SILVA; FLAIN, 2017).
Ao entender a água não somente como um elemento vital, mas como um recurso
de valor econômico para o desenvolvimento, e por isso, como uma matéria-prima que
tende a se tornar escassa em quantidade e qualidade (SOARES; LEÃO, 2015), nota-se
uma rede de atividades que afetam suas características químicas, físicas e biológicas,

urbanização e mudanças climáticas (BRASIL, 2014).


Enquanto sua demanda dobra a cada 21 anos, a disponibilidade da parcela de água
doce, que corresponde a 2,5% do total da água no planeta, caiu 62% mundialmente nos
últimos 50 anos (CONSTANTINOV, 2010).
Quando a água é imprópria ou inadequada, ela é a causa de 3,1% dos óbitos
anuais em todo o mundo, um montante de mais de 1,7 milhões de pessoas (BRASIL,

índices nacionais mais recentes, a média de atendimento total com rede de esgoto era de

Baseado em efeitos como toxicidade aquática, genotoxicidade, perturbação endócrina


em animais selvagens e seleção de bactérias patogênicas resistentes, pesquisadores têm

chamados poluentes emergentes (DIAS et al., 2015; SILVA, 2012; JARDIM et al., 2012;
MONTAGNER et al., 2013).

2.2
degradação e falta de monitoramento e regulamento ambiental
Diversos compostos sintéticos têm como destino o solo, corpos hídricos e

contraceptivos), cosméticos de beleza e produtos de higiene pessoal (maquiagens, cremes,


fragrâncias, protetores solares, repelentes de insetos e antissépticos), químicos industriais

drogas ilícitas e hormônios e esteroides (HESPANHOL, 2015; SOARES; SOUZA, 2020).


Para Sauvé e Desrosiers (2014), tais classes de produtos aparecem sob a alcunha
de contaminantes de preocupação emergente, e foram separados em três grupos: os

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 210


emergentes verdadeiros, que são novas espécies químicas descobertas com técnicas
analíticas de alta sensibilidade, uma vez que são encontradas no ambiente na ordem de
et al., 2019); os de interesse emergente, que mesmo
estabelecidos, demandam mais estudos que demonstrem seus mecanismos de ação e
estabeleçam relações de causa e efeito conclusivas a diferentes espécies de organismos
(MONTAGNER et al., 2013); e os emergentes conhecidos, relacionados àqueles de longa
data para os quais se têm uma série de trabalhos demonstrando seus efeitos adversos
ao ambiente e à saúde pública, mas que pouco ou quase nada foi feito em termos de
regulação para seu uso.
Com estruturas químicas complexas, os poluentes emergentes são substâncias
constituídas por longas cadeias carbônicas, normalmente acima de C10, o que lhes confere
baixa solubilidade em água. Dentre eles, os mais conhecidos quanto à estrutura química

ambiente por métodos convencionais de tratamento, estão o corante amarelo tartrazina


(FREITAS, 2012); o conservante antisséptico triclosan (TIBURTIUS; SCHEFFER, 2014); o
antibiótico eritromicina (RAMOS, 2016); e o microplástico politereftalato de etileno ou PET
(COUCEIRO, 2019) (Figura 1).

Figura 1 – Fórmula estrutural da tartrazina (A), triclosan (B) e eritromicina (C), e unidade química
repetitiva do politereftalato de etileno (D)
Fonte: Adaptado de (A) FREITAS (2012); (B) TIBURTIUS; SCHEFFER (2014); (C) RAMOS (2016); (D)
SILVA (2010)

Os microrganismos, capazes de degradar os compostos orgânicos naturais, não


possuem as enzimas necessárias para a desintegração desses compostos sintéticos
(CALVO-FLORES; ISAC-GARCÍA; DOBADO, 2018), o que afeta sua biodegradabilidade
e os tornam persistentes no ambiente e bioacumulativos em organismos vivos (BADIA-
FABREGAT et al., 2012).
São contaminantes que ainda possuem como agravante o fato de não estarem

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 211


inclusos em programas de monitoramento de órgãos regulatórios de proteção ao meio
ambiente e saúde no Brasil, assim como na maioria das regiões do mundo, ou inseridos em
legislações de controle ambiental (SOUZA; SOUZA, 2016).
Em locais onde o tratamento de esgoto é incipiente, não haver limites seguros para
o seu lançamento (MELO et al., 2009) amplia seu contato com a população e a biota
aquática porque, em geral, os mananciais que os recebem são os mesmos utilizados
no abastecimento de água (FERNANDES, 2018), e os padrões de potabilidade, quando
cumpridos, baseiam-se na toxicidade isolada desses poluentes e desconsideram sua
interação com o meio (SODRÉ et al., 2007).
A introdução de substâncias fotoprotetoras no ambiente, por exemplo, é cada vez
maior devido ao aumento da incidência de sol, sobretudo nos países tropicais, atrelado ao
maior acesso à informação acerca dos danos provocados por ela, o que tem feito com que
o cuidado com a pele deixe de ser uma questão estética e passe a ser fator de saúde e
bem-estar (LIMA et al., 2019).

2.3 Fotoprotetores de pele e de superfícies inanimadas


O espectro de radiação que atinge a Terra compreende a zona ultravioleta (UV)
(100-400 nm), visível (400-800 nm) e infravermelha (superior a 800 nm), e o de maior
energia é aquele com menor comprimento de onda, ou seja, UV, que se divide em UVA (320
a 400 nm), UVB (290 a 320 nm) e UVC (100 a 290 nm) (CRISTA, 2012).
Como o intervalo UVC é absorvido pela camada de ozônio, as células do corpo
humano estão expostas ao UVB, que alcança somente a epiderme e pode provocar
vermelhidão e sensação de ardência; e ao UVA, que penetra em maior profundidade até a

o que se conhece popularmente por bronzeamento (CARVALHO, 2019; GRANGER;


BROWN, 2001; SAUCEDO; VALLEJO; GIMÉNEZ, 2020).
Uma exposição excessiva aos intervalos UVA e UVB pode acarretar em queimaduras

envelhecimento cutâneo precoce, patologias de fotossensibilidade e neoplasias, como


câncer (CARVALHO, 2019; GRANGER; BROWN, 2001).

de titânio (TiO2) (SEVERINO et al

(RAMOS et al., 2016).

presentes em artigos de higiene pessoal, cosméticos e perfumes, além de aplicados pelas

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 212


indústrias têxteis e da construção civil para evitar a fotodegradação de pigmentos e polímeros
(RAMOS et al., 2016), em produtos geralmente elaborados a partir da combinação de três

ZENKER; RAPP, 2010).


Dentre essas substâncias estão a benzofenona, omeridamato e avobenzona, mais
relacionadas à proteção UVA, e o octocrileno, cinamatos e ensulizol, com UVB. Esses
compostos atingem o ambiente, como demonstrado na Figura 2, principalmente por meio

DÍAZ-CRUZ; BARCELÓ, 2012).

Fonte: Adaptado de PESTOTNIK; KOSJEK; HEATH (2014)

A
e superfícies inanimadas ao absorver radiação entre 240 e 360 nm (ROGGIA et al., 2014),
mas tem seu uso restrito em seres humanos devido a efeitos colaterais como irritação
dérmica e ocular, e pode ser derivada em outras moléculas como a benzofenona-3 (BP-3),
amplamente empregada pelas indústrias em geral, dada sua estabilidade fotoquímica (KIM
et al., 2016; NASCIMENTO; SANTOS; AGUIAR, 2014).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 213


2.4 Benzofenona-3: composição química, produtos a qual faz parte e efeitos
adversos ao meio ambiente
Também conhecida como oxibenzona, difenilcetona ou 2-hidroxi-4-
metoxibenzofenona, a BP-3 tem fórmula molecular C14H12O3 (CAS 131-57-7) (Figura 3)
e está em circulação no mercado desde 1970 (KIM; CHOI, 2014) em protetores solares,
fragrâncias, shampoos, condicionadores de cabelos, cremes, repelentes de insetos,
surfactantes como sabões e detergentes, óleos de banho (DOWNS et al., 2016), tintas

Estados Unidos da América (EUA) (KIM, 2018).

Figura 3 – Fórmula estrutural da benzofenona-3


Fonte: PAESE (2008)

Em sua forma pura, a benzofenona-3 tem aspecto cristalino e coloração amarelada,


com peso molecular de 228,24 g/mol, densidade de 1,2 g/cm , ponto de ebulição de 224 °C
e fusão de 62 °C, com solubilidade em água de 3,7 mg/L a 20 °C (PAESE, 2008), o que de
acordo com Ney (1995) é baixa por ser inferior a 10 mg/L.
Kow) de 3,79,
constante adimensional indicadora de hidrofobicidade (MARGOT et al., 2015), que para
Rogers (1996), determina o caráter de um composto em ser acumulativo como sendo baixo
se log Kow<2,5; médio se 2,5<log Kow<4,0; e alto se log Kow

baixa volatilização, o que favorece sua adsorção em sedimentos e sólidos em suspensão


(GHAZIPURA et al., 2017; PAESE, 2008; ROGGIA et al
com maior índice de detecção em amostras ambientais, principalmente em águas
recreacionais durante o verão (PAREDES et al., 2014).

como apontaram Fagervold et al


qualquer microrganismo degradante de BP-3 no lodo de estações de tratamento de águas
residuais.
Sphingomonas wittichii (BP14P),
com a capacidade de usar a BP-3 como única fonte de energia e carbono, degradando-a

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 214


foi restrita à BP-3, ressaltando a complexidade das relações entre poluentes emergentes e
microrganismos (FAGERVOLD et al., 2021).
Nos últimos anos, a BP-3 foi registrada por Wu et al. (2017) em amostras de água de
fontes pontuais em Xangai, na China, em concentração de 30 ng/L, e por Mao et al. (2018),

No Brasil, Silva, Emídio e Marchi (2015), ao analisarem seis ETAs em várias cidades
do Sudeste, obtiveram concentrações de BP-3 entre 18 e 115 ng/L, e destacaram que
esses valores se mantiveram na mesma faixa em água bruta, tratada e clorada, sem que
houvesse remoção no tratamento; e Caldas et al. (2019) encontraram essa substância em
níveis ainda mais elevados no município de Rio Grande, Rio Grande do Sul, em águas

Cabe ressaltar que, de acordo com a Resolução da Diretoria Colegiada (RDC) nº


69 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) (BRASIL, 2016), que dispõe

e perfumes no Mercosul, é permitida concentração máxima de 10% de BP-3, sendo


necessária advertência no rótulo caso o valor ultrapasse 0,5%.
Paredes et al

herbívoros e carnívoros), encontrados na faixa de dezenas ou mesmo centenas de ng/L,


registraram que a espécie mais afetada foi a microalga Isochrysis galbana, com efeitos
que se equipararam à toxicidade de metais como cobre, mercúrio, chumbo, cádmio e
zinco; e também nas regiões costeiras, ela demonstrou ser prejudicial aos recifes de corais
por induzi-los ao estresse oxidativo e expelir as algas de sua superfície, descolorindo e
levando-os à morte (SCHNEIDER; LIM, 2019).

materno (MOLINS-DELGADO et al., 2018) e plasma sanguíneo (JANJUA et al., 2008),


e pesquisadores a enquadram ao lado dos desreguladores endócrinos por suspeitarem
que possa, dentre outros efeitos, reduzir a duração do período gestacional (ZHONG et
al et al., 2018); causar a perda de
células neuronais (WNUK et al., 2018); e estar associada à doença de Hirschsprung, onde

fezes (DINARDO; DOWNS, 2019).


Em estudo encomendado pelo Centro de Controle e Prevenção de Doenças dos
EUA, a BP-3 foi encontrada em 96,8% das amostras de urina analisadas (CALAFAT et
al., 2008), o que pode ser atribuído ao seu potencial lipofílico, que faz com que até 10%
seja absorvido pela pele em aplicações cutâneas e a maior parte seja excretada na forma
original ou metabólitos (SCHNEIDER; LIM, 2019).
Ao também avaliar os efeitos da substância como interferente endócrino, Ghazipura
et al. (2017) reuniram evidências de que em humanos, altos níveis de exposição a ela

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 215


podem estar relacionados com aumento e perda de peso em recém-nascidos, além de
declínio no tempo gestacional. Em peixes, resultou em declínio na produção de ovos,
incubação e testosterona; e em ratos, diminuiu a densidade de esperma nos machos e
prolongou o ciclo estral ou cio nas fêmeas.
Comparado à BP-3, o

excelente fotoestabilidade faz com ele seja amplamente aplicado para estabilizar outros

na ocorrência conjunta de BP-3 e OC em muitos dos pontos estudados (MIZUKAWA et al.,


2017; MOLINS-DELGADO et al., 2018).

2.5 Octocrileno: composição química, produtos a qual faz parte e efeitos


adversos ao meio ambiente

fórmula molecular C24H27NO2 (CAS 6197-30-4) (Figura 4), que em sua forma pura, é um
líquido de aspecto viscoso e amarelado (BROOKE; BURNS; CROOKES, 2008).

Figura 4 – Fórmula estrutural do octocrileno


Fonte: BROOKE; BURNS; CROOKES (2008)

O octocrileno tem peso molecular de 361,49 g/mol, densidade de 1,051 g/cm , baixa
solubilidade em água de 0,0038 mg/L a 25 °C, ponto de ebulição de 218 °C e fusão de -10
°C (BROOKE; BURNS; CROOKES, 2008; NEY, 1995).
Com ação entre 290 e 360 nm, ele cobre a maior parte dos comprimentos de onda
UVB e pequenos comprimentos UVA, e assim como a BP-3, é regido pela RDC nº 69,
podendo ser empregado em produtos de higiene pessoal, cosméticos e perfumes em
concentração máxima de 10% (BRASIL, 2016).
Kow
e baixa biodegrabilidade em meio aquoso, o que facilita a absorção cutânea (GAGO-
FERRERO; DÍAZ-CRUZ; BARCELÓ, 2012), como demonstrado por Krause et al. (2012),
que o registraram em 67% das amostras de leite materno humano analisadas em até 30,18

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 216


ng/g.
Isso faz com que, impulsionado pela resistência à degradação solar (GAGO-
FERRERO et al., 2013), o octocrileno seja frequentemente detectado em ambientes

Baía de Paranaguá, Paraná, que o constatou em até 41,29 ng/g nas amostras analisadas.
Gago-Ferrero et al. (2013), ao estudar a faixa litorânea do Rio Grande do Sul ao
Espírito Santo, entre 1994 e 2009, demonstraram a frequência de OC em mamíferos
Pontoporia blainville – dos 56 animais
avaliados, 21 estavam contaminados, em níveis entre 89 e 782 ng/g, o que ultrapassou os
valores esperados pelos pesquisadores de até 23 ng/g.
Molins-Delgado et al. (2018) analisaram músculos, brânquias e fígados de 11 peixes
da urbanizada Baía de Guanabara, Rio de Janeiro, utilizando técnicas avançadas

concentrações mais baixas estavam nos músculos e guelras (3,07-31,6 ng/g) e as mais

em peixes para poluentes orgânicos persistentes (POPs).


De forma complementar, Blüthgen et al. (2014) avaliaram OC quanto à bioacumulação

de genes do desenvolvimento do cérebro e fígado.

et al. (2017), com técnicas LC-MS/MS, e BP-3 e OC foram alguns dos compostos
predominantes, adsorvidos em concentrações entre 5,6 e 322,2 ng/g, e constituindo, na

lipofílicos em sedimentos no Brasil.


