TÉCNICAS DE
P A R A SITO L O GI A
Produzido por Gabriel Oliveira
@BIOMEDGABRIEL
Brenda Gonçalves - [email protected] - IP: 177.131.175.181
SUMÁRIO
Método de Hoffman,
_______________________________________________
Pons e Janer ou Lutz 3
Técnica de Willis
_______________________________________________ 4
Técnica de Ritchie
_______________________________________________ 5
Técnica de Faust
_______________________________________________ 6
Técnica de Graham
_______________________________________________ 7
Técnica de Baermann-Moraes
_______________________________________________ 8
Técnica de Rugai
_______________________________________________ 9
Técnica de Kato-Katz
_______________________________________________ 10
Exame direto _______________________________________________
a fresco 11
Gota espessa _______________________________________________ 11
Referencias _______________________________________________ 12
ATENÇÃO!!!
Este conteúdo é destinado apenas para o uso privado da pessoa que o obteve. Por conseguinte, é estritamente
proibido compartilhá-lo e/ou comercializá-lo, pois tal ato constitui uma violação do artigo 184 do Código Penal
Brasileiro. Essa transgressão pode resultar em uma pena de prisão de 3 meses a 4 anos, além da imposição de
uma multa.
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MÉTODO DE HOFFMAN, PONS E JANER OU LUTZ
OBJETIVO
Pesquisa de ovos, larvas e cistos
FUNDAMENTO
Sedimentação espontânea em água por ação da gravidade
AMOSTRA
Material fecal não preservado (fezes frescas)
TÉCNICA
1. Colocar proximamente 5g de fezes frescas em um beaker de 250ml
2. Adicionar 50 a 60ml com água e homogeneizar a amostra
3. Coar a emulsão para dentro de um copo cônico utilizando uma gaze dobrada em 4
ou uma tela de plástico ou metal limpa
4. Acrescentando mais água no recipiente deixando com um volume de 3/4
5. Deixar sedimentar por 2 horas
6. Retirar pequena porção do sedimento utilizando uma pipeta Pasteur e
depositando-o sobre uma lâmina
7. Adicionar lugol e cobrir com lamínula.
8. Examinar ao microscópio a presença de ovos, larvas e cistos utilizando nas
objetivas de 10x e 40x
Fonte: JUNIOR; CALVÃO, 2020
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TÉCNICA DE WILLIS
OBJETIVO
Pesquisa de ovos de baixa densidade (leves)
FUNDAMENTO
Flutuação
AMOSTRA
Material fecal não preservado (fezes frescas)
TÉCNICA
1. Coletar e colocar cerca de 2g de amostra em um frasco de borel
2. Completar 1/4 da capacidade do recipiente com solução saturada de cloreto de
sódio
3. Homogeneizar a solução
4. Completar o volume até formar um menisco
5. Colocar uma lamínula sobre o menisco
6. A lamínula deve ficar em contato com o menisco durante 20 minutos e não
deverá haver formação de bolhas de ar
7. . Remover a lamínula e inverter rapidamente sua posição sobre uma lâmina.
8. Examinar ao microscópio na objetiva de 10x e 40x
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TÉCNICA DE RITCHIE
OBJETIVO
Pesquisa de ovos, cistos e larvas
FUNDAMENTO
Centrífugo-sedimentação
AMOSTRA
Material fecal não preservado (fezes frescas)
TÉCNICA
1. Dissolver cerca de 1 ou 2g da amostra colhidas de diversas partes do bolo fecal
em 10ml de água corrente ou solução salina a 0,85%.
2. Filtrar a suspensão através de gaze.
3. Centrifugar por dois minutos a 1500rpm
4. Decantar o sobrenadante e adicionar 1 a 2ml de água corrente e centrifugar
novamente
5. Repetir a etapa 4, até que o sobrenadante se apresente relativamente claro.
6. Completar o volume da suspensão em 10ml com formol a 10%. Deixar em repouso
durante cinco minutos.
