PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO – POP
MICROSCÓPIOS
1. Definição
Equipamento óptico que possibilita o uso da refração da luz oriunda da base em uma série de
lentes específicas, com a finalidade de ampliar e possibilitar a nitidez de estruturas
microscópicas (invisíveis ou difíceis de serem visualizadas) à olho nu.
2. Objetivo
Estabelecer procedimentos gerais para a utilização dos microscópios ópticos trinoculares com
câmera acoplada do Laboratório de Ensino Microscopia e Parasitologia.
3. Responsabilidade
Coordenador do Laboratório: Supervisão, orientação e treinamento dos técnicos de
laboratório, docentes e alunos na apropriação deste procedimento; revisão, controle e
atualização deste procedimento.
Técnicos de Laboratório: leitura e apropriação deste procedimento; orientação de docentes e
alunos sobre este procedimento.
Docentes: leitura e apropriação das nomas deste procedimento, orientação e supervisão dos
alunos, quando estes últimos, estiverem sob sua responsabilidade, sobre o cumprimento das
normas deste procedimento.
Alunos: leitura e apropriação deste procedimento; cumprimento às normas deste
procedimento.
4. Descrição do procedimento
A imagem mostra as principais partes ópticas do microscópio de luz. Esse tipo de microscopia
têm os seguintes elementos: iluminação (uma lâmpada); lente condensadora, que direciona o
feixe; a amostra, que é o objeto de análise colocado na posição correta em relação ao feixe;
lente objetiva; lente projetora; observação e registros de imagens.
A câmera acoplada ao equipamento pode realizar a captação de imagens e vídeos em alta
resolução, possibilitando projeção em televisores, formação de um banco de dados, edição e
medição dos materiais estudados com o objetivo prático pedagógico e pesquisas.
4.1. Componentes do equipamento
https://www.splabor.com.br/blog/microscopio-estereoscopio/aprendendo-mais-aspectos-importantes-sobre-
microscopio-optico-denominacao-suas-respectivas-partes-manuseio-e-limpeza/
• Oculares: apenas ampliam a imagem formada pela objetiva. Não tornam mais nítidas
as estruturas do objeto a ser estudado.
• Revólver: disco adaptado à zona inferior do tubo, que suporta quatro objetivas de
diferentes ampliações. Por rotação é possível troca rápida das objetivas.
• Objetivas: além de fornecer uma imagem ampliada de um objeto qualquer, procuram
corrigir também os defeitos cromáticos dos raios luminosos e de “esfericidade”.
• Platina: peça quadrada, paralela à base, onde se coloca a amostra a ser observada,
possui no centro um orifício circular que possibilita a passagem dos raios luminosos
concentrados pelo condensador.
• Comando de Charriot: movimenta a lâmina de um lado para o outro, permitindo uma
análise da lâmina como um todo.
• Garras: garante uma maior fixação da lâmina na platina.
• Condensador: Concentra os raios luminosos e permite ao pesquisador obter uma
iluminação desejável para cada caso.
• Dispositivos macro e micrométrico: peça deslizante em sentido vertical, acionada por
dois tipos de "botões" os "macrométricos" e "micrométricos". Com o mecanismo
macrométrico obtém-se focalização ótica grosseira do objeto a ser examinado, enquanto, com
o dispositivo micrométrico obtém-se deslocamentos do tubo até de dois milésimos de
milímetro ou menos ainda, dando desta forma nitidez à imagem.
• Diafragma: regula a quantidade de luz que entra no condensador.
• Fonte de luz: local onde a lâmpada está alocada.
• Botão liga/desliga: botão que liga e desliga a fonte luz. A localização depende da
marca e modelo do equipamento.
4.2. Orientações Gerais para utilização de microscópio
• Todos os usuários devem ter conhecimento e apropriação das normas deste procedimento.
• É obrigatório o uso de jaleco e vestimentas adequadas durante as aulas práticas;
• Alunos sem os devidos EPI´s solicitados não permanecerão no laboratório;
• Antes de manusear o microscópio lavar e secar bem as mãos;
• Não manusear o equipamento com as mãos sujas ou molhadas;
• Prender cabelos compridos, tomar cuidado em relação a adornos do tipo brincos, correntes,
gargantilhas, relógios... Certos adornos podem prender-se ao microscópio durante o
manuseio;
• Estritamente proibido a entrada de bebidas e comida dentro dos laboratórios;
• É essencial conhecer as partes ópticas e mecânicas dos microscópios;
• Evite afrouxar o parafuso do condensador;
• Deixar o equipamento ligado sem estar usando ou quando se ausentar por muito tempo;
• Evitar contato direto com as objetivas, utilizar o revólver para a troca de posição;
• O óleo de imersão deve ter contato apenas com objetiva 100X;
• Após o uso da objetiva de 100x com óleo de imersão, realizar limpeza seguindo a orientação
do responsável;
• O macrométrico deve ser usado com as objetivas de 40x e 100x.