A presença de OC ainda foi observada por Buser et al. (2006) em tecido muscular
de peixes Salmo trutta, coletados em sete rios da Suíça, em concentrações de até 2400
ng/g; na Espanha, em peixes (30 ng/g) (GAGO-FERRERO; DÍAZ-CRUZ; BARCELÓ, 2013)
e em água tratada (170 ng/L) (DÍAZ-CRUZ et al., 2012); e na Itália, em água de rio (112
ng/L) e mar (32 ng/L) (MAGI et al., 2012), o que induz o questionamento de que os métodos

eliminar esses poluentes.

2.6
tecnologias e perspectivas futuras
As ETEs, em geral, contam com tratamento primário, que consiste em etapas

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 217


de separação físico-químicas para remoção de sólidos suspensos, como decantadores

biológicos como lodo ativado (PETRIE; BARDEN; KASPRZYK-HORDERN, 2015).


A maioria dos poluentes, entretanto, tende a permanecer na fase aquosa, o que
favorece sua mobilidade através da própria ETE e do corpo receptor, estando presentes em
diversas matrizes, como visto (PETRIE; BARDEN; KASPRZYK-HORDERN, 2015; MELO
et al., 2009).
Dessa forma, é necessário introduzir uma etapa adicional, o que caracteriza

investigadas com enfoque não somente em sua eliminação, mas na destruição do seu efeito
potencial (FENG et al., 2013). À princípio, esses tratamentos avançados são promissores e
podem ocorrer de duas formas, por transferência de fase ou processos oxidativos (QUERO-
PASTOR et al., 2014).
Nos tratamentos que contemplam transferência de fase, os poluentes são transferidos
de uma fase para outra sem que haja degradação – são exemplos disso os processos de

(FREIRE et al., 2000).


Enquanto alguns processos oferecem desvantagens, como a adsorção, cujo
caráter não destrutivo implica na necessidade de procedimentos auxiliares, orientados ao
tratamento ou disposição das fases sólidas (VERLICCHI; AUKIDY; ZAMBELLO, 2015), as

rotinas para grandes volumes (CRUZ et al., 2010).


Os processos oxidativos, caracterizados pela capacidade de degradá-los, se dão
através de métodos físicos, relacionados à incineração e queima dos resíduos, mas
com liberação de gases para atmosfera; biológicos, com presença de microrganismos
que convertem parte da matéria orgânica em CO2 e H2O, se aeróbios, ou CO2 e CH4, se

poluentes, sendo aqueles


que vêm ganhando mais atenção (SOARES, 2011; VERLICCHI; AUKIDY; ZAMBELLO,
2015).
Em contrapartida, como apontado por Martins e Montagner (2018), não se deve,
de forma radical, desprezar por completo o papel dessas substâncias caracterizadas, uma
vez que um alerta sobre os perigos associados a elas, desvinculado de seu contexto, pode
exacerbar debates baseados em interpretações errôneas sobre o tema.
Por isso a importância de esclarecer que são poluentes que surgem em decorrência
das atividades humanas no antropoceno, criados para combater problemas de saúde
pública, elevar a expectativa de vida e garantir a oferta de alimentos, resultados de muita
evolução de pesquisa farmacêutica e química, mas que acima de tudo, estão inseridos

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 218


em uma lógica de mercado que prega a urgência da lucratividade em detrimento de testes
ecotoxicológicos profundos, o que os torna capazes de gerar novas doenças (MARTINS;
MONTAGNER, 2018).
Não se trata, portanto, de introduzir corretivos ao sistema que criou a atual
perturbação ecológica, mas de educar para sua transformação (BOFF, 2012), o que
implica em superar a visão reducionista e mecanicista operante e assumir a cultura da
complexidade, principalmente o desapego à percepção individualista, enxergando através
da ótica do coletivo (SOUZA; SOUZA, 2016).

3 | CONSIDERAÇÕES FINAIS
Ao caracterizar os
compostos químicos sintéticos onipresentes no cotidiano de qualquer pessoa, com longas

portanto, difíceis de serem degradados de forma natural, e que acabam por persistir no

A partir da confecção do capítulo, ressalta-se a importância da pesquisa tendo em vista


o crescente uso de substâncias fotoprotetoras, uma das classes de poluentes emergentes,
em decorrência do aumento da radiação solar e uma variedade cada vez maior de produtos,
bem como seu contínuo lançamento nos corpos hídricos com pouca ou nenhuma remoção
pelas estações de tratamento de esgoto, principalmente sob a perspectiva do Brasil, um

pautas ambientalistas.
A revisão trouxe à tona que a benzofenona-3 e o octocrileno estão dispersos por

vivos, em níveis entre 2,3 e 2400 ng/g ou ng/L, com toxicidade similar à de diversos metais,
desencadeando efeitos como a morte de corais em zonas costeiras; interferência na
transcrição de genes do cérebro e fígado, produção de ovos, incubação e testosterona em
peixes; e densidade de esperma e ciclo estral em ratos.

sanguíneo, ambas as substâncias têm potencial de atuar como desreguladores endócrinos


ao afetar o período gestacional, crescimento fetal, células neuronais e doença de
Hirschsprung, além de aumento e perda de peso em recém-nascidos.
Em se tratando de uma problemática relativamente recente, com trabalhos
concentrados ao longo da última década, cabe o alerta de que levantamentos sejam
realizados com frequência para que se construa um sólido banco de dados com o
monitoramento dos níveis desses poluentes no ambiente.
Espera-se que novos ensaios sejam conduzidos com diferentes organismos-testes

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 219


poderes relacionados quanto a um maior investimento em tecnologias de processos
oxidativos avançados para as estações de tratamento e atualização das normas vigentes
com limites prudentes ou, de maneira mais radical, a proibição e posterior substituição
desses compostos por espécies menos nocivas.

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 16 227


CAPÍTULO 17
MORFOLOGIA VEGETAL: UMA ABORDAGEM
PALINOLOGICA DE HIBISCUS ROSA-SINENSIS L.

Data de aceite: 10/01/2022


podendo chegar até 5 m de altura. Essa espécie
é tipicamente tropical e símbolo do Havaí, onde
João Marcos Gomes Leite
apresentou ser uma espécie que se adequa ao
acadêmico do curso de Licenciatura em
Ciências Biológicas - IFTO processo de acetólise após ser submetida ao
http://lattes.cnpq.br/9805753432461771 tratamento. No presente estudo foi utilizado o
protocolo de acetólise fornecido pelo Laboratório
Maristela Tavares Gonçalves de Estudos de Abelhas – LEA da UFMA
Especialista em Metodologia da Educação do (Universidade Federal do Maranhão) de São Luís
Ensino Superior. - IFTO (2017) por apresentar um resultado satisfatório
http://lattes.cnpq.br/7603332695026462 em relação a tratamentos similares de limpeza.
Alessandro Oliveira Silva PALAVRAS–CHAVE: Hibisco, Hibiscus rosa-
Mestre em Ciências Ecológicas – IFTO – sinensis L., acetólise, grãos de pólen, Palinologia.
campus Araguatins
http://lattes.cnpq.br/5259775910234201 PLANT MORPHOLOGY: A
PALINOLOGICAL APPROACH TO
HIBISCUS ROSA-SINENSIS L.

RESUMO: A acetólise é um processo químico ABSTRACT: Acetolysis is a chemical process


que foi criado por Erdtman (1960), com o intuito
de facilitar os estudos palinológicos através da to facilitate palynological studies through the
limpeza minuciosa de grãos de pólen na estrutura thorough cleaning of pollen grains in the structure
que contém o gameta masculino vegetal. Esse that contains the vegetable male gamete. This
método de limpeza submete os grãos de pólen cleaning method subjects the pollen grains to
a soluções ácidas para remoção da estrutura acidic solutions to remove the internal structure
interna (intina), deixando apenas a parte (intin), leaving only the external part (exine),
externa (exina) facilitando assim a observação thus facilitating the observation of structural
das características morfológicas estruturais. morphological characteristics. Assisting in the

taxonômica de espécies vegetais, já que essas plant species, as these characteristics remain
características permanecem geneticamente
estáveis. O objetivo desse trabalho foi analisar to analyze the external morphological structure
a estrutura morfológica externa do grão de pólen of the pollen grain of Hibiscus rosa-sinensis L.
de Hibiscus rosa-sinensis L. após a aplicação
do tratamento com acetólise, o que auxilia em
estudos botânicos. Hibiscus rosa-sinensis L.
pertencente à família Malvaceae, um arbusto Hibiscus rosa-sinensis L. of the genus Hibiscus

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 17 228


the present research, the acetolysis protocol provided by the UFMA (Federal University of

similar cleaning treatments.


KEYWORDS: Hibiscus, Hibiscus rosa-sinensis L., acetolysis, pollen grains, Palynology.

1 | INTRODUÇÃO

estruturas. Uma parte vegetativa microscópica possui na constituição da parede a


substância orgânica mais resistente da natureza, a esporopolenina, presente na exina
(SANTOS-SEREJO, 2010), podendo resistir a intempéries por milhares a milhões de anos,
algo que desperta fascínio em pesquisadores e estudiosos. A exina é resistente tanto à
digestão por animais quanto à decomposição por micro-organismos, podendo ainda manter
sua forma mesmo com a exposição a ataques de substâncias ácidas. Aliando todas essas
características, várias vertentes de estudos sobre a exina começaram a surgir para facilitar
o entendimento das estruturas vegetativas ao decorrer do tempo (MONDRAGÓN, 2016).

de reconstituir antigas áreas vegetativas (SOEJARTO, 1972). A melissopalinologia busca


compreender o hábito alimentar de abelhas para determinar a importância de espécies
vegetais para a produção de mel, o que mantém as futuras gerações de enxames apícolas

com intenção de explorar a alimentação de animais (DEL FRETE, 2009). Conjuntamente,


a palinotaxonomia auxilia na determinação de níveis de parentesco entre grupos de
espécies, o que possibilita um estudo mais avançado em outras áreas (MILWARD-DE-
AZEVEDO, 2010). Por isso, torna-se visível a grande utilidade do processo de remoção

de determinadas espécies vegetais. Logo, o objetivo desse trabalho foi analisar a reação
do grão do pólen da espécie Hibiscus rosa-sinensis L. quando submetido ao processo
de acetólise determinando a funcionalidade e desempenho na remoção da intina, o que

2 | REFERENCIAL TEÓRICO
O Hibisco (Hibiscus rosa-sinensis L.), originário do continente asiático e pertence
à família Malvaceae. Essa família botânica apresenta ocorrência de 70 gêneros e 750
espécies no Brasil (LORENZI, 2012) possuindo cerca de 5000 mil variedades e 300

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 17 229


espécies dentro do gênero Hibiscus (REIS, 2010), também pode ser separada por razões

especiais para designá-los.


É considerada uma planta ornamental (LORENZI, 2012), podendo também ser
usada como cercas vivas. Reis (2010) relata que seus aspectos paisagísticos indicam
preferência por climas quentes, onde requer uma frequência na exposição a raios solares.

Possui algumas características morfológicas similares a outras espécies, sendo

(hermafrodita) com estames numerosos, uma característica da família Malvaceae. Logo,

bastante visível ao microscópio óptico é a presença de espinho no grão de pólen, constituída


pela exina (REIS, 2010).

Figura 1 – Estruturas visíveis a olho nu de Hibiscus rosa-sinensis L.


Fonte: autor, 2018

Os grãos de pólen são estruturas produzidas nas anteras (Figura 2) localizadas


no androceu (estrutura reprodutiva masculina) que auxilia no transporte do gameta até o
estigma (estrutura reprodutiva feminina). A composição do grão auxilia na proteção contra
a desidratação e viabiliza a absorção de substâncias como a sacarose, o que permite a
germinação do tubo polínico (SANTOS-SEREJO et al., 2010).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 17 230


Figura 2 – Detalhe da antera com grãos de pólen de Hibiscus rosa-sinensis L.
Fonte: autor, 2018

O grão é composto por duas estruturas (Figura 3), sendo a intina (parte interna)
formada de celulose, e a exina (parte externa) formada por esporopolenina, onde se

al., 2009), alguns grãos apresentam peculiaridades como a do hibisco, que é a presença
de espinhos feitos da sexina. Outros grãos também irão possuir estruturas semelhantes

dispersão dos grãos de pólen (GALVÃO et al., 2009), mas por ser bem menos resistente,
deve ser retirada com o uso de soluções ácidas.

Figura 3 – Estruturas básicas do grão de pólen


Fonte: RAMALHO, 21–?

Os grãos possuem aberturas, que favorecem no desenvolvimento do tubo polínico,


estrutura que irá levar o gameta do grão até o ovário (REDE DE CATÁLOGOS POLÍNICOS
ONLINE, 2016). Essas aberturas variam quanto ao número, posição, forma e estrutura o
que depende da espécie vegetal.
H. rosa-sinensis L.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 17 231


as aberturas (poros) e característica desses poros: quanto ao número de aberturas
(Pantoporado), a forma do grão (Esferoidal), ornamentação da exina (Equinada), simetria
do pólen (Radial), âmbito do pólen (Circular), e polaridade do pólen, sendo esta apolar
(REDE DE CATÁLOGOS POLÍNICOS ONLINE, 2016).

3 | METODOLOGIA/MATERIAIS E MÉTODOS
A pesquisa foi desenvolvida no Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia
do Tocantins - campus
). O município de Araguatins está situado

Tocantins.
A localização do campus possui o clima adequado para o desenvolvimento
da planta o que possibilitou coletas durante os meses de novembro de 2017 a junho
de 2018, totalizando sete meses de coletas do material polínico. A espécie, por ser de

semelhança a uma variedade da espécie conhecida como Mimo-de-vênus. Sendo essa


última, bastante difundida na região por também possuir características morfológicas que
permitem fazer da espécie uma planta ornamental, sendo a pigmentação o diferencial entre
ambas (TERRA DA GENTE, 2017).
A coleta dos grãos foi feita em diferentes turnos (matutino, vespertino e noturno)

pólen. Nas coletas, o material foi preservado em frasco Eppendorf contendo ácido acético

feita uma lavagem com ácido acético glacial puro para retirada dos grãos.
A análise foi feita no laboratório de microscopia do campus, em que foi usado o
protocolo de acetólise fornecido pelo Laboratório de Estudos de Abelhas – LEA da UFMA
de São Luís no Maranhão. Para o processo foi preparado a solução acetolítica, glicerina
aquosa 50% e a gelatina glicerinada de Kaiser (BUCHERL, 1962) para imersão dos grãos
limpos. Posteriormente foi feita a montagem das lâminas com esse material inoculado.
Em sequência rigorosa, as etapas foram: a) retirada do material polífero colocando-
os em tubos de ensaio com cinco ml de ácido acético glacial puro; b) centrifugação a
2000 rpm por 5 minutos; c) descarte do sobrenadante; d) acréscimos de 5 ml da solução
acetolítica (4,5 ml de anidrido acético e 0,5 de ácido sulfúrico); e) o tubo foi colocado em
banho-maria a 100°C por 2 minutos onde foi mantido um bastão de vidro dentro do tubo
para que a solução fosse feita a homogeneização da mistura; f) nova centrifugação por 5
minutos e descarte do sobrenadante; g) adição de água destilada e 2 a 3 gotas de álcool

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 17 232


descarte do sobrenadante; i) adição de solução aquosa de glicerina a 50% com pausa de
30 minutos a 24 horas para encaminhando então o material para preparação das lâminas
com intuito de serem permanentes e usadas como material didático.
Para a preparação das lâminas foram feitos cubos de gelatina glicerinada com
o tamanho aproximado de um grão de arroz. Em seguida, os cubos de gelatina foram
posicionados com o grão de pólen limpo em seu interior, manuseados com alças de platina

a lamínula para a visualização em microscópio óptico.