7. Adicionar 3ml de éter ou acetato de etila, fechar o tubo e agitar vigorosamente e
centrifugar mais uma vez
8. Decantar o sobrenadante (3 camadas) e observar o sedimento formado no
microscópio (objetivas de 10x e 40x)
4. camada de éter na superfície
3. tampão de detritos fecais
2. camada de formalina
1.sedimento no fundo do tubo
contendo os parasitos
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TÉCNICA DE FAUST
OBJETIVO: Pesquisa de cistos de protozoários e de ovos leves
FUNDAMENTOS: Centrífugo-Flutuação em sulfato de zinco
AMOSTRA: Material fecal não preservado (fezes frescas)
TÉCNICA
1. Dissolver cerca de 5g da amostra colhidas de diversas partes do bolo fecal em
20ml de água corrente
2. Homogeneizar a solução e depois filtrar em uma gaze
3. Colocar o material em um tubo cônico e fazer a centrifugação por 120 segundos
usando uma velocidade de 1.500 rotações por minuto.
4. Descartar o líquido que fica acima da camada de sedimento e ressuspender
adicionando mais 10 ml de água.
5. Repita os passos de 2 a 3 vezes até o sobrenadante ficar claro
6. Descartar o líquido transparente que fica acima do sedimento e ressuspender o
sedimento usando uma solução de sulfato de zinco a 33%, com densidade de 1,18
g/ml e fazer mais uma centrifugação.
7. Usando uma alça de platina, remover a camada superficial formada. Colocar em
uma lâmina com uma gota de lugol e uma lamínula.
8. Analisar a amostra no microscópio
5g 20ml
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TÉCNICA DE GRAHAM
OBJETIVO: Pesquisa na região anal e perianal de ovos de E. vermicularis e com
menos freqüência ovos de Taenia spp
TÉCNICA
1. Em um tubo de ensaio colocar uma tira de fita adesiva Durex, expondo a parte
aderente.
2. Deixar um pequeno espaço na fita para anotar as informações do paciente.
3. Abrir as nádegas e aplicar a parte aderente da fita na região perianal.
4. Remover a fita, colocá-la sobre uma lâmina de microscopia e examinar ao
microscópio.
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TÉCNICA DE BAERMANN-MORAES
OBJETIVO
Pesquisa de nematóides.
FUNDAMENTO
Termo-hidrotropismo
AMOSTRA
Material fecal não preservado (fezes frescas)
TÉCNICA
1. Encher o funil com água corrente, aquecida a 40-45°C
2. Abrir a pinça de Mohr, deixando escorrer uma pequena quantidade de água afim
de evitar a formação de bolhas de ar na haste e no tubo
3. Colocar cerca de 10g de fezes frescas em uma gaze ou em um filtro descartável
4. Deixar repousar por 2 horas
5. Coletar 5ml de água utilizando em um tubo cônico
6. Centrifugar a 1000rpm durante 1 minuto
7. Coletar o sedimento, corar com lugol para a identificação das características
morfológicas e observar ao microscópio nas objetivas de 10x e 40x
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TÉCNICA DE RUGAI
OBJETIVO
Pesquisa de larvas de S. stercoralis.
FUNDAMENTO
Hidrotropismo
AMOSTRA
Material fecal não preservado (fezes frescas)
TÉCNICA
Colocar as fezes do recipiente de coleta em uma gaze, fazendo uma pequena
sacola.
Preencher entre 70 a 100 ml de água quente (40-45ºC) em um copo cônico.
Colocar a gaze com as fezes dentro do copo cônico, deixando as fezes em
contato com a água quente.
Deixar descansando por uma hora.
Retirar o sedimento do fundo usando uma pipeta e transferir para uma lâmina.
Adicionar lugol e colocar uma lamínula por cima.
Observar a amostra ao microscópio.
