DHV-1 E53 VP1基因原核表达与多抗制备：方法与应用

该研究论文详细介绍了1型鸭肝炎病毒(E53株)VP1基因的原核表达以及多克隆抗体的制备过程。研究人员付培芬、刘琰、李鑫和王君伟合作，利用RT-PCR技术从DHV-1 E53株中扩增出VP1基因，并将其整合到pET-30a表达载体中，构建了名为pET-30a-VP1的原核表达体系。这个宿主菌选择的是Rosetta(DE53) plysS，这是一种适合外源基因高效表达的细菌系统。 通过加入诱导剂IPTG，他们成功地在大肠杆菌中表达了VP1蛋白。SDS-PAGE分析证实了VP1蛋白的表达，而Western blot实验则验证了表达产物具有良好的免疫原性，表明其可以触发免疫反应。 接下来，作者将表达产物进行纯化，随后免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体。结果显示，该多克隆抗体具有很高的特异性，间接ELISA检测显示其效价达到1:12800，中和试验则进一步证实其能中和10份样品中的DHV-1，中和抗体效价高达1:32。这些成果对于深入理解VP1蛋白的功能以及开发诊断试剂盒具有重要意义。 研究中还强调了资金支持，包括高等学校博士学科点专项科研基金、黑龙江省科技攻关项目以及东北农业大学博士启动基金。作者付培芬的背景表明她专注于病毒分子生物学与生物制品学领域，通讯联系人王君伟教授也分享了他的专业视角和联系方式。 这篇首发论文不仅提供了1型鸭肝炎病毒VP1基因在原核表达中的实证方法，还展示了其作为疫苗或诊断工具开发的潜在价值，对今后的疾病防控和基础科学研究具有重要参考价值。