4 | RESULTADOS E DISCUSSÕES
Através dos resultados obtidos foi possível realizar uma observação mais acurada

sexina que caracteriza o grão da espécie e sua forma (Figura 4).

Grão de pólen sem o processo de limpeza com acetólise; b) Detalhe geral do pólen de Hibiscus rosa-
sinensis L. após o processo de limpeza com acetólise
Figura 4 – Fotos do grão de pólen tiradas em microscópio antes e após a Acetólise
Fonte: autor, 2018

Oliveira e Dos Santos (2004), mostram em seu trabalho resultados semelhantes aos
obitidos, o que mostra que é possível distinguir espécies apartir das estruturas dos grãos de
polén que sáo submetidos à acetólise. Assim como a descrição do Catálogo sistemático dos
pólens das plantas arbórias, confeccionado por Barth (1975), também foram encontradas
as estruturas a exina, regalarmente espinhosas, com espinhos pequenos e bases largas
com o ápice ligeiramente arredondado, o que tem uma variancia de acordo com a espécie.

5 | CONSIDERAÇÕES FINAIS
Com o processo de acetólise, pode-se fazer uma análise minuciosa de estruturas

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 17 233


diferença do grão de pólen antes da limpeza acetolítica e posterior à limpeza, apresentam
uma diferença notória quando comparados, podendo destacar os detalhes estruturais do

Assim por possuírem estruturas geneticamente estáveis, os grãos só variam


sua forma de acordo com as espécies fazendo da palinologia um estudo de extrema
importância tanto em pesquisas quanto em botânica. Outra vertente seria o uso de lâminas
permanentes como recurso didático, proporcionando uma melhor compreensão de alunos
e pesquisadores.
Também, foi possível determinar que é necessária uma coleta minuciosa com intuito
de evitar a contaminação por grãos de outras espécies ou estruturas que prejudicam
a visualização dos grãos decorrente de polinização biótica ou abiótica. Outro ponto

ainda fechado, porque se evita contaminação por agentes polinizadores como as abelhas
que levam outros grãos de pólen derivados de outras espécies.
Decerto, a confecção de lâminas deixa claro que é possível realizar coleções que
possam ser disponibilizadas as escolas públicas da região para estudo e visualização,
tornando assim as aulas de Ciências Biológicas mais interessantes e didáticas.

REFERÊNCIAS
ANDREATA, H. P.; TRAVASSOS, O. P. Glossário de Botânica. Rio de Janeiro: Ed. Universitária Santa

Rodriguésia, v. 32, p. 105-133, 1980.

XVIII-Malvaceae. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, v. 73, p. 1-18, 1975.

BUCHERL, W. Técnica microscópica. 3.ed. São Paulo: Polígono, 1962.

104° Congresso Nazionale Società


Botanica Italiana

GALVÃO M. N.; PEREIRA, A. C. M.; ESTEVES, V. G.; ESTEVES, R. L. Palinologia de espécies de


Asteraceae de utilidade medicinal para a comunidade da Vila Dois Rios, Ilha Grande, Angra dos
Reis, RJ, Brasil. Rio de Janeiro. Acta bot. bras. 23(1): 247-258. 2009.

IBGE – INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA E ESTATÍSTICA, 2002. Pesquisa Nacional por


Amostra de Domicílios: síntese de indicadores 2010. Rio de Janeiro: IBGE. IBGE – Instituto Brasileiro

LORENZI, H. Plantas para jardim no Brasil. 2. Ed. São Paulo, 2015.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 17 234


LORENZI, H.; SOUSA, V. C. Botânica Sistemática. 3. Ed. São Paulo, 2012.

MARTINS, V. F. Aspectos da reprodução de Angiospermas. 21–?. Disponível em: <


ib.unicamp.br/profs/fsantos/bt682/2013/Aula8/Aula8-Reproducao.pdf>. Acesso em: 18 jul. 2018.

Acta Botanica Brasilica, v. 24, p. 133-145, 2010.

MONDRAGÓN, Alcides. Caracterización morfológica de la exina del polen de siete especies del género
Sterculia L. Bioagro, v. 18, n. 3, p. 139-143, 2006.

MONTEIRO, Ricardo dos Santos. USO DA MELISSOPALINOLOGIA NA IDENTIFICAÇÃO DA ORIGEM


DO MEL DE Melipona scutellaris L., 1811. 2017.

OLIVEIRA, Paulino Pereira; DOS SANTOS, Francisco de Assis Ribeiro. Morfologia polínica de Hibiscus
pernambucensis Arruda e Hibiscus tiliaceus L.(Malvaceae). Acta Biologica Leopoldensia, v. 26, n. 2,
p. 203-211, 2004.

RAMALHO, M. Analisando o grão de pólen.

SOEJARTO, Doel D.; FONNEGRA, R. Polen: Diversidad en formas y tamaños. Actualidades


Biológicas, v. 1, n. 1, p. 2-13, 1972.

Rede de catálogos polínicos online


2018.

REIS, F. Hibisco (Hibiscus syriacus L.). Plantas de chaves. 2010. Disponível em: <http://
plantasdechaves.blogspot.com/2010/09/hibisco-hibiscus-syriacus-l.html

RUBIRA, T. H. S.; SANTOS, J. F.; VIANA, A. C. O uso do Hibiscus Sabdariffa como alimento
funcional. Conexão Eletrônica – Três Lagoas, MS – Volume 13 – Número 1 – Ano 2016.

SANTOS-SEREJO, J. A.; SOARES, T. L.; ROSSI, M. L. SOUZA A. S.; COSTA M. A. P. C . Estudo


da morfologia polínica e viabilidade de pólen de bananeira. 2010. 2Universidade Federal do
Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA. 2010.

Terra da gente. Mimo-de-vênus. 2017. Disponível em: <


tuberculos/NOT,0,0,1223962,Mimo-de-venus.aspx

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 17 235


CAPÍTULO 18
CONSIDERAÇÕES SOBRE O FITOPLÂNCTON
DO SUBMÉDIO RIO SÃO FRANCISCO:
GRUPOS FUNCIONAIS DE REYNOLDS (GFR) E
IMPLICAÇÕES PARA OS MÚLTIPLOS USOS DA
ÁGUA
Data de aceite: 10/01/2022 Carlos Vinícius da Silva Cabral
Data de submissão: 08/10/2021 Universidade Federal do Vale do São
Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas
Petrolina - Pernambuco

Vladimir de Sales Nunes Angélica Barbosa Jericó


Universidade Federal do Vale do São Universidade Federal do Vale do São
Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas
Petrolina - Pernambuco Petrolina - Pernambuco

Mávani Lima Santos Nadiane Nunes da Silva


Universidade Federal do Vale do São Universidade Federal do Vale do São
Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas
Petrolina – Pernambuco Petrolina – Pernambuco

Caio Carvalho Novais de Moraes Gabriel Luiz Celante da Silva


Universidade Federal do Vale do São Universidade Federal do Vale do São
Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas
Petrolina - Pernambuco Petrolina – Pernambuco

Bruno Cézar Silva Benoit Jean Bernard Jahyny


Universidade Federal do Vale do São Universidade Federal do Vale do São
Francisco, Pró-Reitoria de Planejamento e Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas
Desenvolvimento Institucional Petrolina – Pernambuco
Petrolina - Pernambuco

René Geraldo Cordeiro Silva Júnior


Universidade Federal do Vale do São RESUMO: O que se conhece como algas
Francisco, Colegiado de Medicina Veterinária compreende uma ampla variedade de
Petrolina – Pernambuco organismos aquáticos e fotossintetizantes, com
Edson Gomes de Moura Júnior diversas manifestações morfológicas e grande
Universidade Federal do Vale do São importância ecológica e econômica. Atuando
Francisco, Núcleo de Ecologia e Monitoramento como produtores primários em ecossistemas
Ambiental aquáticos e sendo responsáveis por quase
metade da produção do oxigênio na biosfera,
Ludwig Lima Nunes
Universidade Federal do Vale do São compreensão da biodiversidade e esforços de
Francisco, Colegiado de Ciências Biológicas
conservação de corpos hídricos de múltiplos
Petrolina - Pernambuco
usos. Uma técnica utilizada para auxiliar em

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 236


ambientais. Nesse sentido, o presente trabalho objetivou determinar os GFR ocorrentes
em um ponto amostral do rio São Francisco em Petrolina, Pernambuco, Brasil, com base
no

, M
representado pela co-ocorrência dos gêneros Ceratium e Microcystis, acende um importante

PALAVRAS-CHAVE:

CONSIDERATIONS ON THE PHYTOPLANKTON OF THE SUB-MIDDLE


SÃO FRANCISCO RIVER: REYNOLDS FUNCTIONAL GROUPS (RFG) AND
IMPLICATIONS ON THE MULTIPLE USES OF WATER
ABSTRACT:

importance. Acting as primary producers in aquatic ecosystems and accounting for nearly

perspective, the present study aimed to determine the RFG occurring in a sampling point of
the São Francisco river in Petrolina, Pernambuco, Brazil, based on the taxonomic survey

and identifying the organisms and RFG based on the specialized literature, 14 RFG coda

characteristic of the collection point as a lotic point of trophic state ranging from mesotrophic
to eutrophic. Furthermore, the presence of the LM codon, represented by the co-occurrence of
the genera Ceratium and Microcystis
taxa to cause harmful blooms.
KEYWORDS: Algae; ecology; taxonomic survey; Microcystis; eutrophication.

1 | INTRODUÇÃO

No início deste capítulo que tratará acerca das algas continentais microscópicas

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 237


do Rio São Francisco, evocamos o trecho acima, retirado do clássico Guerra dos Mundos,

ilustrar como a diversidade do mundo microscópico permeia e faz parte, desde há muito, do
imaginário humano. Na citada obra, os invasores marcianos, após semear o caos pela Terra
em uma destruidora invasão interplanetária, terminam sua belicosa jornada destruídos por
“simples” bactérias, que não haviam sido levadas em conta na elaboração da ambiciosa
estratégia de guerra.
A adequação desta citação encontra guarida no fato de que o que se conhece de
maneira genérica como “algas”, são, na verdade, uma variedade de organismos amplamente

MENEZES (2006), “alga”, no contexto taxonômico, é meramente um termo de uso popular,


tal qual o termo “palmeira” é utilizado para denominar árvores distintas, ou “grama” é
aplicado a um número vasto das mais diversas gramíneas. Contudo, essa nomenclatura
tem validade na ecologia, visto que engloba grupos taxonômicos diversos em um grupo

jamais envoltos por um conjunto ou tecido de células estéreis. Dessa forma, consideram-
se como algas desde diminutas bactérias fotossintetizantes unicelulares (Cyanobacteria)

(BICUDO & MENEZES, 2006).


O termo “ALGAE” aparece, pela primeira, vez, na obra Species Plantarum, publicada
pelo naturalista sueco Carl Linnaeus (ou Lineu) em 1753, sendo o primeiro trabalho de

espécies constituem o que hoje se conhece por algas (BICUDO & MENEZES, 2006). Em
contraste, a maior base de dados internacional acerca da taxonomia, nomenclatura, e
distribuição de algas, a AlgaeBase, conta atualmente com 163.687 espécies catalogadas
(GUIRY & GUIRY, 2021).
A ideia de algas como organismos predominantemente pigmentados, capazes de
realizar fotossíntese, naturalmente evoca sua similaridade (que, de fato, existe) com as

quando se explora a ampla diversidade morfológica das algas microscópicas, formada em

o que é impreciso pelo fato de que muitos desses organismos microscópicos que ocorrem
em todas as classes de ambientes aquáticos, entre outras tantas características, se movem

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 238


a um grupo ecológico que compreende organismos fotossintetizantes visíveis a olho nu
que habitam permanentemente ou por alguns meses do ano, parcialmente ou totalmente,
ambientes de água doce ou salobra (ESTEVES & THOMAZ, 2012).

também de alta variação morfológica, frequentemente de rápido movimento, e que, por

animais, não é algo raro de ocorrer, principalmente ao observar espécimes vivos ao


A Origem das Espécies, relata o seguinte no
capítulo XV da referida obra:

Para além de sua notória diversidade morfológica, um outro importante fator sobre
as algas que merece o devido destaque é, sem dúvida, sua ampla distribuição. Esses
organismos ocorrem em uma grande variedade de ambientes em todas as latitudes,
longitudes e altitudes, sendo encontrados em rios, lagos, represas, açudes, bem como
sobre o solo, rochas, troncos de árvores e em tanques de bromélias, entre outros locais
(BICUDO & MENEZES, 2006; FRANCESCHINI et al., 2010). Como notavelmente assinalam
BICUDO & MENEZES (2006), não existe água em que não ocorram algas.
Finalmente, mas de forma nada menos importante, a relevância ecológica das algas,

fundamental de produtores primários em ecossistemas aquáticos, formando a base do


et al., 2002). Esses organismos são
importantes na produção de oxigênio através do processo de fotossíntese, oxigenando as
águas e sendo responsáveis por quase metade de toda a produção de oxigênio na biosfera,
et al., 2009).

e muda de um ecossistema para outro tanto em composição de espécies quando na


distribuição de biomassa. Assim, mudanças nesses parâmetros podem ser indicativos de

biológica é realizada pelas algas (MBONDE et al., 2002).

onde ocorrem, oferecendo um valioso indicativo da qualidade da água. (PARMAR,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 239


RAWTANI & AGRAWAL, 2016; TRIPATHI & GAUR, 2021). Contudo, quando o ecossistema

de cianobactérias, as “algas azuis” (OBERHOLSTER, BOTHA & ASHTON, 2009). Nessa


perspectiva, encontra grande aplicabilidade a abordagem dos grupos funcionais no estudo

homenagem idealizador dessa metodologia (REYNOLDS et al., 2002).


et al. (2010) sintetizaram

a um conjunto de condições ambientais, compartilhando adaptações para sobrevivência


e dominância quando submetidos a um mesmo gradiente ambiental. Dessa forma, a
abordagem dos GFR pode ser utilizada para detectar padrões na distribuição e dinâmica

em relação a disponibilidade de luz ou nutrientes, por exemplo, é mais provável de ser


habitado por espécies com as adaptações próprias para este ambiente que por espécies
que não possuem tais adaptações, ou sensíveis a essas características. Nesse sentido,
a abordagem dos GFR permite, inclusive, potencialmente prever quais espécies podem
ocorrer em determinado ecossistema com base em suas características limnológicas e
vice-versa, conferindo importância prática à abordagem dos GFR na gestão de recursos
hídricos, especialmente importante em áreas de múltiplos-usos (NUNES et al., 2021).
Apesar da relativa facilidade e aplicação intuitiva da abordagem, erros em sua
interpretação não são raros de encontrar na literatura. Nesse sentido, um importante estudo

códon dos GFR foi conduzido em 2008 por PADISÁK, CROSETTI & NASELLI-FLORES
(2008).
Entre os mais extensos corpos hídricos do Brasil, o rio São Francisco é o maior rio

corresponde a 8% do território nacional, nascendo no estado de Minas Gerais e percorrendo


505 municípios nos estados de Minas Gerais, Goiás, Bahia, Pernambuco, Alagoas e Sergipe,
além do Distrito Federal (CBHSF, 2021). Apesar de divergir em diferentes trabalhos na
literatura, o estudo conduzido por SILVA et al. (2003) oferece uma extensão variável do rio