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TÉCNICA DE KATO-KATZ
OBJETIVO
Pesquisa de ovos, cistos e larvas
FUNDAMENTO
Centrífugo-sedimentação
AMOSTRA
Material fecal não preservado (fezes frescas)
TÉCNICA
1. Colocar uma pequena amostra de fezes formadas sobre um papel absorvente.
2. Apertar as fezes na tela metálica ou de náilon.
3. Tirar as fezes que passaram para o lado de cima da tela e colocá-las com a ajuda
de um palito, no buraco do cartão sobre uma lâmina de vidro.
4. Depois de encher completamente o buraco, retirar o cartão com cuidado,
deixando as fezes sobre a lâmina.
5. Colocar papel celofane (previamente mergulhado na solução de verde-malaquita
por pelo menos 24 horas) sobre as fezes.
6. Inverter a lâmina sobre uma folha de papel e apertá-la.
7. Depois de duas horas de repouso em temperatura ambiente, contar os ovos
encontrados e multiplicar por 24 para saber o número total de ovos por grama
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EXAME DIRETO A FRESCO
Pesquisa de trofozoítos vivos
1. Colocar entre duas a três gotas de solução salina a 0,85% em uma lâmina de
vidro.
2. Utilizando um palito, coletar várias áreas das fezes e transferir uma pequena
quantidade para a lâmina.
3. Espalhar as fezes, adicionando lugol para facilitar a visualização dos parasitas e
observar ao microscópio.
GOTA ESPESSA
OBJETIVO
A técnica permite identificar diferentes espécies de Plasmodium e o estágio
evolutivo do parasita presente no sangue. Além disso, também é possível detectar
outros parasitas do sangue como Trypanosoma sp e microfilárias.
TÉCNICA
Colocar entre três a quatro gotas de sangue fresco (coletado por punção venosa
ou polpa digital) em uma lâmina de vidro.
Usando a ponta de outra lâmina, espalhar o sangue em movimentos circulares, do
centro para a borda, criando uma área com cerca de 2 cm de diâmetro.
Deixar secar na temperatura ambiente.
Colocar a lâmina com a gota espessa em um recipiente com água corrente ou
solução salina para quebrar as hemácias.
Retirar a lâmina cuidadosamente, deixar secar, fixar e corar.
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REFERÊNCIAS
LINKS
Atlas de Parasitologia da Universidade Federal Fluminense. Disponível em:
<http://atlasparasitologia.sites.uff.br/>. Acesso em: 26 de outubro de 2023.
CDC (Centers for Disease Control and Prevention). DPDx: Laboratory Identification of Parasitic
Diseases of Public Health Concern. Disponível em: <https://www.cdc.gov/dpdx/az.html#s>. Acesso
em: 26 de outubro de 2023.
MSD Manuals. Giardíase. Disponível em: <https://www.msdmanuals.com/pt-
br/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-parasit%C3%A1rias-
protozo%C3%A1rios-intestinais-e-microspor%C3%ADdios/giard%C3%ADase>. Acesso em: 26 de
outubro de 2023.
MSD Manuals. Tricomoníase. Disponível em: <https://www.msdmanuals.com/pt-
br/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/doen%C3%A7as-sexualmente-transmiss%C3%ADveis-
dsts/tricomon%C3%A7%C3%ADase>. Acesso em: 26 de outubro de 2023.
Secretaria de Estado da Saúde do Paraná (SESA-PR). Esquistossomose. Disponível em:
<https://www.saude.pr.gov.br/Pagina/Esquistossomose>. Acesso em: 26 de outubro de 2023.
TUASAÚDE. Wuchereria bancrofti: o que é, sintomas e como tratar. Disponível em:
https://www.tuasaude.com/wuchereria-bancrofti/. Acesso em: 02 mai. 2023.
LIVROS
NEVES, David Pereira. Parasitologia Humana, 11ed, São Paulo:Atheneu, 2005
DE CARLI, Geraldo Attilio. Parasitologia clínica: seleção de métodos e técnicas de laboratório para o
diagnóstico das parasitoses humanas. 2ed. São Paulo: Atheneu, 2007
12
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