• Ao movimentar a mesa para ajustes, verifique se a lâmina está próxima e se há espaço para
realizar o ajuste;
• Para mantê-lo seguro, cubra com a capa;
• Na remoção do equipamento, segure-o firmemente com uma das mãos no braço e outra na
base, apoiando-o junto ao corpo;
• Coloque-o bem apoiado sobre a mesa de trabalho de superfície plana, evitando qualquer
movimentação brusca;
• Nunca desloque o aparelho com a lâmpada acesa ou logo após ter sido apagada;
• Não deixar o microscópio com a objetiva de maior aumento encaixada e a mesa levantada;
• Não deixar o microscópio com o diafragma fechado e condensador abaixado;
• Não desacoplar a câmera do microscópio.
4.3. Orientação específicas sobre manuseio do equipamento
• Selecionar a objetiva de menor aumento e baixar a platina completamente. Se o microscópio
foi utilizado corretamente anteriormente, deve estar nesta posição.
• Colocar a lâmina com o objeto a ser visualizado sobre a platina e travar com a pinça.
• Começar a visualização com a objetiva de menor aumento.
• Realização do enfoque.
• Aproximar o máximo possível a lente do objeto a ser visualizado através do ajuste
macrométrico. Esse deve ser feito sem olhar diretamente pela ocular, para evitar possíveis
danos ao objeto ou a própria lente.
• Olhando através da ocular, comece a aproximar a amostra da objetiva até que consiga ter
uma
visualização nítida, com o ajuste micrométrico realizar o enfoque fino.
• Mude para objetiva seguinte. A imagem deve estar quase focada, se necessário gire o
micrométrico para melhorar o enfoque fino. Se ao trocar de objetiva o objeto sumir
completamente, é preferível voltar a objetiva anterior e refazer os passos do item 3. A objetiva
de 40X enfoca muito próximo da amostra e com isso pode vir a causar acidentes: como
contaminar a lente com a amostra em análise se negligenciado as precauções anteriores ou
manchar a lente com o óleo de imersão se a objetiva de 100X já foi utilizada.
• Utilizar a objetiva com óleo de imersão:
• Baixe totalmente a platina.
• Suba totalmente o condensador para visualizar o círculo de luz que indica a zona que irá
visualizar e onde irá colocar o óleo de imersão.
• Gire o revólver até a objetiva de imersão deixando entre a objetiva de 40X e 100X.
• Coloque uma gota de óleo de imersão sobre o círculo de luz.
• Termine de girar o revólver, suavemente, até a objetiva de imersão (100X).
• Olhando diretamente na objetiva, suba a platina lentamente até que a gota de óleo toque a
lente. Neste momento é possível notar a gota cobrindo a lente.
• Com auxílio do ajuste micrométrico, enfocar a amostra cuidadosamente. A distância de
trabalho entre a objetiva e a lâmina é mínimo, menor que a distância da objetiva de 40X, por
isso o risco de acidente é muito grande.
• Uma vez colocado o óleo de imersão sobre a amostra, não pode retornar a objetiva de 40X,
pois a lente pode vir a ficar manchada. Por tanto, se deseja focar outra área é necessário baixar
a platina e repetir o processo desde o passo 3.
• Uma vez finalizada a visualização da amostra deve-se baixar a platina e colocar o revólver
com na posição da menor objetiva. Neste momento já pode retirar a lâmina da platina. Nunca
retire a lâmina com a objetiva de imersão em posição de observação.
• Limpar a objetiva com cuidado e fazendo uso de um papel especial para limpeza óptica.
4.4. Orientações sobre limpeza do equipamento
• Manter a platina do microscópio limpa e seca. Se houver algum resíduo de óleo de imersão,
limpar com um papel macio de óptica umedecido com solução limpante (fornecidos pelo
responsável do laboratório).
• Caso haja poeira na superfície do equipamento, limpar com um papel macio de óptica seco.
Não utilizar água, álcool, acetona ou qualquer outra substância.
• Para limpar a área externa das oculares e lentes, utilize papel macio de óptica com
movimento
circulares.
• Não utilizar quantidades exageradas de óleo de imersão sob as lentes. Na maioria dos casos,
uma gota de aproximadamente 5,0mm de diâmetro é suficiente.
• Nunca tocar as lentes com as mãos. Se estiverem sujas, limpar suavemente com um papel
macio de óptica.
• Após utilizar a objetiva com o óleo de imersão, limpá-la com papel macio de óptica
especiais para lentes, passando o papel suavemente somente em movimentos circulares e em
um sentido. Caso o óleo de imersão seque na objetiva, limpar com álcool-cetona (7:3) ou
xilol, previamente disponibilizado pelo responsável do laboratório.
• Não utilizar solventes excessivamente, pois podem danificar o equipamento.