A população no entorno no rio São Francisco passa dos 15 milhões de pessoas, e

longo de sua extensão: Caatinga, Cerrado e Mata Atlântica, além do ecossistema estuarino

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 240


área representada por Pernambuco, 39,5% pela Bahia, e 1,1% por Alagoas (CBHSF, 2021).
Os municípios de Juazeiro (Bahia) e Petrolina (Pernambuco) estão localizados no
centro do Submédio São Francisco, na região Nordeste do Brasil. O clima é semiárido
quente e a temperatura média anual é de 24,8 ºC. Se considerada conjuntamente, a
população das duas cidades ultrapassa meio milhão de habitantes. Além disso, a região
é um importante polo nacional de fruticultura irrigada, aproveitando-se da localização
estratégica às margens do Rio São Francisco (PMP, 2021).
Uma das descrições detalhadas mais longevas da região é fornecida pelo relato da
famosa expedição dos naturalistas alemães Spix e Martius, realizada entre 1817 e 1820.
Sobre o rio São Francisco, eles escreveram:

A partir do retrato feito pelos naturalistas e em comparação com o cenário atual,


percebe-se que as atividades se inverteram depois dois séculos: a agricultura é a mais

o maior polo de fruticultura irrigada do país (CORREIA, ARAUJO & CAVALCANTI, 2001).
Além disso, a atividade de criação de gado bovino na região é hoje extremamente reduzida,
e o rio São Francisco, após a construção da Barragem de Sobradinho, apresenta maior
regularidade de vazão (SANTOS et al., 2017).
Em concordância com a intensa ocupação do Submédio São Francisco, a bacia

atividades, a geração de energia, a pesca, a navegação de cargas e de pessoas, o uso


para irrigação e o abastecimento de água potável para consumo (SANTOS et al., 2017).
O volume de água implicado no atendimento de todas essas demandas por si só oferece
indicação da importância da gestão dos recursos hídricos nessa região (FREITAS &
LOPES, 2003).
Contudo, a intensa ocupação na região também implica uma histórica degradação
ambiental e poluição dos ecossistemas aquáticos. Nesse sentido, o despejo direto de

como nitrogênio e fósforo, originários, por exemplo, do esgoto doméstico. A consequência


Eichhornia, abundantes
nas margens do rio São Francisco tanto em Juazeiro quanto em Petrolina (BRITTO, 2015).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 241


pode levar à competição por luz e nutrientes. Entre outros fatores, a cobertura da coluna

diminuindo a oxigenação da água e podendo até mesmo afetar a ictiofauna, causando a


mortandade de peixes em casos extremos (CATELA, 2012).

para a saúde humana. No caso mais notável na região, em 1996, 52 pacientes de uma clínica
de hemodiálise em Caruaru, Pernambuco, foram a óbito após experienciarem sintomas

hepática aguda, no evento conhecido como “Síndrome de Caruaru”. A intoxicação dos


pacientes se deu através de dois grupos cianotoxinas: microcistinas, produzidas pelos
gêneros de cianobactéria Microcystis e Anabaena, e cilindropermopsina, produzida pelo
gênero Cylindrospermopsis (AZEVEDO et al., 2002).
Dessa forma, integrando o conhecimento sobre a diversidade e importância
ecológica e econômica das algas, a abordagem dos Grupos Funcionais de Reynolds na

hídricos visando o uso sustentável da água em seus múltiplos-usos, este trabalho objetivou
determinar e analisar os códons dos GFR com base em um levantamento taxonômico do
Rio São Francisco visando agregar dados que possam subsidiar a tomada
de decisões na conservação do Submédio São Francisco.

2 | METODOLOGIA

Rio São Francisco às margens da cidade de Petrolina, Pernambuco, Brasil. A coleta das
algas ocorreu no dia 15 junho de 2020 em área de múltiplos usos da água oposta à margem

para a área de coleta é BSh, correspondendo a uma área seca e semiárida de baixa latitude
e altitude (ALVARES et al., 2014).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 242


Figura 1. Imagem de satélite da área de coleta e adjacências, evidenciando a característica de
múltiplos usos da água no local.

Foram realizadas amostragens sucessivas através do arraste em superfície e

pH e temperatura da água medidos no local de coleta foram 6,0 e 22,9 ºC, respectivamente.

acético (FAA) de acordo com o preconizado por BICUDO & MENEZES (2006) para a coleta

com dano mínimo. As amostras encontram-se armazenadas sob refrigeração a 6 ºC no


Laboratório de Botânica da Universidade Federal do Vale do São Francisco, Petrolina, onde
estão disponíveis para consulta.
Subsequentemente, o material coletado foi analisado através de microscopia óptica.

de BICUDO & MENEZES (2006) e FRANCESCHINI et al. (2010). Concomitantemente ao

um microscópio óptico modelo Diag Tech XJS300. Para a edição e medição das imagens,

et al. (2002), bem como as observações de


PADISÁK et al. (2009) sobre o trabalho anterior, além da avaliação dos táxons quanto a
sua frequência de ocorrência nas amostras analisadas (MATTEUCCI & COLMA, 1982).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 243


3 | RESULTADOS

de PADISÁK et al. (2009). A Figura 2 apresenta a diversidade taxonômica e a frequência

A
, que
contemplou 28,13% dos táxons registrados nas amostras analisadas, sendo esse seguido
por LO (12,5%), MP e J (9,38% cada). Os códons dos GFR referentes aos organismos

Figura 2. Representatividade, em porcentagem, de espécies pertencentes aos 36 gêneros do

Francisco em Petrolina, Pernambuco, Brasil, em junho de 2020.

registrada em amostras coletadas no trecho submédio do rio São Francisco em Petrolina, Pernambuco,
Brasil, em junho de 2020.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 244


4 | DISCUSSÃO
É importante destacar que a área amostral é utilizada para pesca, como atracadouro
de barcos, e como local de travessia de barcas de transporte de passageiros entre uma
cidade e outra. Contudo, a presença de despejo de esgoto residencial e comercial nas

Eichhornia
(BARRETO, 2015; MINHONI et al., 2018).
A Prefeitura Municipal de Petrolina, Pernambuco, não-raro opta pela onerosa
remoção direta das plantas do local utilizando máquinas retroescavadeiras, resultando
em efêmeros períodos de melhoria. Contudo, a problemática não é resolvida ao longo
prazo em razão, além da continuidade do despejo do esgoto, da presença de um banco
de sementes no local, que continuam seu desenvolvimento sob condições ideais (BRITTO,
2015; CBHSF, 2015).
O códon NA
não existia na proposta original dos GFR, tendo sido sugerido por SOUZA et al. (2008)

temperatura e densidade da água (LIMA NETO, 2019; PADISÁK, CROSETTI & NASELLI-

baixa a média produtividade, com possíveis implicações para a qualidade da água, mas
em níveis geralmente aceitáveis (ANA, 2021). Os principais representantes desse códon
são as desmídias unicelulares Cosmarium, Staurodesmus, Staurastrum e outras desmídias

et al., 2018).
O códon LO
na área de estudo, com 12,5%, é caraterístico de habitats profundos ou rasos, com estado

incluindo Ceratium spp. (PADISÁK, CROSETTI & NASELLI-FLORES, 2009; REYNOLDS et


al., 2002). Contudo, quando este ocorre concomitantemente com Microcystis, o códon LM é

& NASELLI-FLORES, 2009; REYNOLDS et al., 2002).


O códon MP inclui várias diatomáceas e cianobactérias, e o habitat característico
é de ambientes lênticos rasos e turvos, com tolerância a alta insolação e sensibilidade
a perturbações e baixa luminosidade (PADISÁK, CROSETTI & NASELLI-FLORES,
2009; REYNOLDS et al., 2002). Já o códon J inclui espécies que vivem em ambientes

sensíveis a baixa luminosidade. Aqui se incluem diversas algas verdes coloniais (PADISÁK,

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 245


CROSETTI & NASELLI-FLORES, 2009; REYNOLDS et al., 2002).
Como mencionado previamente, o códon LM é tipicamente representado pela co-
ocorrência de Ceratium hirundinella e/ou Ceratium furcoides com Microcystis spp. Este

et al., 2002). É importante notar


que Ceratium e Microcystis, presentes nas nossas amostras e representados pelo códon
LM, podem ser problemáticos e representar riscos à qualidade da água através da redução
Ceratium, ou através da produção
de toxinas (microcistinas), no caso de Microcystis
ambientes lênticos, a presença desses grupos na área amostral e o uso da água para
consumo pode levar, eventualmente, ao transporte dos organismos a algum local de
armazenamento onde haja condições favoráveis à sua proliferação (ALMEIDA et al., 2016;
PADISÁK, CROSETTI & NASELLI-FLORES, 2009; REYNOLDS et al., 2002).
O códon P é típico de habitats semelhantes ao do códon NA
de maior quantidade de nutrientes. Aqui se incluem algumas diatomáceas e desmídias,

REYNOLDS et al

algas verdes coloniais, a exemplo de Kirchneriella, são tolerantes a turbidez e sensíveis à


2
(PADISÁK, CROSETTI & NASELLI-FLORES, 2009; REYNOLDS et al.,
2002).
O códon S2 compreende organismos cujo hábitat são águas quentes, rasas, e
frequentemente alcalinas, a exemplo de Spirulina spp. O códon é tolerante a condições de

de Ankistrodesmus

exemplo de Cyclotella meneghiniana e C. ocellata. O códon E é característico de ambientes

CO2. Este códon foi representado em nossa pesquisa pela presença de Dinobryon. O
códon T é típico de camadas submetidas a perturbação, ocorrendo no epilímnio águas

Neste trabalho, o códon T foi representado por Mougeotia spp. O códon TB foi proposto
por BORICS et al. (2007) e é típico de ambientes altamente lóticos. Seus representantes
incluem diversas diatomáceas, várias delas representadas neste trabalho, a exemplo
de Fragilaria, Surirella, e Navicula

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 246


Euglena sp.

corrobora com as características do trecho amostrado do rio São Francisco, em Petrolina

frequente perturbação, como esperado pelo ambiente lótico do local amostral, bem como
da predominância de códons que compreendem organismos frequentes no epilímnio, a

margens do rio, em ambiente raso.


Outra conclusão importante deste trabalho é a presença do códon LM, representado
pela co-ocorrência de Ceratium hirundinella e/ou Ceratium furcoides com Microcystis spp. e
Ceratium
neste trabalho não pode ser diferenciado quanto a Ceratium hirundinella ou Ceratium
furcoides uma vez que não foi possível evidenciar a divisão das plaquetas da epiteca.
Contudo, a ocorrência do gênero juntamente com Microcystis aeruginosa acende um
importante alerta principalmente no que se refere ao uso da água para consumo. Apesar

Francisco, o transporte da água para armazenamento em outros locais pode desencadear

oferece subsídio para a tomada de decisões na gestão dos recursos hídricos do rio São
Francisco, especialmente em zonas populosas.

5 | CONCLUSÕES

um
às margens do rio em Petrolina, Pernambuco, Brasil.

permitem corroborar as características do ponto amostral do rio São Francisco, com

A presença do códon LM, representado pela co-ocorrência de Ceratium hirundinella


e/ou Ceratium furcoides com Microcystis spp., acende um importante alerta para o uso da
água para consumo humano, visto que, em ambientes com condições ideais, estes táxons

extremos, podem ser letais.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 247


REFERÊNCIAS
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WELLS, H. G. Guerra dos Mundos. Tradução de Lívia Bono. São Paulo: Pé da Letra, 2019.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 18 250


CAPÍTULO 19
AVALIAÇÃO DE MISTURAS TERNÁRIAS DIESEL-
BIODIESEL-ETANOL PARA APLICAÇÃO COMO
COMBUSTÍVEL EM MOTORES DE CICLO DIESEL

Data de aceite: 10/01/2022 Rene Gonzalez Carliz


Data de submissão: 23/10/2021 Universidade Federal do Rio de Janeiro, Escola
de Química
Rio de Janeiro – RJ
http://lattes.cnpq.br/0672946757410567
Guilherme Brandão Guerra
Universidade Federal do Rio de Janeiro, Escola
de Química
Rio de Janeiro – RJ RESUMO: Com as catástrofes “naturais” cada
ID 0000-0002-9933-0258 Orcid vez mais recorrentes e com maior potencial
Gisel Chenard Díaz destrutivo, a sociedade passou a entender que
deve olhar para o meio ambiente com maior
Universidade Federal do Rio de Janeiro, Escola
de Química responsabilidade. Principalmente, no que diz
Rio de Janeiro – RJ respeito aos veículos e máquinas equipadas
http://lattes.cnpq.br/0508124357020553 com motores a diesel, que são fontes móveis
ID Orcid 0000-0002-3892-1556 de poluição atmosférica, causando riscos
à saúde do planeta. Diante desse cenário,
Yordanka Reyes Cruz
foi proposto o presente trabalho, que visa a
Universidade Federal do Rio de Janeiro, Escola
formulação e avaliação de misturas formadas
de Química
por óleo diesel, biodiesel e etanol com vistas
Rio de Janeiro – RJ
à sua utilização em motores que operam no
http://lattes.cnpq.br/2484115263109864
ID Orcid 0000-0002-2309-3698 ciclo diesel. As análises das propriedades
físico-químicas foram realizadas em conjunto
Vinicius Rossa com estudos de lubricidade e estabilidade. O
Universidade Federal Fluminense, Instituto de resultado das análises físico-químicas mostrou
Química que características importantes permaneceram,
Niterói – RJ, Brasil
http://lattes.cnpq.br/2852735029222599 exigidas. Uma exceção é feita para o ponto de
ID Orcid 0000-0001-5483-3030
fulgor, pois no caso do etanol ele já é baixo. O
Donato Alexandre Gomes Aranda estudo de lubricidade mostrou que a presença de
Universidade Federal do Rio de Janeiro, Escola biodiesel na mistura impactou positivamente nas
de Química combustíveis, com
Rio de Janeiro – RJ
http://lattes.cnpq.br/9833601447849479 de estabilidade demonstrou as propriedades
ID Orcid 0000-0002-5736-4118 de cosolvência do biodiesel na mistura e sua
higroscopicidade, não contribuindo, entretanto,
para um aumento no tempo de estabilidade da

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 251


mistura. No entanto, as misturas são viáveis para uso comercial.
PALAVRAS-CHAVE: Biodiesel, diesel, etanol, combustíveis renováveis.

EVALUATION OF DIESEL-BIODIESEL-ETHANOL TERNARY MIXTURES FOR


APPLICATION AS A FUEL IN DIESEL CYCLE ENGINES
ABSTRACT:

blends formed by diesel oil,

biodiesel in the mixture had a positive impact on

demonstrated the co-solvency properties of biodiesel in the mixture and its hygroscopicity, not

viable for commercial use.


