rna-seq下游分析
时间: 2025-01-18 08:29:48 浏览: 68
### RNA-seq 下游分析方法和工具
#### 数据预处理
在进行任何生物信息学分析之前,RNA-seq 原始数据通常需要经过质量控制(QC)、适配体去除以及读取对齐等预处理步骤。这些操作可以利用多种软件完成,如 FastQC 和 Trimmomatic 进行 QC 及清理工作;Bowtie2 或 STAR 实现高效的序列比对。
对于定向测序技术产生的 reads,在构建索引库时需特别注意参数设置以确保方向性得以保留并正确解析[^3]。
#### 差异表达基因检测
差异表达分析旨在识别不同条件下显著变化的转录本水平。常用的统计模型包括 DESeq2、edgeR 等广义线性回归框架来估计样本间的变异情况,并据此计算 p-value 来判断是否存在统计意义上的差别。
此外,当涉及到染色质环结构的研究时,diffloop 提供了一套基于 ChIA-PET 技术平台开发出来的专门用于比较两个或多个组间染色体内交互频率差异的方法论体系[^2]。
#### 转录变体鉴定与定量
通过拼接算法可以从短片段重建完整的 mRNA 序列从而发现新的剪接位点或是已知基因的新亚型。Cufflinks 家族程序集就是这样一个强大的解决方案之一它不仅能够预测 novel isoforms 同样支持跨样品一致性评估任务。
而为了更精确地描述复杂多样的转录事件,则有必要深入探究 alternative splicing patterns 的特征及其调控机制这往往依赖于特定实验设计下的高级数据分析策略比如使用 StringTie 结合 Ballgown 对时间过程中的动态改变模式展开探讨或者借助 SUPPA2 探讨 AS 类型富集状况等等[^1]。
```python
import pandas as pd
from scipy.stats import fisher_exact
def calculate_fisher_test(contingency_table):
oddsratio, pvalue = fisher_exact(contingency_table)
return {"odds_ratio": oddsratio, "p_value": pvalue}
contingency_table = [[80, 40], [70, 90]]
result = calculate_fisher_test(contingency_table)
print(f"Fisher's exact test results:\nOdds Ratio={result['odds_ratio']:.4f}, P Value={result['p_value']:.4f}")
```
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