KEYWORDS:

1 | INTRODUÇÃO
O uso de misturas oxigenadas, com menor proporção de hidrocarbonetos
aromáticos e enxofre em sua composição, levam a uma redução no número e tamanho
de partículas emitidas pelo escapamento.(ARMAS et al., 2013) Se uma política de longa
duração for implantada no sentido de paulatinamente reduzir esse tipo de emissão, poder-
se-á observar um declínio na tendência anual de mortes por doenças respiratórias e
cardiovasculares.(BAKEAS; KARAVALAKIS; STOURNAS, 2011; ONU, 2005; SILVA et al.,
2012; STACHOWIAK, G. W.; BATCHELOR, 2005).
Substituir uma porcentagem, por exemplo, de diesel e gasolina utilizados no
transporte por biocombustíveis (biodiesel e bioetanol) é o caminho mais simples para
esse setor. No sentido de contribuir no combate das mudanças climáticas surgiu a ideia de
desenvolver a presente pesquisa que tem como meta principal a avaliação das misturas
ternárias Diesel-Biodiesel-Etanol para aplicação em motores ciclo Diesel.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 252


2 | PARTE EXPERIMENTAL

2.1 Matérias-primas
As matérias-primas utilizadas no desenvolvimento do trabalho são:

de 9/12/2011;

• -
ções de qualidade estabelecidas na Resolução ANP nº 19, de 15/4/2015;

• Biodiesel produzido na usina da Petrobras Biocombustíveis (PBio) localizada


em Montes Claros (MG) a partir de mistura de óleo de soja com sebo animal

2.2 Produção das misturas


etanol nas propriedades físico-
químicas das misturas diesel-biodiesel, foram formuladas e caracterizadas diversas
misturas, todas em base volumétrica.(TRUJILLO G., 2004)
Primeiramente foram produzidas as misturas diesel-biodiesel (BX) com os seguintes
teores de biodiesel: 10, 15 e 20%. Escolheram-se essas concentrações pois: 10% – teor de
biodiesel que estava sendo adicionado ao diesel de petróleo quando foram realizados os
estudos; 15% – teor a ser atingido até 2023 de acordo com autorização governamental, e
20% – estimativa do que pode vir a ser uma nova diretriz daqui a alguns anos.
A partir de cada BX gerada, foram produzidas misturas com teores de 10 e 15% de
etanol, contabilizando ao todo nove misturas (Tabela 1) (CRUZ, 2019).

Produto

B10 Diesel + 10% de biodiesel

B15 Diesel + 15% de biodiesel

B20 Diesel + 20 % de biodiesel

B10E10 Diesel + 10% de biodiesel + 10% de etanol

B10E15 Diesel + 10% de biodiesel + 15% de etanol

B15E10 Diesel + 15% de biodiesel + 10% de etanol

B15E15 Diesel + 15% de biodiesel + 15% de etanol

B20E10 Diesel + 20 % de biodiesel + 10% de etanol

B20E15 Diesel + 20 % de biodiesel + 15% de etanol

Tabela 1. Misturas produzidas para o trabalho

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 253


2.3 Caracterização das matérias-primas e das misturas produzidas
Nas matérias-primas e amostras produzidas pelas misturas destas foram
realizados ensaios para inferir suas características e qualidade. Os ensaios executados
foram Viscosidade cinemática a 40 °C, Destilação, Densidade a 15 °C, Ponto de fulgor,
Corrosividade ao cobre, Cinzas, Número de acidez, Teor de água, Índice de iodo, Ponto de

e Número de cetano derivado.

2.4 Estudo de lubricidade


Adicionalmente, foi realizado um estudo de lubricidade. O método utilizado foi o

uma cuba preenchida com a amostra e uma quarta esfera é mantida em contato simultâneo
sob força com as outras três e realizando movimento giratório em um eixo movido por

com auxílio de microscópio os diâmetros das ranhuras (“cicatrizes”) formadas pelo atrito

Todas as amostras foram submetidas às mesmas condições – ensaio a 45 °C de

elas.

2.5 Estudo de estabilidade


É muito importante também avaliar a estabilidade, fundamentalmente quando se
misturam componentes com diferente polaridade. Neste estudo de estabilidade alíquotas
das amostras foram separadas e submetidas a três diferentes condições de temperatura
como segue:

• Alíquotas mantidas a 10 °C em geladeira (temperatura controlada);

• Alíquotas mantidas a 22 °C em sala climatizada (temperatura controlada) e;

• Alíquotas mantidas à temperatura ambiente (sem controle de temperatura) e,


portanto, sujeitas às variações durante os dias.

adesiva. Em todos foi realizado um furo bem pequeno para simular o respiro das tampas
dos tanques de combustível. Esta consideração é muito importante, pois é justamente
através deste respiro dos tanques de combustível que durante a noite, quando ocorre
diminuição de temperatura ambiente, há a entrada de ar úmido. Esta umidade é absorvida
fundamentalmente pelo etanol, muito higroscópico.

decorrer do tempo, acompanhando possíveis mudanças de aspecto que poderiam ocorrer

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 254


após transcorridas horas, dias e meses para então realizar uma análise comparativa. As

3 | RESULTADOS E DISCUSSÃO

3.1 Caracterização físico-química


Os resultados de caracterização físico-química realizada foram compilados nas
Tabelas 3 e 4.

B10 B10 B15 B15 B20 B20


Análise B100 Diesel B10 B15 B20
E10 E15 E10 E15 E10 E15

Ponto de
38 mín. 142 70 72 74 74 30 25 30 25 30 25
fulgor (ºC)

Densidade
817,5 a 865 875,8 832,2 834,5 836,2 837,8 829,9 828,0 831,9 829,6 833,2 831,5

Viscosidade
1,9 a 4,1 5,047 2,585 2,547 2,778 2,821 2,330 2,054 2,387 2,255 2,418 2,315
(mm /s)

Abaixo Abaixo Abaixo Abaixo Abaixo Abaixo Abaixo Abaixo Abaixo Abaixo Abaixo
CFPP (ºC) 0 a 12
de -8 de -8 de -8 de -8 de -8 de -8 de -8 de -8 de -8 de -8 de -8

Acidez,
0,30 máx 0,07 0,15 0,17 0,18 0,14 0,13 0,17 0,16 0,18 0,18 0,07
(mg KOH/g)

Estabilidade
à oxidação 20 h 26,11 16,54 16,20 15,56 15,57 15,01 13,43 8,81 8,07 4,46 26,11
(h)
Teor de
água (mg/ 165 18,30 22,50 50,50 52,50 73,40 122,9 115,3 145,8 124,20 154,50 18,30

Corrosivida-
1A 1A 1A 1A 1A 1A 1A 1A 1A 1A 1A 1A
de ao Cu

Índice Não Não Não Não Não Não Não Não


de iodo anotar 80 1 realiza- realiza- 16 realiza- realiza- realiza- realiza- realiza- realiza-
(mgI2/100g) do do do do do do do do

Cinzas (%) 0,01 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001

N° cetano 48 mín. 62,84 57,83 50,59 48,32 46,97 50,80 51,19 48,39 48,78 48,38 47,78

Teor de
2,60 2,60 2,50 2,50 2,60 2,40 2,50 2,50 2,50 2,50 2,50
enxofre

Tabela 3. Resultados da caracterização físico-química das matérias-primas e das misturas. Fonte: ANP
com adaptações.(ANP BRASIL, 2014, 2018)

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 255


Como observado na Tabela 3, a característica que sofreu maior variação com a
adição do etanol foi o ponto de fulgor. Com os teores de etanol utilizados este item diminuiu

de etanol foram descartas e a avaliação continuou apenas com as misturas com 10%.

combustível diesel, seria necessário adicionar teores de etanol inferiores a 10% de modo a

à oxidação das misturas também diminui, mas este ponto pode ser melhorado com a adição

O índice de iodo foi determinado apenas na mistura de diesel com 20% de Biodiesel
(B20). Como nas misturas ternárias produzidas o único componente que aumenta o grau
de insaturação é o biodiesel, ao conhecer o índice de iodo da mistura com maior percentual
deste componente podemos inferir que nas demais amostras o número de iodo será inferior.

3.2 Estudo de lubricidade


Na Tabela 4 a seguir são apresentados os resultados das cicatrizes de desgaste

Amostra Diâmetro de ranhura (mm)

Diesel 1,30

Biodiesel 0,37

B10 0,52

B15 0,42

B20 0,37

B10E10 0,59

B10E15 0,49

B15E10 0,60

B15E15 0,50

B20E10 0,78

B20E15 0,50

Tabela 4. Valores de diâmetro de ranhura após ensaio de desgaste.

Nota-se que o aumento do percentual de biodiesel nas misturas leva a um aumento


da lubricidade das mesmas e, por conseguinte, um diâmetro de cicatriz menor. Efeito
inverso ocorre com a introdução do etanol. Com o aumento dos teores de álcool há aumento
nenhuma

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 256


das misturas avaliadas apresentou cicatriz de desgaste superior àquela provocada pelo
combustível diesel (1,30 mm).

3.3 Estudo de estabilidade


Antes do início do estudo de estabilidade foram medidos os teores de água nas
amostras (misturas com 10% de etanol).

Amostra Teor de água (mg/kg)

B10E10 298

B15E10 306

B20E10 314

Tabela 5. Teor de água no início do estudo

das misturas em diferentes condições de temperatura e umidade, já que existe uma


diferença de polaridade considerável entre o etanol e o diesel.

3.3.1 Estudo de estabilidade a 10 °C, controlada

O início deste experimento se deu em 30 de janeiro de 2019, seguindo a metodologia


descrita no item 2.4. O teor de umidade no interior da geladeira se manteve próximo de 46
% durante o período do experimento. Na Figura 1(a) mostra-se a aparência das misturas

a separação das misturas, conforme apresentado na Figura 1(b).


Neste momento o produto foi novamente homogeneizado e retirado uma amostra
para determinação do teor de umidade. Os resultados são apresentados na Tabela 6.

Figura 1. Aparência das misturas durante o período do experimento

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 257


Amostra Teor de água, mg/kg

B10E10 4089

B15E10 4518

B20E10 4611

Tabela 6. Teor de água após separação, 96 h decorridas (4 dias)

Comparando os resultados de umidade inicial das misturas, Figura 1(a), com os

ºC e 46% de umidade no meio, houve um aumento considerável de umidade nas misturas

maior teor de biodiesel (B20) absorveu maior quantidade de umidade no meio no mesmo
período de tempo, comportamento que está relacionado com a elevada higroscopicidade do
biodiesel. Conforme esperado, a presença de maior teor de biodiesel conseguiu solubilizar
maior quantidade de água na mistura.

3.3.2 Estudo de estabilidade a 22 °C, controlada

O início deste experimento se deu em 30 de janeiro de 2019 também seguindo a


metodologia descrita no item 2.4. O teor de umidade no interior da sala climatizada se
manteve próximo de 52% durante o período do experimento. Na Fig. 2(a) demonstra-se
a aparência das misturas no início dos testes e após 48 horas de preparo das amostras

2(b).

Figura 2. Aparência das misturas durante o período do experimento

Ainda com essa alteração na cor das amostras os testes continuaram. Decorridos
30 dias (02/02/2019), começou a aparecer uma fase levemente amarelada no fundo dos
frascos. Esta fase era maior naqueles que continham as misturas B10E10 e B15E10. No
entanto, nas três amostras fue possível constatar a formação dessa fase inferior. Por tal

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 258


motivo, o teor de água nas amostras foi determinado nesse momento, seguindo o mesmo
procedimento descrito no item 3.3.1 (homogeneização e retirada de amostra). Os resultados
são apresentados nas Tabela 7.

Amostra Teor de água (mg/kg)

B10E10 4103

B15E10 4566

B20E10 4635

Tabela 7. Teor de água após separação, 30 dias decorridos (02/02/2019)

Os teores de água presentes na mistura no dia em que aconteceu a separação das


fases é muito próximo do teor de água que provocou a separação das misturas no estudo
realizado a 10 ºC. As principais diferenças entre os experimentos, além da alteração na cor
das amostras avaliadas a 22 ºC, são o tempo até a separação das fases (à temperatura
de 10 ºC de 4 dias e à temperatura de 22 ºC de 30 dias) e a forma como aconteceu esta
separação (a 10 ºC apareceu uma fase superior e a 22 ºC apareceu uma fase inferior).
Após a aparição da fase inferior os testes continuaram. Decorridos 60 dias, esta
fase amarelada era maior nas três misturas, adquirindo coloração amarela mais intensa
à medida em que se passavam os dias 90 (3 meses, 02/04/2019) - Figura 3(a) e 120 (4
meses, 02/05/2019) - Figura 3(b).

Figura 3. Amostras decorridos 90 e 120 dias.

O produto dessa fase tinha a aparência de uma goma, que pode haver-se formado
como resultado de um processo de degradação de um ou mais componentes da mistura.
Visto que o comportamento se repetiu, foi realizada uma análise sobre as possíveis
causas dessa alteração na coloração das misturas e do aparecimento de fase inferior com
aparência de goma. Uma das hipóteses levantadas foi a possibilidade de contaminação
microbiológica, já que a sala climatizada utilizada neste estudo é uma sala de cultivo
de microalgas, local onde normalmente podem existir determinados microrganismos

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 259


no ambiente, como bactérias. Esses microrganismos poderiam acelerar o processo de
degradação do combustível, formando borras, lacas ou vernizes.

com as condições do local foi montado um novo experimento em outro local climatizado
com temperatura controlada de 22 ºC e umidade de aproximadamente 60%, Figura 4(a).
No dia 10 de julho, 37 dias após a preparação das misturas, apareceu uma segunda fase
no fundo da garra que continha a amostra B20E10, Figura 4(b).

Figura 4. Aparência das misturas durante o período do experimento

+ 10% etanol),

Após 62 dias a preparação das misturas, o experimento foi interrompido por

(S10 + 15% biodiesel + 10% etanol), quando interrompido o experimento, foi de 4109 mg/

experimentos realizados a 10 ºC e 22 ºC (sala de cultivo de microalgas), condições nas

fase.
Os novos resultados do estudo de estabilidade realizado a 22 ºC, mas agora em
local diferente da sala de cultivo de microalgas, corroboram a hipótese de que uma possível
contaminação microbiológica provocou a alteração na coloração das amostras, degradando
o combustível e propiciando a formação de produtos secundários no fundo das garrafas.
É importante destacar que o aumento do teor de biodiesel nas misturas, conforme
esperado, aumenta a quantidade de água solubilizada na amostra atuando como um
cossolvente. No entanto, as propriedades higroscópicas do biodiesel contribuem para uma
maior absorção de água do ambiente, fazendo com que as misturas com maior teor de
biodiesel

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 260


com menor teor de biodiesel.
Ésteres metílicos de ácidos graxos vêm sendo largamente estudados como
aditivos promotores da mistura diesel–etanol. Diversas patentes são descritas por Ahmed
Irshad (2003) na utilização de álcoois etoxilados e ésteres como aditivos para melhorar a
estabilidade das misturas diesel–etanol.(IRSHAD AHMED., 2003) Depósitos de patentes
brasileiras com a utilização de ésteres de ácidos graxos de álcoois metílicos, etílicos,
cíclicos ou aromáticos ou ainda polióis etoxilados para efeito promotor na mistura diesel-
etanol também são encontrados na literatura.(CAMPI A. R, 1999a, 1999b) Esses trabalhos
mostram que a adição de 1 a 2% (em volume) de aditivo é capaz de promover uma mistura
normalmente inferior a 15% de etanol anidro em diesel. Estes aditivos, cuja função é impedir
a separação de fases, atuam como cossolventes nas misturas álcool ao diesel.

3.3.3 Estudo de estabilidade à temperatura ambiente, sem controle

A exemplo dos dois primeiros experimentos, o início deste também se deu em 30 de


janeiro de 2019 e a umidade na sala era de 60%. As temperaturas às quais as amostras
estiveram sujeitas durante o experimento estão concatenadas na Tabela 8.

Mês Mínima média (°C) Média (°C) Máxima média (°C)

Fevereiro de 2019 24 28 32

Março de 2019 24 27 31

Abril de 2019 23 27 30

Tabela 8. Temperaturas médias para os meses do experimento, Fonte: dados de AccuWeather.

A seguir, na Figura 5(a), são mostradas as amostras no início do experimento e


Figura 5(b) as imagens registradas durante o tempo de duração do estudo (90 dias).

Figura 5. Aparência das misturas durante o período do experimento

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 261


Após de três meses de observação às amostras estocadas à temperatura ambiente
continuavam homogêneas e apresentavam os seguintes teores de água descritos na
Tabela 9 a seguir.

Amostra Teor de água (mg/kg)

B10E10 441

B15E10 451

B20E10 494

Tabela 9. Teor de água após 90 dias de observação

Os resultados mostram que, nas condições avaliadas neste item, as misturas


absorveram menor quantidade de água do que se comparadas às condições de 10 e 22 ºC.
Com isso conclui-se que quanto mais baixa é a temperatura, maior é a absorção de água
pelas misturas e consequentemente menor a estabilidade das mesmas.
A seguir a Tabela 10 apresenta os resultados do estudo de estabilidade realizado.

10 °C, 46% UR 22 °C, 52% UR Sem controle


Amostra Tempo Água Tempo Água Tempo Água
(dias) (mg/kg) (dias) (mg/kg) (dias) (mg/kg)
B10E10 4 4089 30 4103 90 441

B15E10 4 4518 30 4566 90 451

B20E10 4 4611 30 4635 90 494

Tabela 10. Resultados do estudo de estabilidade das misturas

4 | CONCLUSÃO
No presente trabalho os combustíveis formulados a partir de misturas compostas
por etanol, biodiesel e diesel se mostraram viáveis para a utilização em motores ciclo
Diesel. A adição de etanol e biodiesel ao diesel não atua de forma deletéria, no que tange à
combustíveis formuladas. Os parâmetros medidos

requerido, com exceção do ponto de fulgor, algo já esperado, dado o baixo ponto de fulgor
do etanol.
O estudo de lubricidade mostrou que a presença de biodiesel nas misturas permitiu
combustíveis formulados, propriedade
prejudicada pela adição do etanol
da lubricidade das misturas em relação ao combustível diesel, diminuindo o diâmetro da

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 262


Com relação ao estudo de estabilidade, os resultados variaram bastante, de razoáveis
a bons, indicando a necessidade de cautela na utilização das misturas combustíveis, a

diferentes regiões do país, em diferentes períodos do ano.


Uma conclusão clara nestes resultados é que teores mais elevados de biodiesel
conseguem solubilizar maior quantidade de água, comprovando seu caráter cossolvente.
Contudo, devido ao fato de ser mais higroscópico que o diesel de petróleo, termina
absorvendo maior quantidade de água do ambiente, levando de igual forma à separação
da mistura. Ou seja, o aumento do teor de biodiesel não colaborou para aumentar o tempo
de estabilidade da mistura.
Medidas adicionais para mitigar a presença de água no combustível (um fator
crítico para a vida útil do motor) como: adição de aditivos para coalescência, instalação
de respiradouros dessecantes e especial atenção às boas práticas de armazenamento e
manuseio devem ser implementadas.

AGRADECIMENTOS
UFRJ, CNPq, CAPES, FAPERJ.

REFERÊNCIAS
ANP. Etanol .

biodiesel contida no Regulamento Técnico ANP no 3 de 2014 e as obrigações quanto ao controle da


qualidade a serem atendidas pelos diversos agentes econômicos que comercializ.
União, [S. l.], 2014.

ANP BRASIL. BRASIL. Resolução ANP número 764, de 20 de dezembro de 2018. Estabelece as
combustíveis de referência utilizados nos ensaios de avaliação de consumo de
combustível e de emissões veiculares para a homologação de veículos automotores novo. Diário
, [S. l.], 2018.

ARMAS, O.; GÓMEZ, A.; MATA, C.; RAMOS, A. Particle size distributions from a city bus fuelled
–diesel fuel blends. Fuel, [S. l.], v. 111, p. 393–400, 2013. DOI: 10.1016/j.

BAKEAS, Evangelos; KARAVALAKIS, Georgios; STOURNAS, Stamoulis.


modern diesel vehicles. Part 1: Effect of biodiesel origin on the criteria emissions. Science of The Total
Environment, [S. l.], v. 409, n. 9, p. 1670–1676, 2011. DOI: 10.1016/j.scitotenv.2011.01.024. Disponível

CAMPI A. R, Et al. Patente: Aditivo para melhorar as propriedades de combustível automotivo.,


Depósito de Patente Brasileira-PI9903413-1, 1999. a.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 263


CAMPI A. R, Et al. Patente: Mistura alcoólica solúvel em óleo diesel, Depósito de Patente Brasileira-
PI9903414-0., 1999. b.

CRUZ, Y. R. Combustíveis alternativos: mistura de etanol anidro ao óleo diesel para motores de
ciclo diesel com sistema de injeção de bomba rotativa. 2019. UFRJ, [S. l.], 2019.

IRSHAD AHMED. Patenye: Diesel fuel composition, US Patent 6, 306, 184., 2003.

MITCHELL, Ken. “Diesel Fuel Lubricity – Base Fuel Effects”. SAE Transactions (2001): ., [S. l.], v. 110,

ONU. ONU, Conheça os novos 17 Objetivos de Desenvolvimento Sustentável da ONU. 2005.


Disponível em: https://nacoesunidas.org/conheca-os-novos-17-objetivos-de-desenvolvimento-
sustentavel-da-onu/. Acesso em: 19 set. 2021.

SILVA, Electo; VIEIRA, Rubenildo; MARTINEZ, Juan; HAIKAL, Marco; ROCHA, Mateus; VILASBOAS,

Biocombustíveis - Volume 1, [S. l.], p. 1200, 2012.

STACHOWIAK, G. W.; BATCHELOR, A. W. Engineering Tribology. 3. ed. Inglaterra: Engineering


Tribology, 2005.

TRUJILLO G. Manual del seminário “Machinery Lubrication & Oil Analysis”. 1. ed. León.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 19 264


CAPÍTULO 20
EFICIÊNCIA DE INSETICIDAS EM TRATAMENTO
DE SEMENTES DE FEIJOEIRO NO
DESENVOLVIMENTO INICIAL

Data de aceite: 10/01/2022 (DBC), com 4 repetições e 5 tratamentos,


totalizando 20 parcelas. O dimensionamento da
parcela foi de 5 m de comprimento e 2,25 m de
Stella Mendes Pio Oliveira
Instituto Federal de Educação, Ciência e
Tecnologia Goiano – Campus Rio Verde – GO tratamentos com inseticidas (g i.a. ha-1) foram: 1-
http://lattes.cnpq.br/3970812588084775, Tiametoxan (70); 2- Clorantraniliprole (62,4); 3-
Ciantraniliprole (120); 4- Imidacloprid+Tiodicarb
Guilherme Mendes Pio Oliveira (150+450); 5- Testemunha (água). Os tratamentos
Universidade Estadual de Londrina –
UEL, Departamento de Pós-graduação de avaliaram os parâmetros vegetativos, altura de
Agronomia, Campus de Londrina plantas, níveis de desfolhas, massa seca e verde
Londrina-PR
da parte aérea, assim como a germinação. Na 1ª
http://lattes.cnpq.br/3021305688583345
avaliação, os inseticidas apresentaram controle
Luana Ranieri Massucato de B. tabaci, na 2ª avaliação Clorantraniliprole
Universidade Estadual de Londrina – e Ciantraniliprole apresentaram melhor
UEL, Departamento de Pós-graduação de controle de D. speciosa, e na 3ª avaliação
Agronomia, Campus de Londrina não houve diferenças para a incidência de
Londrina-PR pragas. Os componentes vegetativos não
http://lattes.cnpq.br/8998362843162768
a testemunha em todos os tratamentos. Os
inseticidas Tiametoxan, Clorantraniliprole,
Ciantraniprole, Imidacloprid+Tiodicarb foram
RESUMO: O tratamento de sementes é uma
ferramenta fundamental para estabelecer um
Bemisia tabaci e Diabrotica speciosa.
excelente estande inicial e máxima proteção
PALAVRAS-CHAVE: Controle químico; pragas
contra ataques de pragas na cultura do feijão,
Diabrotica speciosa.
pois, trata-se de uma cultura que abrange diversos
artrópodes que comprometem sua produtividade
durante seu ciclo de desenvolvimento. O presente EFFICIENCY OF INSECTICIDES IN
trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar TREATMENT OF COMMON BEAN SEEDS
pragas, IN EARLY DEVELOPMENT
durante desenvolvimento inicial do feijoeiro. O ABSTRACT: Seed treatment is a fundamental
trabalho foi conduzido na fazenda experimental tool to establish an excellent initial crop stand and
da (UFGD), localizada em Dourados-MS,
conduzida durante a 3ª safra do feijão, sendo culture because it is a crop that includes several
utilizada a cultivar IPR Curió. O delineamento arthropods that compromise its productivity
experimental utilizado foi blocos casualizados

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 265


Farm (UFGD), located in Dourados-MS, conducted during the 3rd crop of beans, using the

-1

2-Chloranthraniliprole (62,4); 3-Cyantraniliprole (120); 4- Imidacloprid + Thiodicarb (150+450);

as germination. In the 1st evaluation, the insecticides presented control of B. tabaci, in the
2nd evaluation Clorantraniliprole and Ciantraniliprole presented better control of D. speciosa,
and in the 3rd

Bemisia tabaci and Diabrotica speciosa.


KEYWORDS: Chemical control; Pests Diabrotica speciosa.

INTRODUÇÃO
O feijão comum (Phaseolus vulgaris L.) é uma planta pertencente à família Fabaceae,
sendo uma das principais culturas cultivadas em larga escala no Brasil. Sua importância
excede o aspecto econômico, por sua relevância enquanto fator de segurança alimentar
e nutricional e sua grande importância cultural na culinária de diversos países e culturas
(BARBOSA & GONZAGA, 2012).
A estimativa para a safra 2016/17 é que a área plantada com feijão no Brasil alcance
de 3.093,800 ha-1 -1
e produção de
3,327,800 toneladas (CONAB, 2017).
A produção apresenta certa sazonalidade que se traduz em três safras não muito

e Sudeste”) é colhida durante novembro a março, com maior atividade em dezembro; sua
semeadura é realizada entre agosto e outubro, estendendo-se até novembro e dezembro.
A 2ª safra ou “safra da seca” ou “safrinha” (também chamada de “safra do Nordeste e
Sudeste”) é colhida durante abril a julho, nesse caso, a semeadura é realizada entre janeiro
e abril. A 3ª safra também é conhecida como “safra de outono-inverno”, “safra do Sudeste”
e “safra irrigada”; a semeadura é realizada a partir de maio, com a colheita entre agosto e
outubro (BARBOSA & GONZAGA, 2012).

insetos, ocorrendo mais de 15 espécies consideradas pragas por todo o Brasil. Diante
dessa problemática, pesquisas envolvendo produtos químicos com aplicação via sementes
ou foliar tem se tornado uma prática comum, destacando-se o uso de fungicidas, inseticidas,
inoculantes, hormônios (LANA et al., 2009).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 266


Nesse contexto, o tratamento de sementes com inseticidas é uma das formas de
reduzir perdas ocasionadas pela ação de diversos insetos-pragas que comprometem as
partes subterrâneas das plantas novas, desde a sua germinação. Porém, inseticidas que
são recomendados para o tratamento de sementes diferencia-se dos aplicados na parte
área da planta, por causa da sua ação sistêmica (BARROS, 2001).

seja levado em consideração as informações sobre o produto, tais como, espectro de

MARCOS FILHO 1977).


Devido a diversidade e o aumento de pragas, o emprego de inseticidas está cada
vez mais abundante nas lavouras de feijoeiro, tornando uma prática constante, no qual
pragas (EMBRAPA, 2001).

de obter ganhos na produtividade do feijoeiro. Assim, este trabalho foi realizado com o
pragas,
usando diferentes inseticidas no tratamento de sementes.

MATERIAL E MÉTODOS
O experimento foi conduzido no período de maio a agosto de 2017, na Fazenda
Experimental da Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD), Dourados-MS,

temperatura média anual de 22.6 °C, precipitação média anual de 1.413,1 mm.

típico, de textura muito argilosa (SANTOS et al., 2013).


O delineamento experimental foi em blocos ao acaso (DBC) constituídos com 5
tratamentos e 4 repetições, totalizando 20 parcelas. Os tratamentos empregados estão
descritos na tabela abaixo (Tabela 1).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 267


Tratamentos
Tiametoxan 70
Clorantraniliprole 62,4
Ciantraniliprole 120
Imicloprid+Tiodicarb 150+450
Testemunha Água
Tabela 1. Descrição dos tratamentos utilizados no controle de insetos/pragas.

O experimento foi realizado em uma área experimental que vem sendo manejada a
alguns anos, com a implantação de diferentes culturas na área. O experimento foi composto
por 20 unidades experimentais, cada uma com 5 linhas de 5 m de comprimento e 2,25 m
de largura, sendo espaçadas à 0,45 m entre linhas, totalizando uma área de 11,25 m por
unidade experimental.
A cultivar em estudo é IPR Curió que se destaca pela precocidade, chegando

alcança mais de 3,8 toneladas por hectare. É um material que apresenta resistência ao
Vírus do Mosaico Comum, Oídio e Ferrugem, é moderadamente resistente ao Crestamento
Bacteriano Comum, Murcha de Curtobacterium e Murcha de Fusarium. A semeadura foi
realizada no dia 29 de maio de 2017, de forma manual, semeando 12 sementes m-1 linear
com uma população de 266,666 plantas ha-1. Anteriormente, foi realizada adubação de
-1
, do formulado NPK 08-20-20,
com base na interpretação da análise química do solo.
No preparo do tratamento de sementes foi utilizado uma seringa dosadora para

(Figura 1), sendo adicionadas em sacos plásticos transparentes (15 x 20 cm). Em seguida
aplicando-se os produtos contidos nas seringas na borda interior superior do saco plástico
formando um anel desta calda viscosa, evitando o contado direto com as sementes. O saco
foi atado contendo ar, e de forma manual foi realizado a agitação por cerca de 3-5 min, a

Durante o pré-plantio e ao longo do desenvolvimento, a cultura foi mantida irrigada


com intervalo de 2 dias. Durante essa fase, foram realizadas capinas manuais visando
o controle de plantas daninhas. Posteriormente, 30 dias após a emergência (DAE) foi

ha-1 de N.
Teste de germinação: O teste de germinação foi realizado conforme as regras para
análise de sementes (RAS) (Brasil, 2009). Em bandejas plásticas contendo uma camada
uniforme de areia umedecida, foram semeadas 25 sementes com aproximadamente 1 cm
de profundidade, sendo 4 repetições para cada tratamento. No intuito de simular situação
a campo, as bandejas foram mantidas em temperatura ambiente, 25 - 30° C. A primeira

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 268


contagem da germinação foi realizada conjuntamente com o teste de germinação, através

teste, que foi efetuada no quinto dia após a emergência e os resultados expressos em
porcentagem de plântulas normais.
Incidência de pragas: Foram realizadas 3 avaliações semanais 30 dias após a
emergência, sendo feita a contagem e o monitoramento da incidência de insetos-pragas
nos folíolos da terceira folha da emergência até o estágio de 3-4 folhas trifolioladas,
amostrando 2 metros nas linhas centrais de plantio, com o auxílio placa branca de plástico.
pragas e a contagem de insetos nas plantas.
Especialmente para mosca branca, a amostragem foi realizada em 2 metros da
parcela útil nas partes superior e inferior das folhas onde o inseto estava em repouso.
Pelo fato de a mosca branca ser transmissora do Vírus do Mosaico Dourado do Feijão
(VMDF), não existe nível de controle estabelecido para essa praga, e o seu manejo deve
ser realizado de acordo com a época de plantio do feijoeiro.
Componentes vegetativos: O nível de desfolha e a altura de plantas foram
avaliadas 38 DAE, sendo, o nível de desfolha avaliado visualmente e a altura de plantas

tratamentos.

plantas para obtenção da massa verde e seca da parte área. Coletou-se 5 plantas ao
acaso dentro da parcela útil, com o auxílio de uma pá de ponta que possibilitava remover
uma porção do solo. Em laboratório, a parte área teve a massa aferida com o uso de
uma balança analítica. Após a pesagem, o material foi encaminhado para uma estufa com
temperatura constante de 60 ºC por 24 h.
Após a obtenção dos resultados, os dados foram submetidos à análise de variância

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Parâmetros vegetativos

massa seca e verde da parte aérea), juntamente com a germinação não foram afetados

tratamentos (Figura 1, 2, 3).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 269


Figura 1. Porcentagem de germinação de plântulas de feijão (Phaseolus vulgaris L.).

A porcentagem de germinação apresentou índice de germinação acima de 85% em


todos os tratamentos. Visto que, os produtos possuem ação inseticida, e não contribui de
forma isoladamente para a germinação no processo de tratamento de sementes. Assim,
para o estabelecimento de uma lavoura é primordial a utilização de sementes de qualidade

e baixa população de plantas (EVANGELISTA et al., 2015). Geralmente, os testes de


germinação de sementes em relação a emergência a campo são superestimados, já que

ou desfavoráveis, como normalmente ocorre no campo. Já em função do tamanho das


sementes, as sementes maiores, são as mais bem nutridas durante seu desenvolvimento
e que normalmente possuem embriões bem formados e com maiores quantidades de
reservas, logo, as sementes maiores apresentam maior poder germinativo em torno de
90% em relação as sementes menores (BOTELHO et al., 2010).
pragas é necessário
obter informações relativa à resposta de cada cultivar do feijoeiro à perda de área foliar,
altura de plantas em diferentes níveis de desfolha e épocas de desenvolvimento (Figura
2, 3).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 270


Figura 2. Níveis de desfolha visual em plantas de feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.)

Silva et al. (2003), avaliando o consumo de desfolhas de forma isolada no


desenvolvimento do feijoeiro aos 10, 17, 24, 31 e 38 dias, observaram níveis de desfolha
em torno de 25%, 50% e 75% em comparação a testemunha, não interferindo na altura de
plantas. Os mesmos autores sugerem que esses danos são causados por algum estresse,
uma vez que, a planta que sofre 50 a 75% de desfolha, acarreta perdas de produtividade.
Em contrapartida, o presente estudo obteve resultados divergentes, apresentando níveis

da parte área (Tabela 1).

Figura 3. Altura de plantas de feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.). Médias seguidas por letras diferentes

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 271


Com o emprego dos inseticidas no tratamento de sementes da cultivar IPR Curió,
a altura das plantas não se diferenciou da testemunha, havendo uma tendência de maior
aumento de alturas de plantas com o tratamento Clorantraniliprole. No entanto, Salgado

avaliando genótipos de diferentes cultivares com sementes tratadas com inseticidas, mas
dentro da mesma cultivar não foi constatada diferenças na altura de plantas. Labinas
(2002), realizando trabalhos com tratamento de sementes, não encontrou diferenças

conformidade com os resultados obtidos neste trabalho, e que os produtos químicos não
interferiram neste parâmetro.

Tabela 1. Produção de massa fresca e massa seca da parte aérea, nos diferentes tratamentos com
inseticidas.

O uso de inseticidas no tratamento de semente pode interferir na emergência e no


desenvolvimento de sementes no campo. Pois, nem sempre traz benefícios à qualidade

(AVELAR et al., 2011). Segundo Oliveira et al. (2015), em sementes de feijão não há
relatos sobre o efeito de Tiametoxam e Imidacloprid + Tiodicarb sobre o potencial produtivo
da planta. No entanto, em estudo de Pereira (2010) foi constatado que o Tiametoxan
proporcionou aumento de área foliar, massa seca da parte aérea e aumento da atividade
do nitrato redutase em folhas, e quando realizada a pulverização com esse produto houve
o aumento na atividade do nitrato redutase e da fenilalanina amônio liase.

Ocorrência de pragas
Os níveis de ocorrência de pragas/insetos no experimento, foram relativamente

branca, vaquinhas e inimigos naturais (Tabela 2, 3 e 4). Na primeira avaliação foram


encontradas Diabroticas speciosa, Empoascas kraemeri, Lagria villosa, Agrotis ipsilon,
Bemisia tabaci e inimigos naturais (Tabela 2).

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 272


Bemisia tabaci e inimigos
naturais, onde os tratamentos com os ingredientes ativos (Tiametoxan, Clorantraniliprole,

pragas em todos os tratamentos, diferindo apenas da testemunha que se manteve com


a população em torno de 30 % a mais sobre as parcelas que receberam o tratamento de
sementes.

Tabela 2. Número médio de ocorrência de insetos amostrados durante a 1ª avalição no feijoeiro sobre
diferentes tratamentos, em Dourados, MS; 28 de junho de 2017.

*I.N. = Inimigo Natural

Com relação a segunda avaliação, foram contabilizadas a presença de Diabrotica


speciosa, spp., Franklienella sp., Bemisia tabaci e inimigos
naturais (Tabela 3).

*I.N. = Inimigo Natural


Tabela 3. Número médio de ocorrência de insetos amostrados durante a 2ª avaliação no feijoeiro sobre
diferentes tratamentos, em Dourados, MS; 05 de julho de 2017.

D. speciosa, onde o
tratamento de sementes foi realizado com os ingredientes ativos (Clorantraniliprole e

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 273


a população comparado com a testemunha.
Na terceira avaliação observou-se efeitos somente sobre a população de inimigos
naturais (Tabela 4). Apesar dos tratamentos serem semelhante a testemunha, houve uma
expressiva redução de inimigos naturais nas parcelas onde o tratamento de sementes se
deu pelos ingredientes ativos (Tiametoxan, Clorantraniliprole). Em análise, considerado
a evolução da quantidade de pragas na área, pode –se observar que, na medida que,

Bemisia tabaci e Diabrotica speciosa nas três avaliações.

*I.N. = Inimigo Natural


Tabela 4. Número médio de ocorrência de insetos amostrados durante a 3ª avaliação no feijoeiro sobre
diferentes tratamentos, em Dourados, MS; 11 de julho de 2017.

Já Labinas (2002), estudando o efeito de inseticidas na população de pragas do


feijoeiro, constatou que aos 28 DAE não houve diferenças entre os tratamentos, devido
à grande redução dos insetos na cultura, entretanto, o mesmo fato ocorreu durante a
condução deste experimento, no qual a incidência foi muito baixa em todos os tratamentos.

dano econômico e com isso determinar o nível de controle para as pragas na cultura do
feijoeiro.

CONCLUSÃO
Os componentes vegetativos, juntamente com a porcentagem de germinação não

Já as avaliações referentes as populações de pragas/insetos, foram afetadas pelo


controle. Os inseticidas Tiametoxan, Clorantraniliprole, Ciantraniprole, Imidacloprid +
Bemisia tabaci e Diabrotica
speciosa. Por outro lado, na primeira e terceira avaliação as populações de inimigos

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 274


REFERÊNCIAS
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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 20 276


CAPÍTULO 21
ANÁLISE DA APLICAÇÃO DO JOGO DIDÁTICO
“ECOLOGIA NO LABIRINTO” PARA OS ALUNOS DO
ENSINO MÉDIO

Data de aceite: 10/01/2022 RESUMO: Diante das mudanças adquiridas com o


Data de submissão: 08/11/2021 ensino remoto, os jogos didáticos têm se mostrado
adequado, para promover um desempenho
dos alunos. O jogo “Ecologia no Labirinto” foi
aplicado aos alunos do 1° ano do Ensino Médio
Milena Resende Nascimento
de uma escola pública e que teve como objetivo
Instituto Federal do Triângulo Mineiro - IFTM
geral obter um maior desempenho escolar com
Uberaba – Minas Gerais
http://lattes.cnpq.br/7082972203762708 os jogos online nas plataformas digitais. Em um
questionário feito pela plataforma Google Forms
Mariana Fideles Ferreira que tinham perguntas, como por exemplo, se os
Instituto Federal do Triângulo Mineiro - IFTM alunos tinham gostado do jogo, desenvolvido
Uberaba – Minas Gerais na plataforma WordWall; percebemos que o
http://lattes.cnpq.br/1977963013075345 resultado do jogo foi satisfatório, pois boa parte
Francielly Felix da Silva Isaias dos alunos respondeu que gostaram do jogo e
Instituto Federal do Triângulo Mineiro – IFTM que este contribuiu para o seu aprendizado.
Uberaba – Minas Gerais Conclui-se então que o jogo didático “Ecologia
http://lattes.cnpq.br/7966735772918937
para um melhor desempenho dos estudos
Mayra Luzia da Cruz e Souza destes alunos. Contudo, é necessário que os
Instituto Federal do Triângulo Mineiro – IFTM professores abordem com mais frequência os
Uberaba – Minas Gerais
jogos didáticos para seus alunos, como forma de
http://lattes.cnpq.br/9525355482555119
revisão de conteúdo, além de promover uma aula
Frederico Miranda mais dinâmica, interativa e lúdica entre os alunos,
Instituto Federal do Triângulo Mineiro – IFTM contribuindo assim com um ensino aprendizado
Uberaba – Minas Gerais
http://lattes.cnpq.br/5202933866735766 PALAVRAS-CHAVE: Jogo Didático, Ecologia,
Ensino-Aprendizado.
Polyanna Miranda Alves
Instituto Federal do Triângulo Mineiro – IFTM
Uberaba – Minas Gerais ANALYS OF THE APPLICATION OF
http://lattes.cnpq.br/2421784475442376 THE DIDACTIC GAME “ECOLOGY IN
THE LABYRINTH” TO HIGH SCHOOL
Polyane Ribeiro Machado STUDENTS
Escola Estadual Nossa Senhora da Abadia ABSTRACT:
Uberaba – Minas Gerais
http://lattes.cnpq.br/8597062189132795 proved adequate, to promote a performance of
the students. The game “Ecology in the Labyrinth”

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 21 277


questionnaire made by the platform Google Forms that had questions, as for example, if the

and that it contributed to their learning. It is concluded that the didactic game “Ecology in the

KEYWORDS: Didactic Game, Ecology, Teaching-Learning.

1 | INTRODUÇÃO
Diante das mudanças adquiridas com o ensino remoto, os jogos didáticos têm se
mostrado uma alternativa acessível com resultados promissores.

de promover um melhor desempenho dos alunos, que por sua vez são estimulados com
ferramentas que já fazem parte da sua vivência fora do ambiente escolar.
O jogo “Ecologia no labirinto” foi aplicado aos alunos do 1° ano do Ensino Médio de
uma escola pública e teve como objetivo geral obter um maior desempenho escolar com os
jogos online nas plataformas digitais e assim, realizar uma revisão de conteúdo de maneira
animada, proporcionando aos alunos um maior interesse pela matéria e a metodologia
desenvolvida.

2 | RESULTADOS E DISCUSSÃO
Levando-se em consideração as respostas do questionário elaborado no Google
Forms
responder as questões; se teriam gostado; se a aplicação do jogo teria os ajudado a estudar
o conteúdo etc., sobre o jogo “Ecologia no Labirinto” desenvolvido na plataforma Wordwall,
percebemos que o resultado do questionário foi satisfatório de forma geral, pois boa parte
dos alunos responderam que gostaram da aplicação do jogo, e que o jogo contribuiu para
o aprendizado e que se sentiram mais estimulados em aprender o conteúdo.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 21 278


Figura 1. Jogo “Ecologia no Labirinto”

Figura 2. Resposta de uma pergunta do questionário.

3 | CONCLUSÕES
Conclui-se então que a aplicação do jogo didático “Ecologia no Labirinto” obteve uma

é necessário que os professores abordem com mais frequência os jogos didáticos para os
seus alunos, sobre os conteúdos ministrados dentro da sala de aula. Pois assim, os alunos

ministrado. Os jogos didáticos, além de ser uma forma utilizada para a revisão de conteúdo,
também promove uma aula mais dinâmica, interativa e lúdica entre os alunos, além de se
obter uma maior aproximação entre professor e aluno, contribuindo assim com um ensino-

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 21 279


AGRADECIMENTOS
Agradecemos ao IFTM e a CAPES por proporcionar a visão prática da docência, aos
alunos do 1° ano do Ensino Médio que propuseram um pouco do seu tempo para jogar e
responder o questionário sobre o jogo.

REFERÊNCIAS
ARAUJO, LIANE CASTRO de. ARTIGO - JOGOS COMO RECURSOS DIDÁTICOS NA
ALFABETIZAÇÃO: O QUE DIZEM E FAZEM AS PROFESSORAS. Educ. rev., Belo Horizonte , v. 36,
e220532, 2020 .

FONTANA PIFFERO, Eliane de Lourdes et al.


e possibilidades no novo Ensino Médio. Ensino & Pesquisa

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 21 280


CAPÍTULO 22
AVALIAÇÃO DAS ALTERAÇÕES HEMATOLÓGICAS
EM INDIVÍDUOS COM TALASSEMIAS ALFA E
BETA E CORRELAÇÃO COM A INCIDÊNCIA NO
MUNICÍPIO DE ASSIS E REGIÃO

Data de aceite: 10/01/2022 o levantamento de dados que demonstrem a


incidência e prevalência grupo de talassemias
na região de Assis/SP. Métodos:Foi realizado
Julia Amanda Rodrigues Fracasso
o levantamento da incidência de talassemia
Instituto de Ciências da Saúde, Universidade
Paulista
Assis-SP,Brasil
prevalência dos casos, sexo, idade e análise de
Luiz Fernando Moraes-Silva eletroforese da hemoglobina, por meio da análise
Instituto de Ciências da Saúde, Universidade dos prontuários dos pacientes que apresentam
Paulista
Assis-SP,Brasil

Guilherme de Oliveira-Paes sexo feminino apresenta um total de 63,64% de


Instituto de Ciências da Saúde, Universidade
Paulista
Assis-SP,Brasil

Luisa Taynara Silvério da Costa


da hemoglobina , mostrou que cadeias alfas e
Departamento de Biotecnologia, Universidade
Estadual Paulista Júlio Mesquita Filho
Assis-SP, Brasil

Maria José Malagutti-Ferreira


Departamento de Biotecnologia, Universidade
Estadual Paulista Júlio Mesquita Filho cidade de Assis apresentou 61,82% dos casos,
Assis-SP, Brasil

Lucinéia dos Santos


positiva fraca entre idade e número de casos,
Departamento de Biotecnologia, Universidade
Estadual Paulista Júlio Mesquita Filho
Assis-SP, Brasil não há correlação entre a idade e o número
de casos, obtendo o r = 0,08451.A frequência
Renata Aparecida de Camargo Bittencourt absoluta (FI) dos casos foram uniforme para
Instituto de Ciências da Saúde, Universidade
Paulista
Assis-SP,Brasil repetições de casos. Conclusão: Em síntese, os
dados obtidos através dos prontuários médicos
foram satisfatórios e de grande valia para cidade
de Assis e região, bem como, a confecção do
RESUMO: Objetivo:O presente trabalho efetuou

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 281


folheto infomativo sobre talassemias e disponibilização ao SUS.
PALAVRAS-CHAVE: Hematologia, Talassemias, Epidemiologia.

ABSTRACT
incidence and prevalence of thalassemia in the Assis region. Methods - In this sense, the

age and analysis of hemoglobin electrophoresis, through the analysis of medical records of

SUS.
KEYWORDS: Hematology, Thalassemias, Epidemiology.

INTRODUÇÃO
A Hematologia é a especialidade médica que estuda as doenças que envolvem
o sistema hematopoiético, ou seja, tecidos e órgãos responsáveis pela proliferação,
maturação e destruição das células do sangue (hemácias, leucócitos e plaquetas). O
tecido sanguíneo é composto por uma parte líquida (o plasma) e outra celular (hemácias,
plaquetas e leucócitos). O plasma contem proteínas que desempenham a função de defesa
do organismo, as hemácias transportam o oxigênio para todo o organismo e as plaquetas
controlam sangramentos e os leucócitos combatem infecções1.
Deste modo, qualquer alteração pode levar a um diagnóstico clínico de alguma
patologia. Por essa razão é muito comum médicos solicitarem hemogramas através de
suspeitas de patologias hematológicas2
como Anemias (autoimune, hemolíticas e megaloblásticas), Alterações de Coagulação:

linfomas e mielodisplasias2.
Destarte, ás hemoglobinopatias são consideradas como uma das doenças genéticas
mais comuns em todo o mundo, com prevalência de portadores heterozigotos de seus

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 282


principais tipos em aproximadamente 5% da população mundial. Devido à heterogeneidade
clínica e genética dessas alterações genéticas é fundamental estabelecer a investigação
laboratorial das diferentes formas de hemoglobinas variantes e de talassemias3.

dependência dos grupos raciais que formam cada região. Ás variantes das hemoglobinas
ou talassemias, mais frequentes, no Brasil, são os tipos S e C e as talassemias alfa e beta,
todas na forma heterozigota. As hemoglobinas anormais apresentam variações como Hb S,
Hb C, Hb Instáveis entre outras as talassemias: alfa, beta, beta/delta, entre outras4.
Salienta-se que a complexidade molecular das hemoglobinopatias na grande maioria
são: hemoglobinas instáveis descritas que devem a trocas de aminoácidos neutros, ex:
prolina por treonina, tirosina por leucina, entre outros. Essas substituições de aminoácidos
não causam alterações de cargas elétricas, portanto, não alteram o ponto isoelétrico da

3
.

distúrbios hereditários mais comuns do mundo em desenvolvimento e está associada à


anemia grave e dependência de transfusão ressalva alguns casos. O impacto da talassemia
na saúde global tem aumentado como resultado da mobilidade humana e da migração
nos últimos anos. Dependendo das mutações hereditárias, os pacientes com talassemia
apresentam padrões distorcidos de hemoglobina (Hb) e índices de hemácias desviados,
5-6
.

sendo considerada uma patologia hematológica, encontrada através do hemograma, sua

como também, a literatura descreve como uma vantagem evolutiva de seus portadores
devido a exposição dos indivíduos a patologias como a malária no continente Africanos,
por exemplo7.

caracterizado por uma anemia microcítica hipocrômica e um fenótipo clínico que varia de

na expressão dos genes do cromossomo 16.Há quatro categorias, de acordo com o nível
de expressão dos genes; (1) uma forma assintomática ou portador silencioso, com perda
de um único gene (-a /aa); (2) o traço alfa talassêmico, no qual há perda de dois genes alfa
de um único cromossomo (--/aa) ou de um gene a de ambos os cromossomos (-a /-a); (3) a
doença da hemoglobina H, na qual apenas um gene alfa é funcional (--/- a) e (4) a hidropsia
fetal, caracterizada pela ausência dos quatro genes (--/--)8-10.

encontram estruturalmente normais. É causada por mutações heterogêneas que afetam

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 283


o locus da cadeia da beta-globina do cromossomo 11. Esses defeitos genéticos levam

normal, resultante de os genes da alfa-globina não serem afetados, o que desenvolve um


acúmulo de precursores eritróides, originados no excesso de alfa-globina não-pareada, a
qual não é capaz de formar tetrâmeros viáveis, produzindo corpúsculos de inclusão que
são responsáveis pela destruição intramedular extensa de precursores eritróides, sendo os
11-13
.
Haja vista, a presente pesquisa reuniu os dados sobre a expressividade desta
patologia na região de Assis, Estado de São Paulo, bem como, um estudo epidemiológico para
que se tenha o conhecimento do número de casos presentes dentre 10 anos (2009/2019).

necessário que a população conheça exames hematológicos e possua mais contato com
Unidades Básicas de Saúde (UBS), deste modo, a estratégia dessa pesquisa foi a entrega
de folhetos informativos (Anexo 1 e 2) que gerem a universialização e acessibilidade de
maneira didática a hematologia.

METÓDOS
Foram incluídos todos os prontuários de pacientes que manifestaram a patologia
e encontrados no banco de dados da Clínica Renascer dentre 10 anos (2009/2019) que

prontuários de ambos os sexos e idades, dentro desse total, 40 prontuários foram positivos

prontuários médicos arquivados no sistema da Clínica Renascer da cidade de Assis-


São Paulo, juntamente com o termo de aceite do Comitê de Ética e Pesquisa em Seres

dados obtidos através dos prontuários foram analisados de forma quantitativa por métodos
estatisticos embasados segundo MARTINS (2006)14; MARIANO (2006)15; LAPPONI
(2005)16, como: distribuição de frequências, média, desvio padrão, correlação linear. Por

gerem a universialização e acessibilidade de maneira didática a hematologia.

RESULTADOS

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 284


27,27%, apresentando uma média de 1,66 pessoas ao ano com desvio padrão de DP = 2.

com 61,82% dos casos, sendo 72,50% para alfa e 33,33% para beta. A cidade de Platina

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 285


em dez anos.

o sexo feminino e 33,33% para o masculino.

em dez anos na região de Assis-SP.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 286


em dez anos na região de Assis-SP

A Eletroforese da Hemácia e peso molecular das cadeias alfas e betas demonstrada

46,67% .

histogramas, onde é mostrado a frequência (repetições) de observações para cada valor


da variável estudada15.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 287


dos casos tiveram repetições de caso

A correlação indica o “grau de correspondência”, ou seja, o comportamento conjunto

de Pearson indicado por “r”14. Com os dados estudados, chegou-se à conclusão de que

Analisando o diagrama de dispersão, nota-se um elevado número de casos entre os 62 e

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 288


DISCUSSÃO
Aproximadamente 5% da população mundial apresenta uma variação na parte

sintoma), como também sintomática (sintomas leves, moderados e graves), deste modo,
estatísticamente, 1,7% da população global apresenta sinais em decorrência das mutações
genéticas17.
As talassemias afetam aproximadamente 4,4 em cada 10.000 nascidos vivos em

a Talassemia beta: 0-3% da população é afetada por esta17.


De acordo com a Associação Brasileira de Talassemia18, entre 2013 e 2015 o número
de pessoas diagnosticadas com as formas graves Talassemias foram de 593 pessoas,
trazendo a essa pesquisa, no mesmo período, o número de pessoas diagnosticadas na
área estudada (região de Assis) corresponde a aproximadamente 2,67% dos casos. O
estudo feito pela Associação Brasileira de Talassemia ainda mostra que 60% dos casos de

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 289


talassemia beta grave foram evidenciados na região Sudeste. Os casos na região de Assis
correspondem a 4,46% dos casos da região Sudeste.
Em 2010 no Estado de Ceará, na cidade de Fortaleza um Centro Universitário relatou

nenhum caso, sendo assim, a cidade de Fortaleza com uma expressividade 15x maior do
quê a cidade de Assis. Observa-se que a região nordestina possui um maior número de
19
.
No ano de 2014, o Estado do Espirito Santo20

assim, a expressividade da cidade de Aracruz, Estado do Espiríto Santo é superior que de


Assis, Estado de São Paulo.
Já no ano de 2018, segundo Ferris (2018)21, a cidade de Mirassol, Estado de São
Paulo apresentou dentro do seu total de prontuários, 21 casos (18,9%) apresentaram

positivos para talassemia alfa. Assim, no ano de 2018 é notável que foi maior a incidência
de casos na cidade de Mirassol, Estado de São Paulo equiparado á Região de Assis,
Estado de São Paulo.

sexo feminino é o mais afetado e a idade de ambas variam. Há poucos estudos que relatem
de fato incidências nos respectivos estados do Brasil, como também, não há fácil acesso de
informações de incidência e prevalência recentes em banco de dados, tanto em sistemas
públicos, quanto em revistas eletrônicas.

são doenças raras e que devem ser mais estudas, uma vez que acometem boa parcela da
população. Observa-se que a eletroforese de hemácia foi primordial para diferenciação de

para às cadeias alfa e beta, diferentemente do presente estudo, não houve disponibilização
dos pesos moleculares19-21.

CONCLUSÃO
Em virtude do Brasil ser um país altamente miscigenado e sendo foco de migrações,
o período colonial e imperarial também marcou intensa heterogeneidade genética,
principalmente no estado de São Paulo. Assim, sabe-se a importância da cidade de Assis
e a sua região no periódo da República Café com Leite, uma vez que o Sudeste fora
miscigenado com diversas etnias, sendo as Talassemias provenientes do Oriente e África.

uma vez que essa doença atinge estatísticamente boa parcela da população.
Indubitavelmente, os dados obtidos através dos prontuários médicos foram

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 290


satisfatórios e de grande valia para cidade de Assis e estão sendo diagnósticados
corretamente pela técnica de biologia molecular de análise de Eletroforese de Hemácia.
Porém, é necessário que a população conheça exames hematológicos e possua mais
contato com Unidades Básicas de Saúde (UBS), deste modo, a estratégia dessa pesquisa
foi a entrega de folhetos informativos (Anexo 1 e 2) que gerem a universialização e
acessibilidade de maneira didática a hematologia.

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Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 292


ANEXO 1

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 293


ANEXO 2

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Capítulo 22 294


SOBRE A ORGANIZADORA

ALANA MARIA CERQUEIRA DE OLIVEIRA - Possui graduação em Biomedicina pela


Universidade Estadual de Santa Cruz -UESC (2002) com habilitação pelo CRBM 4 em
Patologia Clínica -Análises Clínicas e Biologia Molecular , licenciada em Biologia pela
Faculdade Cruzeiro do Sul (2020), licenciada em Pedagogia pela Faculdade Faveni (2021).
Em 2021 se especializou em Saúde indígena pela Faculdade Dom Alberto. Obteve seu
Mestrado (2006) e o Doutorado (2011) em Biologia Celular e Molecular pela Faculdade de
Medicina de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo – FMRP-USP. Pós-Doutorado pelo
Instituto Nacional de células Tronco, INCTC -USP (2012). O segundo Pós-doutoramento foi
realizado pelo departamento de Clínica Médica Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto-
FMRP-USP (2014). Seu terceiro Pós-Doutorado pelo Departamento de Química da Faculdade

do Acre -IFAC.

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Sobre a organizadora 295


ÍNDICE REMISSIVO

A
Acetólise 228, 229, 232, 233
Antibiosis 76, 78, 81, 83, 85, 86
Antifungal activity 76, 79, 80, 83, 84, 85, 90, 164, 165, 166, 167, 168, 170, 171, 175, 176,
177, 179, 180, 181
B
Benzofenona 207, 209, 213, 214, 219, 224, 225, 226
Biodiesel 149, 150, 154, 162, 163, 251, 252, 253, 256, 258, 260, 261, 262, 263

C
Câncer 108, 109, 112, 113, 212
Características reprodutivas 183, 185, 199
Células planctônicas 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73
Clínica ampliada 114, 115, 116, 122, 123, 124
Combustíveis 154, 251, 252, 262, 263, 264
Covid-19 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65
D
Diabrotica speciosa 265, 266, 273, 274
Dislexia 139, 140, 141, 142, 143, 144, 146, 147, 148
Drogadição 39, 42, 44, 52
Drogas 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 126, 209, 210
Drosophila 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198,
199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206

Enfermedades genéticas 1, 2, 3, 5, 7, 8, 9, 10, 13


Espermatozoide 95, 184, 186, 187, 189, 196, 197
Etanol 109, 149, 155, 156, 157, 159, 160, 161, 162, 163, 188, 251, 252, 253, 254, 256, 257,
260, 261, 262, 263, 264
Eugenesia 1, 3, 4, 5, 6, 7, 9, 10

F
Fatores de virulência 66, 67, 69
Fusarium graminearum 76, 77, 78, 86, 88, 89, 90, 92, 175, 178

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Índice Remissivo 296


G
Genética 1, 2, 4, 7, 8, 9, 10, 15, 16, 18, 20, 21, 22, 23, 24, 26, 28, 31, 32, 33, 34, 35, 44,
93, 202, 283, 290, 291
Genetics 7, 11, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 106, 201, 202, 203, 205

H
Hibisco 228, 229, 231, 235
Hibiscus rosa-sinensis l. 228

I
Ingeniería genética 1, 7, 8, 9, 10
Inseticida 270, 275
Interdisciplinaridade 114, 117, 118, 121, 126
Intervenção fonoaudiológica 139, 141, 142, 143, 144, 145, 146

K
K562 108, 109, 112
L
Lactobacillus 164, 165, 166, 175, 176, 178, 179, 180, 181
Leucemia 109
Levantamento taxonômico 237, 242, 247
Linfoma 109
Lipídios 149, 151, 152, 154, 155, 158, 159, 160, 161, 162, 163

M
Madurez sexual 127, 129, 131
Marcadores moleculares 15, 16, 18, 20, 21, 27, 28, 29, 33

Microalga 149, 150, 151, 152, 156, 159, 160, 161, 163, 215
Micronuclei 94, 95, 97, 98, 101, 104
Mycotoxin 77, 78, 87, 89, 90, 92, 165, 166, 176, 177, 179, 180, 181
O
Octocrileno 207, 209, 213, 216, 217, 219
Óxido nítrico 67, 70, 72

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Índice Remissivo 297


P
Pez león 127, 130, 131, 132, 133, 135, 136, 137
Poluentes 207, 208, 209, 210, 211, 212, 215, 217, 218, 219, 220, 222, 223, 227
Pragas 26, 27, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 272, 273, 274, 275
Professors 34, 35, 37
Pterois volitans 127, 128, 133, 134, 138

R
Reforma psiquiátrica 114, 115, 116, 117, 118, 122, 124, 125
Rio São Francisco 236, 238, 241, 242, 248, 249

S
Saccharomyces cerevisiae 76, 77, 78, 86, 87, 88, 89, 92, 178
Sars-Cov-2 54, 55, 61
Scenedesmus 149, 150, 151, 152, 155, 156, 159, 160, 163
Sequenciamento 14, 15, 16, 17, 18, 20, 25, 26, 27, 28

T
Tiazacridínico 107, 109, 110, 111
V
Vacinação 54, 55, 56, 58, 59, 60, 61, 64

Ciências biológicas: Gênese na formação multidisciplinar 2 Índice Remissivo 298

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